中药对急性脑卒中的神经保护作用研究进展

　　【关键词】  中药；神经元保护；脑卒中

　　急性脑卒中是威胁人类健康的主要疾病，死亡率、致残率极高，目前主要治疗手段是溶栓和神经保护，其中神经保护剂的研究已取得较大进展，尤其是与溶栓药联合应用，可在改善脑缺血的同时，保护脑组织尽可能少受各种代谢毒物的损害，从而改善预后［1］。近年来大量的中药实验和临床研究从多方面阐明了中药神经保护的药理作用机制，现就其研究综述如下。

　　1  脑缺血后的迟发性神经元坏死和再灌注损伤

　　脑梗死的发生取决于脑血流量（CBF）下降的程度及缺血持续时间。动物实验证实，全脑缺血和局灶性脑缺血的CBF的变化不同。全脑缺血时，神经元坏死主要发生在选择性易损脑区，如海马cal区、小脑蒲肯野细胞和大脑皮层Ⅲ~Ⅳ层等，表现为缺血后2~7 d才出现的迟发性神经元坏死（DND）。局灶性脑缺血时，在梗死的中心坏死区（Core）外，存在缺血半暗带（ Ischemic penumbra,IP），此处CBF处于电衰竭［15~18 ml/（100g·min）］与能量衰竭［10~12 ml/（100g·min）］之间，神经元的损伤为程序性死亡（PCD）或称凋亡（apotptosis）。在一定时间内，即再灌注时间窗（reperfusion window）内（25~3 h），尽快恢复脑血流，缺血半暗带内部分可逆性受损组织可恢复其功能，但这种恢复的血流也可导致损伤组织的进一步损伤，这种使损伤细胞继续死亡的作用，称再灌注损伤［2］。

　　2  脑缺血后神经元损伤和坏死的影响因素

　　21  兴奋性氨基酸（EAA）的毒性作用  脑缺血缺氧时大量兴奋性氧基酸（EAA），尤其是谷氨酸（Glu）的暴发性释放，N甲基D天门冬氨酸（NMDA）受体过度激活，突触后神经元过度兴奋、溃变、坏死，形成所谓的“兴奋毒性”。

　　22  细胞内Ca2+超载  缺血时，电压依赖性Ca2+通道开放，引起损伤性Ca2+内流，指细胞外大量Ca2+内流入细胞内，此时的Na+流出细胞外，同时激活PKC、PLC和PLD途径，导致花生四烯酸堆积［3］。

　　23  自由基生成增加  氧自由基生成过多造成组织损伤。能量耗竭后，缺血脑组织局部代谢的酸性产物增加，产生大量氧自由基（OFR）。自由基是指最外层电子轨道上含有一个或多个未配对电子的物质。可分为两类：①由氧诱发的自由基称为氧自由基，包括OH-、O2-和NO；②氧自由基与多聚不饱和脂肪酸作用后生成的中间代谢产物是脂自由基，系含烷的产物二烷自由基L.、烷氧自由基LO.、烷过氧自由基LOO.等。氧自由基（OFR）主要指O2-和OH-等，尽管OH-的半衰期短为1×10-9s，扩散范围也小，但具有过于活跃的危害性大的特点；O2-则相对稳定，可通过细胞膜转运，半衰期为1×10-6s，扩散范围大。研究显示，自由基损伤以缺血后再灌注时为最重，可能由于溪流和滴流的供血携带了微量氧进入组织，为维持脂质过氧化程序提供条件，加重自由基损伤。

　　24  细胞因子的表达和白细胞参与的炎症反应［6］  已经证实，缺血损伤后产生组织炎性反应，表现在炎性因子上调，促黏附分子和黏附分子的表达增加。已知的致炎因子包括IL1、IL6、TNFα、C5a、PAF等；黏附分子包括ICAM1、E选择素、VCAM1等［7，8］。小胶质细胞反应在大鼠全脑缺血标本也比较强烈，应激的小胶质细胞分泌IL1β。动物实验显示，MCAO大鼠局灶缺血区20 min内可见反应性小胶质细胞，缺血再灌注损伤22 h缺血中心区内充满小胶质细胞。还有研究提示，再灌注损伤可触发E选择素mRNA的表达［9］。这些实验提出抗炎治疗是神经保护措施的理论依据。

