言慧洁:中草药抗单纯疱疹病毒的实验研究进展

   单纯疱疹病毒(Herpeswruses，HSV)感染是人类的一种常见传染病。其感染部位广泛，常发于癌症或其他慢性病应用各种免疫抑制剂的病人中。现已证实，HSV感染与先天畸形、流产、宫颈癌、脑炎、新生儿疾病、性病等10多种疾病有关。目前国内外研究的抗病毒药物较多，但过渡到临床治疗全身性感染的药物有限，且已被发现有耐药株。因此，开发利用中草药资源，寻求更新更好的抗HSV药物已势在必行。现将近年来中草药抗疱疹病毒的研究作简单概述和总结。
    盂正木等证实鸡血藤提取物对单纯疱疹病毒I型有较强的作用，其50％细胞病变抑制浓度(CPIE50)，50％细胞致死浓度(cLE50)，50％酶活性浓度(IE50)分别为46．0，630，O．2μg／m1，选择度性指数(sT)为13．7。抗病毒的阳性对照物阿糖胞苷，其CLE50，IE50和sT分别为14．5，200μg／ml和13．8。
    王芃等用大黄醇提液在细胞培养上有明显抗病毒作用，HSV-1的有效抑制浓度为100μg／rnl，并对HSV-1的感染有预防作用，对病毒颗粒也有直接杀伤作用。此外，大黄醇提液的细胞毒性极低，20 000μg／ml时仍无细胞毒性，甚至有助于细胞生长。
    罗军等用大黄提取液进行体外抗单纯疱疹病毒研究，以免疫荧光法检测细胞内病毒抗原作为考核药物和抗病毒作用。结果表明，药液对HSV-1和HSV-2的有效浓度分别为50μg／m1和20μg／m1。相当于无环鸟苷的有效浓度(50PIxg／m1)，提示大黄可以作为一种新的治疗HSV感染的药物。此为深入进行大黄抗HSV的临床研究提供了依据，且大黄对细胞的毒性作用低，临床常以煎剂口服，故可作为全身抗HSV感染的治疗用药。
    王志涪等对虎杖中蒽醌合物进行了分级分离，并且用乙酸乙酯萃取部分晶体Ⅲ、晶体Ⅳ做抗HSV-1药效实验，通过病毒所致细胞病变的抑制以及空斑减数实验进行观察。结果表明，在HEP-2细胞系统中，晶体Ⅳ对HSV-1的增值及其感染均具有明显抑制作用，EDso分别为0．067 mg／I及0．030 72 mg／I。EDgo分别3．398 mg／I及1．811 mg／I。同样，对HSV-I具有显著的直接杀灭作用。EDso及EDgo分别为0．09443 mg／I及3．501 mg／I。认为晶体Ⅳ对HSV．1具有显著的抑制作用，而其细胞毒性则不强，值得开发利用。
    李静波等在培养的人羊膜细株(FL)中加入人参茎叶皂苷或西洋参茎叶皂苷(SSVLQ)证明二者均能明显抑制HSV-1病毒在细胞内复制，感染细胞受到保护。但2种皂苷所用剂量有异。
SSLG用125μg／ml，而SSLQ则用500Ixg／ml。即SSLQ增大剂量才能呈现同样的抑制作用。
    孙晓娟用黄芪中提取8种成分即A I，AⅢ，AIV，AⅥ。Ⅶ。AⅧ，AIX，AX在VERO-E6细胞中观察对l型和2型单纯胞疹病毒的作用。细胞病变(CEP)抑制实验表明，A I，AVI和
AVI对HSV-1有抑制作用，A I，AVI对HSV-2亦有抑制作用。AⅥ在体外不能直接灭活HSV一1，但能抑制已感染细胞的病毒复制。并且将无环乌苷(ACV)分别与黄芪有效部分AVI和AVR联合，用细胞病变(cPK)抑制法测定联合抗1型和2型单纯疱疹病毒作用。结果表明，AVI和ACV与Ⅶ联合对HSV-1呈相加作用，其联合抑制系数(FIC)指数=O．750。而ACV与AⅥ联合对HSV-2亦成相加作用(FIC指数=O．749)，而ACV与AVI联合对HSV-1则呈现相同作用(FIE指数=0．498)。
    李静波等从大豆中提取大豆总苷(TS)然后通过细胞培养实验证明大豆总苷对单纯疱疹病毒I型的复制有明显抑制作用；同时体现出对病毒感染细胞很强作用。关于作用机理，除了1s对HSV-1病毒直接杀伤作用外，与TS对细胞具有钙通道的阻滞作用亦有关系，有利于细胞代谢。
