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病毒性肺炎是急性肺炎发病的主要原因…，呼吸道合胞病毒(RSV)是小儿呼吸道感染的重要病原，每年约40％-50％住院治疗的婴幼儿毛细支气管炎和25％的婴幼儿肺炎是RSV感染所致。文献报道，出生后第1年，约一半婴儿均感染过RSV，超过65％的儿童在1岁前感染过RSV，2岁时，感染率达100％。目前，呼吸道病毒(在临床医学、微生物学及药物治疗学中，都是研究的重点与难点，西医目前尚无疗效肯定的治疗药物。既往的临床观察和实验研究发现，中药单味药或复方药在体内及体外治疗病毒感染性疾病方面，均表现出独特的优势，对其作用机制的研究从对细胞病变的影响向对病毒致病的中间环节的干预，主要是通过抑制病毒增殖、阻止病毒粘附进入易感宿主细胞，以及促进有利于抗病毒的免疫应答，并抑制过强的异常炎症反应，调节机体的免疫功能，从而达到抗病毒作用。本文通过对近10年来中药抗呼吸道合胞病毒肺炎的机理研究的文献进行分析，从直接及间接抗病毒、对细胞因子的免疫调节角度探讨中药抗呼吸道合胞病毒肺炎的作用机制。
1 体外实验对呼吸道合胞病毒直接和间接的抑制作用
1．1对细胞病变的影响
杨桦利用对细胞毒活性NK细胞杀伤活性和检测腹腔液抗融合活性，对人参多糖的抗RSV作用机制进行研究，发现人参多糖具有增强NK细胞杀伤活性，并且对于RSV特有的细胞融合病变有抵抗、缓解作用。赵宇红等通过空斑试验和试管观察CPE法显示：鱼腥草最大稀释浓度(1：10)可以完全抑制稀释度为10(100TCID50)的RSV、半数抑制(1000TCID50)的RSV，使空斑明显变小，确定了鱼腥草对RSV的体外抑制作用，且效果与利巴韦林等同。刘萍、蒋明波将长成单层的Ver0细胞分别10、100和1000半数细胞感染量(TCID)的病毒感染，每个TCID设柴胡组及病毒对照组，另设正常药物对照组。病毒对照组换维持液，柴胡组和正常药物细胞对照组均换1Omg·ml(最大无毒浓度)的柴胡注射液，把所有培养管放入培养箱中旋转1周，每天记录细胞病变(CPE)，当病毒对照组有50％-75％CPE时判断结果，发现当病毒感染量等于l00TCID时，柴胡组有25％CPE，而病毒对照组有50％-75％CPE；当病毒感染量小于100TCID时，柴胡组无CPE出现，而病毒对照组有25％CPE，正常药物细胞对照组无CPE出现。张丽亚、董琳等应用微量细胞培养技术，观察RSV感染人喉癌(Hep一2)CPE效应，应用四甲基偶氮唑蓝(MTr)比色法检测观察不同浓度黄芩苷对RSV感染后细胞存活率的影响。发现黄芩苷具有体外抗RSV感染作用，有效浓度为0．078～1．25m9·ml，最佳作用浓度为0．156m9·ml～。MlTr比色法也显示以上浓度范围黄芩苷组的细胞存活率明显高于RSV感染组差异有统计学意义(P<0．05)。袁斌、汪受传等利用电镜观察清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染后人胚肺成纤维细胞超微结构改变的别响。发现RSV感染人胚肺成纤维细胞后，被病毒攻击组细胞核增大，核质比增加，核仁凝聚，核膜凹陷成夹层，包涵体形成，线粒体凝聚，粗面内质网扩张，溶酶体增多，核染色质浓缩，细胞外可见病毒颗粒。超微结构的改变，清肺口服液含药血清可以减轻这种改变，感染时给药比感染后给药作用更明显。
1．2对病毒入侵宿主细胞过程的影响
李珊珊等通过细胞病变(CPE)抑制实验对不同浓度的败酱草抗病毒有效部位(AP3)的体外抗RSV作用进行研究发现，AP3具有抑制RSV作用，抑制RSV的EC为0．0986m9·ml～，治疗指数(TI)为116．12，高于病毒唑的53．45。AP3对RSV抑制作用存在量效反应，AP3于感染后0、2、4h加药，可抑制呼吸道合胞病毒活性，证明其可以影响病毒的穿人，而且也可能影响病毒的复制。张振亚等测定野菊花提取物对呼吸道合胞病毒的抑制作用时，发现呼吸道合胞病毒感染Hep-2细胞后2、4、6、8h给予野菊花提取物均有抑制作用(P<0．01)，穿人和吸附抑制实验表明，其对病毒穿人过程和吸附过程同样均有明显的抑制作用(P<0．01)，不仅如此，野菊花提取物对RSV病毒有直接的杀伤作用。廖辉等在金欣口服液能够阻止病毒对细胞的感染的前期研究基础上，通过在病毒和细胞接触期间采用转换温度方法进一步研究金欣13服液含药血清对呼吸道合胞病毒黏附、侵入宿主细胞环节的影响。在温度转换前(黏附阶段)加入金欣13服液含药血清，实验组和对照组0D值无差异；温度转换后(侵入阶段)加入金欣口服液含药血清组OD值明显升高，与对照组比有显著性差异。荧光标记的F蛋白位于感染细胞表面，RSV感染后，细胞发生融合的部位荧光明显增强，金欣口服液含药血清作用后荧光减少。认为金欣口服液拮抗呼吸道合胞病毒的机制之一是抑制病毒的膜融合，作用位点是病毒的F蛋白或其受体。其可以作为RSV感染早期的治疗药物。