　　25  细胞凋亡不仅在发育过程中，而且在疾病发生中越来越受到人们的重视，它可能参与肿瘤、老年性痴呆等神经退变性疾病、艾滋病等疾病发生［10］。以前的研究认为，脑缺血过程中的细胞死亡是一种被动的坏死，然而最近的研究提示，缺血缺氧可能诱发神经细胞凋亡［11］，实验发现在缺血性损害的急性期及迟发性神经无损害期，凋亡细胞均存在，而在迟发性神经元死亡期以细胞凋亡为主。缺血性损害的急性期，凋亡细胞与坏死细胞并存，提示神经细胞凋亡与坏死均参与脑缺血急性期细胞损害，但各自程度与缺血损害的轻重有关。轻度缺血时坏死表现轻微，细胞凋亡成为细胞损害的主要形式。在迟发性神经元损害期，无论是轻度缺血还是重度缺血，细胞凋亡均是细胞丢失的主要形式。

　　26  神经营养因子（NTFs）是一类由神经元靶细胞分泌的蛋白质或多肽分子，与相应受体特异地结合后，被轴突末端摄取，经轴浆逆行运输至神经元胞体，维持神经元存活，促进神经生长。神经生长因子（NGF）的缺失往往导致神经元胞体和轴突的变性并进而死亡，而神经元的死亡往往迟发于NGF的缺失。这一现象说明，NGF的缺失是神经元变性直到死亡这一连续性事情的“触发点”或“扳机”。纤维生长因子（FGF）具有促进中枢神经系统内神经元、胶质细胞和内皮细胞的存活及生长，并能阻止神经元的逆行性变性，在体外能促进神经元的修复与再生，并能阻止神经元的逆行性变性。

　　3  缺血性卒中的神经保护治疗

　　缺血性卒中的治疗主要针对两个问题：一是溶栓治疗解决缺血半暗带的血流灌注，二是保护缺血脑组织，减轻或消除因再灌注而致的损害。但溶栓治疗只适用于少数病人，神经保护剂却有广阔的应用前景，它能干预缺血半暗带的病理生理变化，阻断缺血的级联反应，减轻再灌注损伤，延长治疗时间窗，增强神经细胞对缺血的耐受，防止细胞死亡。

　　神经保护剂种类很多，治疗靶向是多方面的，既可以单独应用，也可以与溶栓联合应用，临床试验涉及到的神经保护剂有许多种，本文主要讨论中药的神经元保护作用。

　　31  抗兴奋性氨基酸毒性作用  拮抗EAA兴奋性毒性，包括抑制其过度释放，促进其再摄取，以及抑制其受体活性，对脑缺血损伤具有防治作用。

　　研究表明，预先给予黄芪注射液可使沙土鼠脑缺血后脑组织Glu含量降低，提示黄芪抗缺血性脑损伤的作用与其防止缺血后兴奋性氨基酸的升高有关［12］。沙土鼠脑缺血15 min和再灌注48 h后，脑组织Glu和天冬氨酸（Asp）含量明显增加，加入补阳还五汤原方后可对抗缺血性脑损伤，既可防止缺血时EAA的升高，又可防止再灌注时EAA的升高，主要通过抑制Glu的升高而起作用［13］。银杏叶提取物能明显减少缺血再灌注时EAA的释放［14］。灯盏花素能增强脑缺血再灌注沙土鼠海马内谷氨酸转运体功能，减少兴奋性氨基酸的释放，改善模型沙土鼠的学习记忆能力 ［15］。

