地塞米松对小鼠免疫系统的抑制作用

【摘要】  目的 研究地塞米松对小鼠免疫系统的抑制作用。方法 取7～8周龄昆明种小鼠，腹腔注射地塞米松，分别于注射后5、10、15、24和36 h时间点取胸腺、脾脏和肠系膜淋巴结；对照组小鼠腹腔注射生理盐水（即0 h组），HE染色。结果 地塞米松组胸腺中凋亡细胞和凋亡小体数量多于对照组；脾脏和淋巴结内亦见凋亡细胞，但较胸腺内少；15 h时间点凋亡细胞最多。结论 地塞米松可引起胸腺、脾脏和淋巴结细胞的凋亡，对免疫系统有明显的抑制作用。

【关键词】  地塞米松 胸腺 脾脏 淋巴结 凋亡

    Inhibitive effect of dexamethasone on immune system of mouse

    YIN Zongqi1  CUI Chunhong2  YU Hongbo1  et al

    1 College of Basic Sciences,Binzhou Medical University,Yantai 264003;2 Department of Histology and Embryology,

    Binzhou Medical University

    【Abstract】  Objective  To observe the effect and characterisitic of dexamethasone on immune system.Methods  The mice of 78 weeks old were injected with dexamethasone.After the injection they were subjected to execute at five time points(5,10,15,24,36 h) and their thymus,spleen and mesenteric lymph nodes were obtained for morphologic observation.Results  Compared with control mice,obviously more apoptotic cells and apoptotic bodies were found in the thymus,spleen and lymph nodes of the mice injected with dexamethasone,but less in the spleen and lymph nodes than in thymus.Apoptotic cells were most at the 15 h point.Conclusion  The results suggested that dexamethasone could bring the lymphocyte apoptosis of thymus,spleen and lymph nodes,then restrain the immunologic function.

    【Key words】  dexamethasone,thymus,spleen,lymph nodes,apoptosis

    免疫系统是人体抵御病原菌侵犯最重要的保卫系统，这个系统由淋巴器官、淋巴组织、参与免疫的细胞及分子组成。免疫系统各组分功能的正常是维持机体免疫功能相对稳定的保证，任何功能缺陷或亢进都会给机体带来损害。免疫分子是由免疫细胞在抗原刺激下所产生的蛋白类分子，而参与免疫的细胞主要是由骨髓和淋巴器官产生、分化而来的，并构成淋巴器官的主要细胞成分。糖皮质激素有抗炎、抗过敏、抗中毒、抗休克及退热等多种药理作用，因而在临床上得到广泛应用。但大剂量的糖皮质激素长期应用除了其药理作用外，还能引起物质代谢和水盐代谢紊乱，抑制机体的免疫功能，诱发或加重感染等。本实验观察小鼠注射地塞米松后胸腺、脾脏及淋巴结的形态学结构变化，以研究糖皮质激素对机体免疫系统作用及其形态学特点。

    1  材料与方法

    1.1  实验分组  选7～8周龄，体重20～25 g的健康清洁级昆明种小鼠24只，雌雄各半，随机分为对照组和实验组，实验组又分为5组，共6组，每组4只。对照组腹腔注射生理盐水（生理盐水组）；实验组腹腔注射地塞米松（地塞米松组），剂量为50 mg/kg，分别于5、10、15、24和36 h时间点取胸腺、脾脏和肠系膜淋巴结。

