广东省登革热病原学和血清学检测

【摘要】　目的　了解1978～1995年广东省多次发生登革热Ⅰ～Ⅳ型流行的病原学。方法　在流行区捕捉9种蚊媒，进行病毒分离。结果　阳性率白纹伊蚊为20.69%，埃及伊蚊为18.95%，致乏库蚊为10.29%，其余6种蚊媒为阴性。这三种蚊媒间的病毒分离阳性率无显著性差异(χ²=2.77,P＞0.05)。在海南岛和湛江地区，埃及伊蚊是主要的传播媒介，其他的流行区是白纹伊蚊。患者发病3天内病毒分离的阳性率在73.58%～82.05%之间，发病第8天仍可分离到病毒。患者双相血清检测抗体的阳性率最高为93.89%，最低为33.71%；发病第5天后可检测到1gM抗体，最长可维持至病后第33天。结论　发病1～4天可采血进行病毒分离，5天后可检测IgM抗体，进行早期快速诊断。

　　An etiological and serological study on Dengue epidemic in Guangdong ProvinceWen Jianhua,Liang Fengping,Du Fu,et al.Institute of Epidemic Prevention of Guangdong Province, Guangzhou 510300

　　Abstract　In 1978-1995,Dengue fever epidemics(serotype 1-4)occured in Guangdong Province. Among 9 species of mosquitoes found in the epidemic areas,the positive rate of virus isolation in Aedes albopictus was 20.69%,in Aedes aegypti18.95%,in Culex quinquefasciatus 10.29%, Dengue viruses were not isolated in other6 species of mosquitoes.The positive rate of virus isolation in the three species showed no significant differences (χ²=2.77 P＞0.05). Aedes aegypti was the main transmitting vector in Hainan Island and Zhanjiang District, whereas aedes albopictus was in the other epidemic areas.The positive rate of virus isolation within 3 days of disease onset was between 73.58% and 82.05%,but the virus could still be isolated on the 8th day of disease onset. The highest antibody positive rate from the patients' paired-sera was 93.89% and the lowest was 33.71%.IgM antibody could be detected 5 days after the disease onset in some cases, even on the 33th day of disease onset. These results suggest that virus isolation by collecting patient's blood within 1-4 days of disease onset, or IgM antibody detection after5days of disease onset can be used as method for early and rapid diagnosis of the disease.

　　Key words:　Dengue fever/Epidemiology　　Dengue fever virvs　　Mosquitoes　　Antibody,viral

　　广东省自佛山市在1978年首次发生登革热(Dengue fever,DF)Ⅳ型流行后^〔1〕，至今已发生13次DF暴发流行或局部流行。现将我省自1978～1995年间，在DF方面所做的病原学和血清学工作报告如下。

　　1　材料和方法

　　收集广东省和1988年前海南岛的DF有关资料和论文进行总结，病毒的分离和鉴定及血清学检测，按参考文献〔1～6〕方法进行。

　　2　结果

　　2.1　患者血液中DF病毒的分离　1978～1995年DF的Ⅰ～Ⅳ型均出现多次流行，1985、1987年出现两个型别的流行，但发生在不同地区，1991年广州地区出现两个型别的流行，1993年佛山出现从同一患者中分离出D2和D4的混合感染。见表1。

　　2.2　各年份蚊媒DF病毒的分离结果　蚊媒种间的病毒分离阳性率差异很大，在海南不同年份的埃及伊蚊，病毒分离阳性率最高可达100.00%，最低仅为2.56%。同年份同流行区不同蚊种间的分离阳性率亦有差异。9种蚊媒

　　表　1　1978～1995年患者血液中DF病毒的分离

　　Tad.1　DF virus isolation from serum specimens of suspected DF cases in 1978-1885

年份	地点	标本数	阳性数	阳性率(%)	鉴定型别
Year	Area	No.of		Positive	Type of
		specimens	Positive No.	rate(%)	virus
1978	佛山	134	3	2.24	D4
	Foshan
1979	中山	27	4	14.81	D1
	Zhongshan
1980	海南	150	95	63.33	D3
	Hainan
1981	广州	74	41	56.25	D3
	Guangzhou
1982	徐闻	4	3	75.00	D3
	Xuwen
1985	广州	35	29	82.86	D1
	Guanzhou
	海南	5	5	100.00	D2
	Hainan
1986	海南	554	229	41.34	D2
	Hainan
1987	广州	618	177	28,64	D2
	Guanzhou
	澄海	8	4	50.00	D3
	Chenghai
1990	广州	107	37	34.58	D4
	Guangzhou
1991	广州	183	60	32.79	D1、D4
	Guangzhou
1993	佛山	209	111	53.11	D2、D4
	Foshan
1994	广州	2	2	100.00	D1
	Guangzhou
1995	番禺*	51	28	54.90	D1
	Fanyu
合计	(Total)	1950	715	36.67	D1～D4

