刘健 张涛 何秀娟 许蜀闽 王培勇
重庆第三军医大学新桥医院心外科
第三军医大学病理生理学与高原生理学教研室
主动脉平滑肌细胞钙信号与CREB活性的关系探讨
以培养的主动脉平滑肌细胞为研究对象，探讨钙信号的不同变化引起细胞CREB活性的动态变化特点
一、目 的
二、方 法
主动脉平滑肌细胞的培养
转染钙敏感绿色荧光蛋白标记的转录因子GFP-CREB
激光共聚焦显微镜观察
实验分组
①正常对照组
②肥大刺激组（血管紧张素、异丙肾上腺素）
③ Ca2+信号阻断组
Ca2+螯合剂BAPTA/AM、CaM阻断剂TFP
④肥大刺激组+Ca2+信号阻断组
1. CaM三维图像变化
1正常 ISO AngII
BAPTA ISO+BAPTA
三、结 果
2. CaMKII三维图像变化
1正常 ISO AngII
BAPTA ISO+BAPTA TFP
像
3. CREB三维图像变化
1正常 ISO AngII
BAPTA ISO+BAPTA TFP
像
4. p-CREB三维图像变化
ISO AngII
BAPTA TFP
像
5.阻断CaM后，p-CREB的变化
10-4 M的TFP
2×10-5 M的BAPTA/AM螯合Ca2+
6.螯合Ca2+后，p-CREB的变化
10-6 M的血管紧张素II刺激Ca2+信号
7 .血管紧张素II刺激细胞后，p-CREB的变化
8. AngII +TFP刺激细胞后，p-CREB的变化
肥大刺激使细胞内钙感受成分（CaM、CaMKII、CREB、p-CREB）表达增加
单独螯合钙对细胞内钙感受成分（CaM、CaMKII、CREB、p-CREB）影响较小
阻断CaM使细胞内钙感受成分（CaMKII、CREB、p-CREB）活性降低
细胞内GFP-CREB主要分布在细胞核
四、结 论
谢谢