1．3对病毒的直接灭活及增殖抑制
董艳梅等采用细胞病变抑制实验观察甘草在Hela细胞中对甘草的体外抑制RSV作用进行研究，发现甘草抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为0．25359·L～，治疗指数为l3．53，并且存在量效关系，其作用机制是多方面的，不仅有直接灭活作用，而且有间接抑制增殖作用。钟琼等采用MTr比色检测穿心莲提取物对RSV的抑制和对RSV感染Hep一2细胞的保护作用，发现穿心莲提取物能够抑制RSV生物合成，并且随着药物浓度增加，细胞病变特征明显逐渐减弱，病毒滴度逐渐降低，而病毒抑制率则明显增高。王孟清等¨鲥将呼吸道合胞病毒接种于Hela细胞单层增殖，通过将不同浓度的药液加入病毒，观察在细胞单层上的空斑形成以判定病毒产量。发现截哮l3服液使呼吸道合胞病毒产量减少，药物浓度的高低与病毒产量的高低呈明显的负相关，其对RSV有直接灭活作用，且能影响病毒的吸附与吸附后的复制过程。认为截哮l21服液在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的复制有抑制作用。黄孝军、侯炜等以病毒唑为对照，发现夏桑菊能降低组织内病毒滴度，抑制RSV的增殖，其有效浓度为544．59tx9·ml，并显示出病毒的感染性滴度随药物浓度的增加而下降，阻止体内病毒复制，抗RSV作用类似于同剂量的病毒唑。杨洁等通过Hep一2细胞培养，采用观察细胞病变(CPE)和活细胞染色计数法(MTT)，发现黄芩提取物及其含药血清具有不同程度抑制RSV在Hep一2细胞内复制的作用，且毒性小、安全范围大。实验中同时显示了对细胞的促生长作用，推测该药具有免疫调节作用。汪受传等用不同剂量的清肺口服液制成含药血清处理呼吸道合胞病毒感染后的Hep一2细胞，用组织细胞培养法，采用CPE观察和MTI'比色检测清肺口服液含药血清对RSV感染细胞的增殖抑制作用。发现在Hep一2细胞上，清肺l3服液的最大无毒浓度为1：9。100TCID50 RSV攻击后Hep一2细胞的OD值明显降低，加入中高剂量含药血清后OD值升高。清肺口服液含药血清对RSV有抑制作用。
2体内实验对细胞因子影响
清肺口服液在临床上是治疗呼吸道合胞病毒的有效中药，李江全等在前期实验的基础上，为了进一步探讨其抗病毒的机理，研究其对机体免疫功能的影响，采用微量细胞病变抑制法，观察清肺口服液在昆明小鼠(ICR)腹腔内诱生干扰素作用。结果发现：清肺口服液在小鼠体内能诱生干扰素，与生理盐水组相比有显著差异；清肺口服液诱生的干扰素符合干扰素的性质。说明清肺口服液的抗病毒作用与其能诱生干扰素有关，同时表明清肺口服液对机体的免疫功能有一定的作用，值得进一步研究。莫红缨等以ELISA法测定炎症介质的含量，观察复方双黄连及其含药血清通过不同的给药方式对RSV刺激A549细胞引发的炎症介质IL-8、IL-6、TNF-0释放的作用。研究发现，双黄连复方及其含药血清均能显著降低RSV诱导A549释放的IL-8水平，其中以感染前给药的途径下调IL-8的作用最为明显，在病毒感染的气道炎症控制中起着一定的作用。
3思考与展望
中药抗呼吸道合胞病毒的实验研究，随着科学技术的发展，其研究的机制从对细胞病变的影响到重视对病毒致病的中间环节的干预，由细胞生物学向分子生物学转化。实验方法由观察细胞病变法、空斑试验、MTY检测法等，转向为细胞因子、基因、蛋白水平的RT—PCR、ELISA法检测等。机体的抗病毒机制主要是通过活化的细胞分泌细胞因子，从而诱导抗病毒反应。虽然，中医药在分子生物学水平的抗呼吸道合胞病毒的研究不断深入，但在细胞因子水平研究中医药抗呼吸道合胞病毒的实验研究较少。另外，细胞因子数量及其种类繁多，相互作用形成了一个级联的网络系统。针对几种细胞因子、蛋白和基因水平的研究难以解释中医药全面调节机体的阴阳平衡，恢复免疫系统平衡的特点，因此如何将中药抗病毒作用机制的现代研究与中医理论统一结合起来，尚需进一步深入。