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【摘要】 目的 了解活血化瘀中药三七和丹参对视网膜新生血管形成的小鼠ICAM-1表达的影响。方法 采用缺氧所致小鼠视网膜新生血管形成模型，观察三七和丹参对ICAM-1表达的影响。结果 三七和丹参均可明显减少视网膜新生血管化小鼠的ICAM-1的表达。结论 三七和丹参对视网膜新生血管形成有防治作用，减少ICAM-1表达可能是其防治视网膜新生血管形成的作用机制之一。
【关键词】 三七;丹参;视网膜新生血管；中药疗法;疾病模型；动物；小鼠
视网膜新生血管是很多后极部眼底病的显著特征，视网膜新生血管的形成及随之发生的出血、渗出、瘢痕化或增殖性改变，是多种眼底疾病最终致盲的主要原因。很多细胞因子参与了视网膜新生血管的形成过程如血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、黏附分子等。本研究观察活血化瘀药物三七和丹参对视网膜新生血管形成的小鼠黏附分子（ICAM-1）表达的影响。
1 材料与方法
1.1 实验药物 丹参采用丹参注射液（广东永康药业有限公司）；三七采用血栓通注射液（三七总皂苷175mg/5ml，哈尔滨圣泰制药股份有限公司）。
1.2 动物 C57BL/6J幼鼠40只（鼠龄为7天），雌雄各半，CL级,由第一军医大学动物中心提供(动物实验设施合格证号:2002009)。
1.3 主要试剂 小鼠ICAM-1 ELISA试剂盒为美国ENDOGEN公司产品。
1.4 实验方法 动物随机分为正常对照组、模型对照组、三七组、丹参组，每组10只。参考Smith等的方法［1,2］建立氧诱导的血管增生性视网膜病变幼鼠模型，各组动物（正常对照组除外）均置于密闭容器内,容器内氧分压控制为75%；正常对照组在正常空气环境下饲养。5天后将模型对照组、三七组、丹参组动物取出置于正常空气环境下饲养，并开始按10ml/kg体重腹腔注射给药，三七组每天腹腔注射血栓通注射液1次，丹参组每天腹腔注射丹参注射液1次，正常对照组及模型对照组每天腹腔注射生理盐水1次。5天后所有动物自眼球取血，分离血清，-80℃超低温冰箱中保存待测。采用ELISA法测定血清ICAM-1含量，操作方法按说明书进行。
1.5 统计学分析 采用SPSS10.0统计软件。
2 结果
三七和丹参均可明显减少视网膜新生血管化小鼠的ICAM-1表达（P<0.05），见表1。
表1 三七、丹参对血管增生性视网膜病变小鼠血清ICAM-1含量的影响 （略）
3 讨论
视网膜新生血管是多种眼底疾病最终致盲的主要原因。因此，对视网膜新生血管的基础、临床研究一直是眼科学家所关注的热点。新生血管形成的基本过程包括血管内皮细胞(ＥＣ)激活、细胞外基质(ＥＣＭ)降解、ＥＣ移行和增殖、管腔结构形成以及血管外膜形成［3］。大量研究表明，缺氧是导致视网膜新生血管形成的主要刺激因素，将C57BL/6J幼鼠置于75%浓度的氧环境中连续生活5天，即可见大量的视网膜新生血管形成［1，2，4，5］。很多细胞因子参与了视网膜新生血管的形成过程如血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、黏附分子等。在新生血管形成过程中,血管内皮细胞必须穿过细胞外基质而迁移,此过程由细胞表面黏附分子家族来控制。Shen等［6］研究发现,在CNV大鼠模型的视网膜中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、Ｅ-选择素和CD44的表达明显增高。ICAM-1通过与它的受体即淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)结合参与白细胞和内皮细胞的黏附以及白细胞的移动［7,8］。
对于视网膜新生血管的治疗，目前认为激光光凝是较为有效的方法，但光凝疗法本身又可引起视网膜血管新生［9，10］。再者，激光治疗对眼底正常组织能产生破坏作用，常导致中心视力下降，且新生血管的残留率和复发率都较高，亦只能适用于当新生血管位于黄斑中心凹无血管区200μm范围以外的患者，200μm范围以内者不能使用光凝［11］。因此，寻找对视网膜新生血管有效的药物亦是眼科学界关注的问题。
中医药对视网膜新生血管性疾病的研究目前多为临床的辨证论治，对于视网膜新生血管性出血，现大多应用活血化瘀类药物进行治疗，如血栓通胶囊、三七胶囊（二者均以三七为主要成分）、复方丹参滴丸等，虽取得一定的疗效，但活血化瘀类药物治疗视网膜新生血管性出血的药理基础却鲜有针对性的研究。况且，对活血化瘀药物的选用，亦有不同的看法，有认为应用活血通络之品，如丹参、川芎等以治疗瘀滞之病机；亦有认为不可滥用竣猛活血之品，需注意止血不留瘀，活血不妄行，宜选用那些既可止血又可活血的药物如三七、茵草等。
本研究初步探讨活血化瘀药物三七、丹参能否通过改善局部缺氧环境或影响各种新生血管生长因子而阻止视网膜新生血管形成。结果表明三七和丹参均能减少血管增生性视网膜病变小鼠的ICAM-1含量。今后拟进一步从形态学、分子生物学等多方面探讨中医药对视网膜新生血管形成的干预作用。
【参考文献】
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11 Macular pholocoagulation study group. The influence of treatment extent on the visual acuity of eyes treated with neovascularization. Arch Ophthalmol,1995,113（2）:190-194.
作者单位： 510405 广东广州,广州中医药大学
(编辑：晓 青)