　　*: 1995年番禺包括广州、肇庆、东莞、潮安等地

　　*: Specimens collected from Fanyu in 1995 including those from Guangzhou, Zhaoqing, dongwan, Chaoan et al

　　中只有埃及伊蚊、白纹伊蚊和致乏库蚊分离出DF病毒，白纹伊蚊的病毒分离阳性率最高为20.7%(6／29)，致乏库蚊的阳性率最低为10.3%(7／68)，埃及伊蚊的阳性率为18.9%(18／95)，这三种蚊媒间病毒分离阳性率无显著性差异(χ²=2.77,P＞0.05)。见表2。

　　2.3　DF患者发病天数与病毒分离阳性率的关系　发病天数与病毒分离阳性率有高度负相关关系，r=-0.9859,P＜0.0005，见表3。

　　2.4　患者血清DFIgG抗体的检测结果　见表4。

　　2.5　DF IgM抗体检测与发病天数的关系　DFIgM抗体最早检出时间为发病第5天，最长维持至第33天。5～33天的DF igM检出平均阳性率为82.35%(28／34)，11份1～4天的标本未能检出DF IgM抗体。

　　3　讨论

　　1978年广东省首次发生DF流行时，由于当时D4型病毒对乳小白鼠不敏感，导致分离率偏低。1980年国内首次使用C6／36细胞分离DF病毒，该细胞对DF病毒十分敏感，分离阳性率高^〔3〕。1985年海南岛发生DF第二次大流行时，用C6／36细胞分离DF病毒，阳性率可高达100%。目前，DF在广东的来源，还无法进行肯定。1985和1987年我省出现两个型别在不同地点的流行，提示DF的传染来源可能不是单一的。1991年广州出现D1和D4型流行，但以D1型为主，推测D4型病毒是上一年传下来的。1993年我省在佛山首次出现D2和D4型的混合感染患者^〔7〕，原因有待于调查。

　　蚊媒分离DF病毒方面，白纹伊蚊、埃及伊蚊和致乏库蚊，这三种蚊媒间病毒分离阳性率无显著性差异。但在不同的年份中，它们分离的阳性率相差极大。所有从蚊媒中分离出的DF病毒型别均与从患者中分离出的型别一致。说明蚊媒中所带的型别为流行型别。在海南、湛江一带，埃及伊蚊是优势蚊种，由于其室内活动较白纹伊蚊多，且对DF病毒敏感，故此引起的DF流行的危害性较大；而在广东的佛山、中山、东莞和广州等地由白纹伊蚊引起的DF流行，危害程度较小。我们做过DF病毒经卵传递的研究，未能证明白纹伊蚊可经卵传递DF病毒而导致DF的流行^〔8〕。1985～1987年海南岛均发生D2型流行，一年四季均有病例出现，提示本地的埃及伊蚊有可能成为DF病毒的保存宿主，今后是否会发展成为地方性疾病，

