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1 材料与方法
1.1 材料 Microlab AT & FAME全自动酶标检测系统：AT为全自动样品处理系统， FAME为全自动酶标板处理系统，瑞士哈美顿公司生产；常规手工操作：使用芬兰DENLEY-MK-2酶标仪、洗板机及国产恒温孵箱；抗-HCV EIA试剂盒：美国Ortho公司和国产某试剂公司生产；抗-HCV参比品：购于中国药品生物制品检定所及卫生部临床检验中心；普通样品：采用供浆者常规检测标本。
1.2 方法 用FAME系统程序和常规手工试验程序进行样品的抗-HCV检测，并对检测的精密性、特异性等指标进行综合分析比较。
2 结果
2.1 精密性比较
2.1.1 孔间精密性比较 以抗-HCV阳性血清为质控物，用Ortho抗-HCV试剂检测，分别收集全自动程序和常规程序的板内连续10孔试验质控值，计算各自的均值(
2.1.2 板间精密性比较 以抗-HCV阳性血清为质控物，用Ortho抗-HCV检测，分别收集全自动程序和常规程序的连续20板试验质控值(每板作1孔质控)，求出每一质控值相对于CO值的比率，并计算20个比率值的均值、标准差、变异系数，绘制质控图(附图)。FAME系统板间精密性比手工操作提高2.2倍，同时检测质控物的OD均值也升高，反应出灵敏度高于手工操作。
—— FAME系统：
手工操作
附图 抗-HCV EIA板间精密性比较
2.2 特异性比较 用全自动程序和常规程序对中检所及临检中心的抗-HCV阴性参考品进行检测(使用国产试剂)，分别计算其阴性符合率，结果见附表。用国家抗-HCV阴性参考品检测，FAME系统的检测特异性比手工操作提高3.5%。
3 讨论
本实验表明，Microlab AT & FAME系统提供了更好的酶免试验特征，与常规酶免试验相比，抗-HCV检测试验的特异性、精密性等均有程度不同的提高，且FAME系统试验的稳定性、重复性明显高于常规检测。
FAME系统曲线覆盖范围变窄，拖尾现象大大减少，提高了试验的精密性、特异性，且曲线值较常规手工检测曲线前移，说明整体的反应水平升高。分析原因：FAME系统操作程序避免了常规程序的一些局限性，试验的全过程微机化控制，使每一块板的反应条件趋于一致，消除了常规程序所固有的缺陷和人为误差；自动加样系统的加样尖具有外壁擦
附表 抗-HCV EIA试剂FAME全自动酶标系统与手工操作的特异性比较
| 中检所第2代Panel | 中检所第3代Panel | 临检中心Panel | 总 符 合 | |||||||||
| 阴性
(76) |
阳性
(71) |
总符合率
(%) |
阴性
(40) |
阳性
(40) |
总符合率
(%) |
阴性
(25) |
阳性
(25) |
总符合率
(%) |
阴性符合率
(%) |
阳性符合率
(%) |
总符合率
(%) | |
| 手工操作 | 69 | 70 | 94.6
(139／147) |
38 | 39 | 96.3
(77/80) |
23 | 25 | 96.0
(48／50) |
92.2
(130/141) |
98.5
(134/136) |
95.3
(264/277) |
| FAME系统 | 71 | 70 | 95.9
(141/147) |
40 | 39 | 98.8
(79/80) |
24 | 25 | 98.0
(49/50) |
95.7
(135/141) |
98.5
(134/136) |
97.1
(269/277) |
拭系统，使加样更加准确；另外，FAME系统无论加样品、加试剂均为悬空加样，避免了手工操作的拖带、交叉等现象。
FAME全自动酶标分析系统不仅能提高工作效率，更重要的是使检验过程标准化、规范化，符合GMP要求，最终保证原料血浆检测结果的可靠性。使用FAME全自动酶标分析系统应注意的几个问题：①样品处理：冰冻血浆小样要去除纤维蛋白，可用离心或其它方法去除；②使用全自动FAME系统一次性投入费用较高，但在使用过程中只要正确操作、做好日常维护工作，是可以发挥其提高检测水平及工作效率的作用的。