　　32  抗钙超载的作用  大量实验表明沙土鼠脑缺血再灌注后补阳还五汤有效成分组成的复方可减轻脑缺血后迟发性神经元损伤，减轻海马区神经元水肿，通过改善脑组织水钠代谢，调节脑内花生四烯酸代谢，防止钙积聚，保护钠钾ATP酶而起到抗脑损伤作用［16］。刺五加具有钙通道阻滞作用，通过阻滞钙通道，减少血管内皮素释放，减轻脑水肿和血管痉挛［17］。羚蝎胶囊可以降低胶原酶与肝素复合法大鼠脑出血模型脑细胞内Ca2+的浓度，并可促进急性脑出血患者脑内血肿的吸收，明显减轻患者神经功能缺损程度［18］。三七总皂苷能非选择性阻断受体依赖的钙通道开放，抑制胞外钙内流和胞内钙释放来防止细胞内钙离子超载，抑制各种来源激动钙离子所致的平滑肌收缩［19］。

　　33  抗自由基损伤的作用  刺五加能明显抑制脑缺血再灌注后脑内MDA的升高，提高SOD等抗氧化酶活性，增加各种损伤所造成脑神经元的存活率，抑制线粒体MDA的升高［20］。丹参可降低新生大鼠缺氧缺血性脑病脑组织内MDA水平，增加GSHPX活性，具有保护缺氧脑细胞的作用 ［21］，红花注射液可明显升高脑缺血再灌注损伤兔的SOD，降低血浆MDA的浓度。以芳香开窍法用醒脑静注射液对脑梗死患者进行研究，证明其可以降低大脑海马区组织中MDA含量，提高SOD活性，有效地清除自由基。清脑益智方药对缺氧操作的神经细胞培养液中异常增高的LDH释出量有显著的降低作用，提高了SOD活力和NSE活性，降低LPO含量，有保护神经细胞的超微结构等作用。

　　34  抗炎症反应的作用  中药脑脉通具有解毒降浊、益气活血作用，可以降低ＴＮＦ、ＩＬ21、ＩＬ28水平以减轻缺血病理过程中由ＴＮＦ、IL21、IL28介导的脑组织损伤。实验结果表明，脑脉通能改善脑水肿，并对老龄大鼠脑缺血再灌注脑组织神经细胞病理损伤具有明显保护作用［22］。

　　35  对神经细胞凋亡与基因表达的影响  灯盏花可以防止脑缺血再灌注诱导的PKC激活，从而防止脑缺血再灌注诱导神经元凋亡［23］。腹腔注射黄芪注射液后可抑制P53表达、增强Bcl 2表达，表明黄芪可抑制缺血区促凋亡基因的表达［24］。当归通过促进Bcl2基因在脑缺血后的表达对半暗带的细胞凋亡产生抑制作用［25］。

　　川芎嗪可以明显上调大鼠脑缺血再灌注时皮层和基底节区Bcl2的表达，下调cfos的表达，具有神经保护作用［26］。醒脑静注射液可显著抑制脑缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡，从而起神经保护作用。其机制与清除自由基，下调内源性TNF及白介素1的表达，使缺血再灌注性炎症反应减轻的作用有关［27］。补阳还五汤及其有效部位方可减少再灌注后5 d海马CA1区神经细胞凋亡发生的例数［28］。清开灵注射液对缺血再灌注后海马神经元的凋亡过程具有抑制作用，而对神经细胞具有保护作用， 这种作用可能与其能抑制细胞内钙超载有关。通脉益智胶囊可使脑缺血再灌注损伤诱导的小鼠海马神经细胞凋亡指数显著降低，从而起到一定程度的神经保护作用。

