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系统性自身免疫病患者抗核抗体的分类测定
免疫学杂志 2000年第5期第16卷 短篇报道
作者：齐为民 郭力 姜南燕 刘树林
单位：齐为民（第四军医大学唐都医院检验科，陕西 西安 710038）；郭力（第四军医大学唐都医院检验科，陕西 西安 710038）；姜南燕（第四军医大学唐都医院检验科，陕西 西安 710038）；刘树林（第四军医大学唐都医院检验科，陕西 西安 710038）
关键词：自身抗疫性疾病；自身抗体；核酸
［中图分类号］ R544.12 ［文献标识码］ B
［文章编号］1000-8861（2000）05-0395-01
Taxonomic determination of antinucler antibodies in the patients with systemic autoimmune diseases
可提取性核抗原（ENA）中抗Sm、抗u1-RNP、抗SS-A、抗SS-B、抗ScL-70和抗JO-1分别是SLE、MCTD、SS、PSS、PM与DM的标志抗体，过去用琼脂双向扩散法、免疫荧光法、对流免疫电泳法、RNA-免疫沉淀法和免疫印迹法操作烦琐，结果判断不够客观，除免疫印迹法外均不能同时测定。本文介绍的EIA法具有简便、快速、灵敏和大批量同步半定量检测的优点，易于推广应用。
1 材料和方法
1．1 研究对象
1．1．1 器官非特异组：检测1996～1999年临床确诊的系统性结缔组织病患者144例。其中系统性红斑狼疮（SLE）38例，类风湿关节炎（RA）33例，混合结缔组织病（MCTD）19例，全身性硬皮病（PSS）20例，多发性肌炎（PM）和皮肌炎（DM）21例，多发性大动脉炎（PMA）13例。年龄13～69岁，平均37.3岁。男36例，女108例，男女之比为1∶3。
1．1．2 器官特异组：检测同期器官特异性AID35例，其中溃疡性结肠炎、重症肌无力各2例，ITP5例、肾综合征（含肾小球肾炎和尿毒症各2例）13例、慢性活动性肝炎8例和多发性硬化症5例。年龄10～70岁，平均28.8岁，男22例，女13例，男女之比为1．69∶1。
1．2 试剂与检测项目 抗ds-DNA及ENA多肽抗体试剂由美国 clark实验室提供；ds-DNA为抗IgG和IgM混合物；ENA为抗IgG、IgA和IgM混合物；ENA抗体为抗Sm、抗μ1-RNP、抗SS-A、抗SS-B、抗Scl-70和抗Jo-16项。
1．3 同步检测法（以2个样本为例）
分别加ENA和ds-DNA校正液于微孔板1A、2A横向孔中5 μl，加稀释液100 μl。1号患者血清纵向加于1B至1H孔中5 μl，2号样本纵向加于2B至2H 7个孔中各5 μl（96孔板检测12人）。
各孔加各自的酶结合物100 μl，25 °C 30 min，洗5次拍干。各孔加TMB 100 μl， 25 °C 10 min，各孔加2 N HCl 100 μl， 20 min，后于450型酶标仪测定吸光度。
计算及阳性判断标准：抗ENA6项及抗ds-DNA结果＝血清OD／校正液OD×已知各项目的校正系数。7项自身抗体比值≥1．10者为阳性。
2 结果与讨论
SLE患者7项指标中抗ds-DNA阳性率最高（73．8％），其次是抗SS-A（57．8％）和抗Sm（36．8％）；MCTD患者抗RNP较为理想（52.6％）；PSS患者抗Scl-70最好（65.0％），而且特异性较强；PM和DM患者抗Jo-1阳性率高（71．4％），特异性很强；抗SS-A和抗SS-B的特异性均较差。7项指标对RA和其它器官特异性AID患者均无诊断价值。这些结果与BANKS和VON等报道的结果和结论基本一致［1，2］。
尽管上述7项指标在系统性AID中具有一定应用价值，但灵敏度和特异性均不令人满意。近年来，国外对左旋DNA（Z-DNA）和补骨烯交连DNA（PC-DNA）自身抗体的基础研究已获阶段性进展［3，4］，因其具有高度特异性和敏感性，故不久将成为诊断与鉴别诊断SLE与其它系统性AID 的重要手段。
［作者简介］ 齐为民（1958－），男，甘肃舟曲县人，主管技师，本科，主要从事肿瘤标志物的研究。
［参考文献］
［1］ BANKS TA， BOBAKHANI F， POULOS-BT， et al． Characterization of cross-reactive anti-DNA autoantibodies in murine lupus［J］． Immunol Invest， 1993，22（2）：229－248．
［2］ VON-MUHLEN CA，TAN EM．Auto antibodies in the diagnosis of systemic rheumatic diseases ［J］． Semin Arthritis Rheum， 1995，24（4）：323－358．
［3］ MOINUDDIN， ARJUMAND S， ALI A． SLE autobodies binding to native calf thymus DNA brominated in high salt［J］． Lupus， 1998，7（8）：254－262．
［4］ HASAN R， ALI A，ALI R．Antibodies against DNA psorlen crosslink recognize unique comformation［J］． Biochem Biophys Acta， 1991，1 073（3）：509－521．
［收稿日期］ 1999-11-23； ［修回日期］ 2000-01-13