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功能性TCR Vβ分布的简便快速检测方法的建立
中华微生物学和免疫学杂志 1999年第1期第19卷 免疫检测
作者：王江方 Antije Necker Francois Romagne Corinne Leget 张学光
单位：王江方 张学光（215007 苏州医学院免疫室）；Antije Necker,Francois Romagne,Corinne Leget（Immunotech S.A,Marseille,France）
研究T细胞受体基因库（TCR）的分布及其可能抗肿瘤、抗病毒的细胞免疫机制具有重要的理论意义和潜在的临床运用价值。为简便、 快速地检测机体TCR基因库的变化，采用流式细胞仪的三标记(PE-，FITC-，PECy5-)直接检测技术，利用不同标记的21种特异性Vβ单抗，科学地分为7组，建立了简便、快速检测人功能性TCR库的试剂盒，该试剂盒可以覆盖60％ TCRαβ基因库。tube 1- tube 7在CD3-PECy5窗口下较好地检测了Vβ的分布。 该分组在同一标本中反复检测10次，其检测Vβ值的变异系数CV＜0.02。同时，用单抗阻断实验证实了其检测的特异性，即在各组中分别加入（20-50）μg/ml纯化Vβ单抗， 可以分别阻断相应的标记Vβ单抗。
使用该试剂盒检测了20个正常人外周血，获得了21种Vβ在CD3，CD4，CD8中所占的百分数（见表1），这为临床艾滋病、T细胞性白血病等疾病转归的监测提供了有力的手段。
表1 21种Vβ占CD3、CD4、CD8的百分率（％）
| Vβ | CD3 | CD4 | CD8 |
| Vβ13.1 | 4 | 4.26 | 3.04 |
| Vβ13.6 | 1.72 | 1.62 | 1.21 |
| Vβ8 | 5.19 | 4.87 | 3.07 |
| Vβ9 | 3.56 | 4.58 | 3.37 |
| Vβ16 | 0.8 | 0.85 | 0.6 |
| Vβ17 | 4.72 | 5.03 | 4.08 |
| Vβ18 | 1.44 | 1.95 | 0.68 |
| Vβ20 | 2.35 | 2.18 | 1.39 |
| Vβ5.1 | 5.3 | 6.74 | 2.83 |
| Vβ5.3 | 1.07 | 1.07 | 1.15 |
| Vβ3 | 4.24 | 3.93 | 3.11 |
| Vβ7 | 2.54 | 1.87 | 2.77 |
| Vβ5.2 | 1.25 | 1.4 | 1.01 |
| Vβ12 | 1.54 | 1.79 | 1.18 |
| Vβ2 | 7.18 | 8.53 | 4.65 |
| Vβ23 | 0.94 | 0.42 | 1.36 |
| Vβ21.3 | 2.28 | 2.33 | 1.92 |
| Vβ1 | 3.2 | 2.92 | 3.23 |
| Vβ11 | 1.03 | 0.9 | 0.75 |
| Vβ14 | 3.18 | 2.25 | 4.51 |
| Vβ22 | 3.68 | 3.96 | 2.3 |
| 合计 | 60.97 | 63.45 | 48.21 |
（收稿：1998-02-23 修回:1998-05-07)