　　36  神经营养因子与神经保护作用

　　361  神经生长因子（NGF）：NGF不仅可以保护神经元急性损伤，对慢性的变性损伤也同样有效，可以认为它具有很好的神经保护因子特性。梅建勋等参考“血清药理学”的思路，利用含药脑脊液来开展研究，可以克服血清药理学的某些局限性，由此创立了“脑脊液药理学”的实验方法。在灌服中药清脑益智方后，其脑脊液可以明显促进星形胶质细胞NGF mRNA和蛋白质的表达。而中药对于星形胶质细胞并无刺激增生作用，说明了清脑益智方对于脑缺血后的神经保护作用。962胶囊能够明显促进老年大鼠海马区NGF及受体TrkA表达，可能是改善其学习记忆功能的药理学基础［29］。抗脑衰可使痴呆大鼠额叶、海马、小脑梨状细胞层和髓质的NGF表达增强。参乌胶囊能够明显促进老年大鼠海马区NGF及受体TrkA表达，增加神经元数量、减少胶质细胞增生，对于保护和修复神经元，防治AD等神经退行性疾病具有重要意义［30］。

　　362  纤维生长因子（FGF）：最近的动物实验证实短暂脑缺血后海马和皮质反应性星形胶质细胞的碱性纤维生长因子（bFGF）免疫活性及其mRNA水平升高，提示bFGF有助于受损组织的修复。有人用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型，脑溢安治疗脑出血能增强bFGF的表达，抑制TNF蛋白表达，从而使行为学得到改善，这可能是脑溢安促进神经功能修复的主要机制之一［31］。

　　4  问题与展望

　　神经细胞损伤是一个多因素、多环节、多途径的损伤，干预其中某一环节或途径，单一的治疗经临床证实疗效甚微。中医学具有整体观念的特点，中药又具有复方特征，从研究看其可以作用于多靶点，从而干预神经细胞损伤病理过程的多条路径，具有一定的可行性。但同时在中药脑神经细胞保护研究方面也存在许多问题亟待解决。虽然结合西医手段、甚至利用基因工程技术研究中药，但仍以中药提取物单体为多，而且多为动物实验研究，动物模型与人体的差异是肯定的，这使在实际临床中药物作用效果并不理想。目前中药脑神经细胞保护剂种类多集中在益气活血、开窍醒神、补益肝肾、化痰通络方面，能否以疗效确切的中药组成复方，利用中医辨证论治与基因工程技术及有效生化指标结合，尽快解决动物实验与临床都能取得可信的令人满意的疗效问题，值得进一步探讨。

　　参考文献

　　1Muir Kw,Lees KR.Clinical experience with excitatory amino acid antagonist drugs［J］Stroke,1995,26:503

　　2Heiss WD,Herholz K.Assessment of pathophysioloy of stroke by positron tomography［J］.Eur Nuc1 Med,1994,21:455

　　3Clark RB,Knoll BJ,Barker R.Partial agonsists and Gprotein coupled receptor desensitization［J］.Trends Pharmacol Sci,1999,20:297

　　4Muir KW,Holzapfel L,Lees KR.Phase Ⅱclinial of sipatrigine (619C89) by continuous infusion in acute stroke［J］.Cerebrovasc Dis,2000,10(6):431

　　5Albers GW,Atkinson R,Kelly R,et al.Safety,tolerability,and pharmacokinetics of Nmethy1Daspartate antagonist detrorphan in patients with an acute stroke［J］.Neurology,1994,44(suppl12):A270

　　6Grotta J,Hantson,Wessel T,et al.The efficacy and safety of lubeluzole in patients with acute ischemic stroke［J］.Stroke,1997,28:271

　　7高曲文.亚低温对脑缺血神经元的保护作用［J］国外医学脑血管疾病分册，1998，6：145

　　8Dyker AG,Lees KR.Duration of neuroprotective treatmemt for ischemic stroke［J］.Stroke,1998,29:353

　　9Zivin JA.Factors determining therapeutic window for stroke［J］.Neurology,1998,50:599

　　10Thompson CB.Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease［J］.Science,1995,267(5203):1456