    亢晓丽等通过组织细胞培养实验及动物实验研究士的宁(马钱子有效成分)及复方士的片眼液进行了抗I型单纯疱疹病毒的研究。结果表明士的宁的细胞毒性低，细胞最大耐受浓度为1 000μg／ml利用细胞培养技术，经4种不同给药途径研究证实，士的宁及复方士的宁不仅对HSV-1有直接杀灭作用，而且对病毒吸附侵入细胞有防治作用。4种药物抗HSV-1的作用强度依次为复方士的宁>士的宁>无环鸟苷>吗啉胍。
    姜克元等用相当于生药量0．58μg／ml。的苍耳子提取液，以1：5稀释时，可完全抑制疱疹病毒的生长，1：10稀释时，可抑制100 TC IDso疱疹病毒I型的生长。在所用的药物浓度范围内，苍耳了提取液对正常细胞无毒害作用。
    张杰研究证实石榴皮水煎剂有明显抑制HSV-2感染作用，不仅能抑制HSV-2在细胞内增殖，更显示了较强的直接灭活和阻止HSV-2吸附细胞作用。研究提示，石榴皮中的鞣质能够
多环节产生抗HSV-2作用，特别是预防作用方面效果明显，在临床上有重要的应用价值。鞣质的抗病毒作用与其化学结构密不可分，而与其收敛性无明显相关效应。
    李闻文将HSV-2和肾综合征出血热病毒(HFRSV)分别吸附于Vero-E6细胞和BGM细胞，并加入不同浓度的板蓝根针剂和喜树果煎剂，培养后前者用间接免疫荧光检测病毒抗原，反
应阴性；后者置显微镜下观察细胞病变，发现细胞生长正常。撤药后继续培养并按原法检测，结果均为阴性．说明两种药物都有杀病毒而非抑制作用。
    朱雪梅从芒果树叶中提取一种四羟基吡酮碳糖苷(man-giferin)，采用空斑减数试验与产量减数试验表明，芒果苷抑制50％空斑形成的ECso为111．7μg/ml，ECgo和EC99。分别为33，80Ixg／ml，治疗指数(IC50／EC50)为8．1。药物加入和去除实验结果显示芒果苷抗HSV一2的作用的机理可能是抑制病毒在细胞内复制的晚期。
    金玉怀证实茜草的甲酸提取物在体外细胞上对HSV-2有明显的抑制作用。在Veto细胞上病毒抑制数可达3个对数。病毒增殖抑制实验表明，该制剂确实抑制了HSV-2感染性病毒颗粒的发生，在不同的细胞系上进行比较，发现该制剂的抗病毒作用具有明显的细胞系依赖性。
    王育良等根据I临床经验和现代药理研究，选出老鹳草、红药了、秦皮在组织培养下，观察三味中药对单纯疱疹病毒所致病变的影响，通过不同给药时机的实验，比较了各药的作用机理，证实了三味中药具有不同的抗单纯疱疹病毒的作用。
    陈祖基等选取部分临床常用的抗病毒和抗肿瘤中草药在组织培养系统中实验观察其对单纯疱疹病毒的作用，筛选出一些具有抗单纯疱疹病毒的中草药。其中以薄荷、蒲公英、喜果树碱的水煎剂对HSV具有明显作用。蒲荷和蒲公英的有效浓度为10 mg生药／mI，喜果树为l mg生药／m1。
    卢长安从芍药中提取物CY，经体外细胞培养证实具对病毒确有抑制作用，且初步探明其对疱疹病毒HSV-1的作用机理为抑制病毒复制的吸附和释放过程，并且研究CY对动物皮肤感染的作用．结果表明，CY对实验性豚鼠皮肤疱疹病毒感染所造成的皮损，亦具有良好的治疗作用，且中量组(50μg／ml)效果最强．
综上所述，目前以中医药理沦为依据进行选药，然后借助现代方法去验证和探索其机理，已经筛选出一批具有较好抗HSV作用的中药。但目前在实验方法上还存在以下不足之处：(1)实验评价方法不尽客观和齐全，只有客观、合理的评价手段和方法才能得出准确、客观结论；(2)实验水平广度和深度有待拓宽加深，要进一步从组织、器官、病理、分厂等各个水平进行横向、纵深研究；(3)中药抗病毒机理有待进一步阐明。总之多数中草药有效成分的分析仍未取得突破性进展，有效成分的确定、结构与功效的关系，有效成分间相互作用尚有待深入研究。