表2　各年份蚊媒DF病毒的分离结果

Tab.2　The results of DF virus isolation from mosquitoes by year

年份	地区	蚊媒种类	批数	阳性批数	阳性率(%)	鉴定型别
Year	Area	Species of	No.of	No.of	Positive	Type of
		mosquitoes	batch	positive batch	rate(%)	virus
1979	中山	白纹伊蚊	8	1	12.50	D1
	Zhongshan	A.albopictus
1980	海南	埃及伊蚊	39	1	2.56	D3
	Hainan	A.aegypti
		三节喙库蚊	8	0	0
		C.tritaeniorhynchus
		二节喙库蚊	1	0	0
		C.bitaeniorhynchus
		红胸库蚊	1	0	0
		C.rubithoracis
		棕头库蚊	1	0	0
		C.fuscocephalus
		迷糊按蚊	42	0	0
		A.vagus bonitz
		骚扰亚蚊	8	0	0
		A.subalbatus
1981	徐闻	埃及伊蚊	28	2	7.14	D3
	Xuwen	A.aegypti
	海南	埃及伊蚊	18	5	27.78	D3
	Hainan	A.aegypti
		白纹伊蚊	7	3	42.86	D3
		A.albopictus
		致乏库蚊	3	1	33.33	D2
		C.quinquefasciatus
1985	海南	埃及伊蚊	5	5	100.00	D2
	Hainan	A.aegypti
		致乏库蚊	3	1	33.330	D2
		C.quinquefasciatus
	广州	白纹伊蚊	3	1	33.33	D1
	Guangxhou	A.aegypti
		致乏库蚊	4	0	0
		C.quinquefasciatus
1986	海南	埃及伊蚊	5	5	100.00	D2
	Hainan	A.aegypti
		致乏库蚊	4	2	50.00	D2
		C.quinquefasciatus
	广州	白纹伊蚊	3	0	0
	Cuangzhou	A.albopictus
		致乏库蚊	46	1	2.17	D2
		C.quinquefasciatus
1990	广州	白纹伊蚊	4	1	25.00	D4
	Guangzhou	A.albopictus
		致乏库蚊	4	1	25.00	D4
		C.quinquefasciatus
1991	广州	白纹伊蚊	4	0	0
	Guangzhou	A.albopictus
		致乏库蚊	2	0	0
		C.quinquefasciatus
1993	佛山	未做
	Foshan	ND
1994	广州	蚊种不详	1	0	0
	Guangzhou	Species of mosquitoes are unknown
合计 　　Total			246	31	12.60	D1～D4

　　表　3　DF患者发病天数与病毒分离阳性率的关系

　　Tab.3　The relationship between days after onset of DF cases and positive rates of viral isolation

发病天数	病例数	阳性数	阳性率(%)
Days after	No.of	Positive	Positive
onset	cases	No	rate(%)
1	39	32	82.05
2	68	55	80.88
3	53	39	73.58
4	61	33	54.09
5	42	17	40.48
6	21	8	38.09
7	18	3	16.67
8	13	2	15.38
9	1	0	0
10	1	0	0
不明	36	14	38.89
Unknown
合计	353	203	57.51
Total

　　表　4　患者血清DF IgG抗体的检测结果

　　Tab.4　The IgG antibody detection from paired sera of suspected dF cases

年份	份数	双相血清确诊 　　阳性份数	阳性率(%)	血清学 　　鉴定型别
Year	No.	No.of confirmed	Positive	Serological
	of sera	cases by paired sera	rate(%)	type
1978	180	169	93.89	D4
1979	16	7	43.75	D1
1980	22	11	50.00	D3
1981	6	3	50.00	D3
1985	32	22	68.75	D1,D2
1986	63	43	68.25	D2
1987	69	29	42.03	D2,D3
1990	89	30	33.71	D4
1991	126	63	50.00	D1,D4
1993*	252	139	55.16	-
1994*	16	13	81.25	-
1995*	69	42	60.87	-
合计	940	571	60.74	D1～D4
Total

　　*：1993～1995年是用单相血清确诊

　　*：From 1993 to 1995 the confirmed cases was from one serum specimen

　　有待进一步的观察。与此类似的是1991年广州DF流行时，出现了D4型的跨年度流行。

　　患者发病天数与病毒分离阳性率的关系，第1～2天的分离率最高，随着发病天数延长分离率逐渐降低。因此，采血最好在1～3天内进行，有利于提高病毒检出。

　　在患者血清抗体检测方面，双相血清阳性率最高为93.89%，最低为33.71%。1995年DF流行时我们用IFAT检测DF抗体IgG，阳性率平均为60.87%(42／69)，最早可在发病第3天检出，DF抗体IgG的型间交叉现象严重^〔9〕，故此，对于流行型别的判断，应以分离出的病毒型别为依据。用单克隆抗体ELISA捕捉登革IgM，此法检测的结果与当地流行的毒株型别相符，结果清晰，无型间交叉反应^〔5〕，5～33天IgM平均阳性率高达82.35%(28／34)。而5～10天病毒分离阳性率仅为27.59%。从1978～1995年期间，广东除83～84、88～89和92年没有DF患者外，其余各年份均出现DF的流行。因此，DF在广东是一种危害严重的传染病，应引起人们的高度重视。

参　考　文　献

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