　　11Jacobson MD,Raff MC.Programmed cell death and Bc12 protection in very low oxygen［J］.Nature,1995,374(6526):814

　　12柯庆，邓常青黄芪对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的影响［J］.中国中西医结合急救杂志，2001，8（2）:105

　　13赖真，王沙燕，耿小茵，等.补阳还五汤和黄芪对沙土鼠脑缺血再灌注后脑组织兴奋性氨基酸的影响［J］北京中医药大学学报，2002，25（3）:33

　　14于仁娈，金英，郭伟英.银杏叶提取物对大鼠海马缺血再灌注时兴奋性氨基酸释放的影响［J］解放军药学学报，2003，19（1）:24

　　15张焰，陈群，顾卫东，等灯盏花素对脑缺血再灌注沙土鼠兴奋性氨基酸释放和学习记忆能力的影响［J］中华实用中西医杂志，2004，4（17）:1930

　　16邓长青补阳还五汤各有效成分部位及其组方对小鼠脑缺血的影响［J］湖南中医学院学报，1999，19（4）:1

　　17寿延红，陈颖，冯加继，等刺五加对蛛网膜下腔出血患者血浆内皮素含量的影响［J］中风与神经疾病杂志，2001，18（3）:139

　　18吕嵘，徐敏华，卫洪昌羚蝎胶囊对脑出血后迟发性脑损害干预作用的临床与实验研究［J］中国中西医结合急救杂志，2001，8（4）:206

　　19刘建辉，冀凤云，王婷三七总皂苷对缺血再灌注鼠脑组织Ca2+和兴奋性氨基酸的影响［J］中国临床药理学与治疗学，2002，7（1）:33

　　20吴铮，邢东明，孙虹，等.刺五加对缺血再灌脑自由基产生及神经元的保护作用［J］.中药药理与临床，2001，17（6）:29

　　21徐立新，何绘敏，曲云霞，等.新生大鼠缺氧缺血性脑病脑组织内脂质过氧化改变及丹参保护作用探讨［J］.新生儿科杂志，2000，15:63

　　22李建生，邓西方，任小巧.脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注细胞因子的影响［J］.中国医药学报，2004，19（8）:471

　　23陈康宁，董为伟.灯盏花对脑缺血神经元调亡的防治作用［J］.中国临床神经科学，2000，8（1） :8

　　24李平，张梅.黄芪对脑缺血后细胞凋亡相关基因表达的影响［J］.安徽中医学院学报，2001,20（4）:48

　　25章军建，黄建英，张晓琴.当归对大鼠脑缺血半暗带细胞凋亡的抑制作用［J］.卒中与神经疾病，2001，8（1）:8

　　26李建生，李建国，赵群敏，等.补肾活血、泻下及开窍活血方药对老龄大鼠脑血再灌注多器官损伤的保护作用［J］.河南中医，2000，20（3）:13

　　27傅强，崔华雷，孙中吉，等.醒脑静注射对脑缺血再灌注诱导的神经细胞凋亡防治作用的实验研究［J］中国中西医结合急救杂志，2000，7（3）:144

　　28邓常青，唐映红，邓奕辉，等补阳还五汤及其有效部位组方对沙鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸和超微结构的影响［J］湖南中医学院学报，2000，20（4）:12

　　29张兰，李林，李斌，等中药复方962胶囊对老年大鼠海马神经生长因子及其受体表达的影响［J］.中国自然医学杂志，2000，2（4）:195

　　30张兰，李林，李斌，等 中药参乌胶囊对老年大鼠学习记忆及海马组织学的影响［J］中国康复理论与实践，2002，8（9）:516

　　31张化彪，黎杏群，张铭湘.脑溢安对出血大鼠脑内碱性成纤维生成因子mRNA和肿瘤坏死因子蛋白表达的影响［J］中国中西医结合杂志，2002，22（7）:518
 
　　滨州医学院实践教学部  滨州市  256603；北京市宣武医院药物研究室