点击显示 收起
一、材料与方法
1.病例选择:20例中17例为乙肝后肝硬化,3例为其他原因合并腹水。15例有反复输血史。
2.材料及方法:(1)同时取患者血清和腹水。(2)HBV PCR检测方法:引物设置:5′-GCCTTGGGTGGCTTTGGGGC-3′(+),5′-CCTGAGTGCTGTATGGTGA-3′(-),终产物190 bp。以3 μl标本加入裂解液,65℃20分钟,90℃及95℃各10分钟。加入PCR反应液及1 U Taq酶,94℃30秒、60℃45秒,共循环30次。
3.免疫酶标法检测血清及腹水中乙肝标志物。
附表 20例腹水患者血清及腹水中乙肝标志物的检测(阳性例数)
标本 | 表面抗原 | 表面抗体 | e抗原 | e抗体 |
血清 |
17 |
0 |
7 |
5 |
腹水 | 9 | 1 | 5 | 2 |
血清腹水符合 | 9(n=17) | 5(n=7) | 2(n=5) |
二、结果
1.血清及腹水中HBV的检测:20例患者血清及腹水中HBV的阳性例数为10例和6例,其中无一例是非乙肝而输血的患者。17例乙肝患者血清和腹水中HBV的阳性率分别59%(10/17)和41%(7/17);差异无显著意义(P>0.05),两者的符合率达70%。
2.乙肝患者腹水中乙肝标志物的感染状况:17例HBV阳性者,有5例同时HBsAg和HBeAg阳性,2例只有HBsAg阳性。HBeAb阳性者腹水中未能检测出HBV。无一例患者血清及腹水HBsAb阳性。
3.结核性腹膜炎患者的腹水为阴性对照:各项指标均为阴性。
三、讨论
结果表明腹水中乙肝标志物的阳性率低于血清;凡是前者阳性的患者都有相应的血清指标阳性,这似乎提示因毛细血管通透性增加,病毒及其表达物随血液循环漏入腹腔有关;但并不是血清乙肝标志物阳性者都伴有腹水中相应指标阳性,说明其原因并非单一因素所致。
HBeAg阳性是病毒复制的标志,腹水中HBeAg阳性的患者HBV也阳性,提示腹水中有病毒复制。有人用PCR检测已发生HBeAb转换者的血清,发现HBeAb血清转换12个月后,HBV阳性率仍为83%,提示多数患者尚有持续的HBV低水平复制。我们发现5例血清HBeAb阳性者只有2例腹水中检测出HBeAb,而HBV阴性。这一结果的出现可能与病毒已整合到宿主细胞有关。研究提示腹水中存在着HBV的复制及表达,腹水具有传染性。