犬利什曼病的流行、诊断和防制

　　动物源性内脏利什曼病(ZVL)是重要的寄生虫病之一。该病在中美、南欧、北非、东西非的下撒哈拉地区，西南亚和中国流行。特别是罹及小儿和免疫缺陷的成人。其家畜保虫宿主主要是犬，森林中的保虫宿主为犬科动物。在此病存在的地区，感染的野生动物进入农家掠食家禽时，寄生虫进入居家流行环。此时，庭院附近的白蛉因吸食野生动物血而感染，尔后白蛉将病原传染家犬，形成人附近的犬—昆虫—犬传播环。如感染的白蛉叮咬人，人即获感染［1］。现将犬利什曼病的流行、诊断和防制综述如下。

　　1　犬利什曼病的流行

　　在意大利北部维亚艾米利亚地区曾有黑热病爆发，1971～1972年共发现60例利什曼病患者，其中58例发生在丘陵地带。Pampiglione等(1974)［2］对无症状的8 454只犬作补体结合试验，阳性率为1.6%。当地有Phlebotomus perfiliewi存在。在法国南部的马赛和尼斯等地有较多的黑热病病人。AL-Zahrani等(1988)［3］检测了分布在沙特阿拉伯两个利什曼病人高发区的野狗群。将捕获的89只野狗杀死，取肝脾组织做成印片，镜检发现6只(6.7%)犬有利什曼原虫。Evans等(1990)［4］在巴西东北部受检的405条犬中IFA血清法检出阳性69例(17%)，而在当时，家犬是杜氏利什曼原虫恰氏亚种的主要保虫宿主。在以色列中部地区毗邻大都市的村庄中有内脏利什曼病的流行。Benath等(1998)［5］以粗制利什曼原虫抗原为诊断抗原的ELISA结果显示：已有病例报告的两个村庄受检的122只家犬，14只阳性(11.5%)，邻近5个村庄受检的99只家犬，1只阳性(1.0%)。其中12只犬经活检后培养出利什曼原虫前鞭毛体，经CP－PCR(ciamped polymorphic-PCR)，单克隆抗体证实为婴儿利什曼原虫。

　　犬感染利什曼原虫后主要症状有淋巴结肿大，眼、鼻周围糠状皮炎，皮毛无光泽和脱落，鼻出血，角膜结膜炎，趾甲弯曲，体重明显下降，肝脾肿大，在许多组织内包括皮肤均可发现原虫。在欧洲的犬利什曼病疫点，50%以上阳性犬无症状，但这类犬和有症状的一样能感染白蛉［6］。Dye(1988)［7］根据法国南部犬内脏利什曼病传播的生物学资料，建立了一个分室模型，该模型有两个特点：①能预测白蛉密度的阈值，低于此阈值，传播将被阻断；②当白蛉高密度时，犬内脏利什曼病患病率最大值应作为未知量来考虑。

　　在我国陇南、川北的黑热病高发区内，犬内脏利什曼病的患病率历来甚高，属于犬源性内脏利什曼病流行区。1985年，甘肃省地方病防治所在文县抽查4个发病乡6个自然村的家犬90只，经骨髓穿刺查出病犬15只(16.7%)，其中有1个自然村共养7只犬，在抽查的5只犬中有4只是病犬。1986年，在文县另一流行村灭犬过程中，随意查犬4只，全部阳性。1987年，又在礼县的两个流行村内查犬26只，检出带有利什曼原虫的病犬6只(23.1%）［8］。王秀珍等(1991)［9］用快速ELISA法检测了采自四川省汶川县黑热病重流行区的124份犬血清，查出阳性犬39只，占31.45%。王子龙等(1991）［10］用利什曼原虫kDNA印迹杂交法对采自甘肃省文县黑热病流行区的30只家犬耳缘皮肤组织印迹样品进行杂交试验。结果有8份呈阳性反应(26.7%)。由此可以认为这些流行区的犬利什曼病相当普遍。

　　2　犬利什曼病的诊断

　　2.1　骨髓穿刺涂片法

　　此法最大的优点是以查出病原体为诊断依据，故准确性高，但取骨髓及检查过程均较为繁杂，且耗费大量人力、物力［8］。近年常将此方法作为其他实验检测手段的对照［9，10］。

　　2.2　检测血清抗体

　　2.2.1　较早用于检测病犬血清抗体的方法有补体结合试验(CFT)［2，11］，间接血凝试验(IHAT)［12］和对流免疫电泳(CIEP)［12］。这些方法敏感性和特异性均不够高，现已很少采用。

　　2.2.2　间接免疫荧光抗体试验(IFAT)　Francesca等(1988)［12］用88只犬的血清作IFAT。结果，A、B、C三组的敏感性均为100%。D、E两组的特异性也均为100%。Evans等(1990)［4］在巴西东北部调查了405只犬，取其血样本作IFAT。结果，滤纸干血清法为8%的阳性率，用血清则为17%的阳性率。IFAT虽然敏感性和特异性均较高，但仪器昂贵，不适合基层推广应用。

　　2.2.3　酶联免疫吸附试验(ELISA)　Srivastava等(1984)［13］在印度西北部用滤纸采血采集了325份犬血样本，并且同时收集血清，将血清和滤纸血作ELISA。结果，6只犬呈阳性反应，而病原学检查皆呈阴性反应。Evans等(1990)［4］在巴西东北部取405只犬血样本作ELISA，阳性率为38%。而且，所有病原学检查阳性的标本，ELISA检测均阳性。王秀珍等(1991)［9］用快速ELISA法检测了汶川县黑热病重流行区的124份犬血清，阳性率为31.45%，而骨髓涂片法的阳性率为19.35%。对47份采自非流行区的正常犬血清，只有1例呈假阳性反应，占2.13%。用快速ELISA法检测实验感染了旋毛虫、肺吸虫、钩虫、弓形虫等犬血清共26份，均未见交叉反应。说明ELISA的敏感性和特异性均较高。

　　2.3　检测血清循环抗原

　　胡孝素等(1991)［14］用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)及骨髓穿刺涂片法对四川省汶川县125只犬进行感染利什曼原虫调查，骨髓涂片法查出原虫的阳性犬46只，感染率为36.8%。而McAb-AST的结果与骨髓涂片阳性符合率为97.8%，总符合率95.2%。王雅静等(1991)［15］用McAb-AST检测采自甘肃省文县的30份犬血清循环抗原，阳性率为30%，与骨髓穿刺涂片法的总符合率为86.7%。同时检测50只非流行区犬血清，只有1只出现阳性反应(2%)。来自7只自然感染犬弓蛔虫幼犬血清及12只实验感染斯氏狸殖吸虫的犬血清中，McAb-AST试验皆呈阴性反应。王雅静等(1993)［16］将McAb-AST用于检测10只实验感染杜氏利什曼原虫的小犬血清循环抗原，感染后5天即出现阳性反应，并随着时间的加长，阳性反应程度也有加强。初步建立了犬利什曼病的早期诊断方法。McAb-AST具有较高敏感性和特异性，所需样品量微(2μl)，并且可用于早期诊断。