    1.2  实验方法  对小鼠胸腺、脾脏和肠系膜淋巴结进行石蜡切片，HE染色。

    2  结果

    2.1  胸腺变化结构  对照组：胸腺被膜较薄，皮质较厚，皮∶髓比为2∶1,皮髓质分界清楚，皮质内淋巴细胞密集，偶见凋亡细胞或凋亡小体。髓质内可见较多的上皮细胞及由上皮细胞组成的胸腺小体，偶见凋亡细胞或凋亡小体。实验组：胸腺体积变小，皮质变薄，髓质相对扩大。皮质、髓质内可见大量的凋亡细胞和凋亡小体，并可见胸腺上皮细胞局限性增生。注药后5 h组，胸腺结构尚完整，皮∶髓比为2∶1，皮髓质分界尚清楚，皮质内见较多的凋亡细胞，呈散在或灶状分布；髓质内可见少量的凋亡细胞。注药后10 h组，胸腺正常结构被破坏，皮髓质分界模糊，皮质内见大量的凋亡细胞和凋亡小体，正常的胸腺组织。注药后15 h组，胸腺正常结构被破坏，视野内凋亡细胞和凋亡小体多见，正常的胸腺细胞很少。注药后24 h、36 h组，胸腺正常结构被破坏，皮质内较多凋亡细胞和凋亡小体，但较10 h、15 h组少，细胞间质增多；髓质内凋亡细胞较10 h、15 h组少，并见大量的上皮细胞，髓质中央出现较多的胸腺细胞聚集。见图1、2。

    2.2  脾脏变化结构  对照组：脾脏被膜完整，白髓、红髓及边缘区界限清楚，于白髓及边缘区偶见散在的凋亡细胞。实验组：脾脏白髓内出现较多凋亡细胞。注药后5 h组，脾组织结构尚完整，白髓及边缘区内出现较多的凋亡细胞，呈散在或灶状分布；边缘区内巨噬细胞体积明显增大。注药后15 h组，白髓内凋亡的淋巴细胞和凋亡小体均明显减少，呈小灶状或点状发布，间质细胞相对增多。注药后24 h、36 h组，脾组织中凋亡的淋巴细胞几乎不见，脾组织结构基本恢复正常，但仍可见活跃的巨噬细胞。见图3、4。

     2.3  淋巴结变化结构  对照组：淋巴结被膜完整，皮、髓质分界清楚，淋巴细胞排列密集而整齐，凋亡细胞少见。实验组：注药后5 h组，浅层皮质和副皮质区内可见到多处灶状细胞凋亡，髓质内偶见凋亡细胞或凋亡小体。注药后10 h，淋巴结皮质内见较多的凋亡细胞和凋亡小体，主要在浅层皮质和副皮质区内。注药后15 h组，淋巴结基本恢复正常，皮质内少见凋亡细胞或凋亡小组。24 h、36 h组淋巴结完全恢复正常，皮、髓质分界清楚，淋巴细胞排列密集而整齐，皮、髓质内偶见凋亡细胞或凋亡小体。见图5、6。

     3  讨论

    糖皮质激素因具有免疫抑制和抗炎作用而被广泛用于自身免疫疾病、变态反应性疾病、炎症、移植排斥反应及淋巴瘤的治疗，这些疾病的治疗都与机体的免疫功能相关，而糖皮质激素是免疫活动的重要调节物［1，2］。

    既往有研究表明，体内、外糖皮质激素能诱导胸腺细胞的凋亡［3～6］，这跟本实验结果相符，实验发现注射地塞米松后，小鼠胸腺内出现淋巴细胞凋亡，细胞凋亡先出现在胸腺皮质去内后至皮髓质交界处，最后蔓延到髓质。随时间推移，凋亡的淋巴细胞逐渐增多，正常淋巴细胞逐渐减少，胸腺正常的组织结构被破坏，于15 h左右达高峰，之后凋亡细胞减少，正常细胞渐增多，胸腺组织结构恢复正常。有研究证明，糖皮质激素可体外诱导脾淋巴细胞凋亡［7］。本实验证明地塞米松可体内诱导脾淋巴细胞凋亡，凋亡细胞主要分布在白髓区，亦随时间适移出现先增多后减少的变化，红髓区巨噬细胞活跃，细胞体积明显增大，细胞数目增多，并可见吞噬大量凋亡细胞的巨噬细胞。但也有研究表明糖皮质激素对脾脏淋巴细胞没多大影响［8］。刘铁军等［9］研究表明甲强龙可使肠系膜淋巴结淋巴细胞凋亡，这与本实验也相符。实验证明凋亡细胞主要分布在皮质内，随时间变化出现先增多后减少的特点，最后淋巴结组织恢复正常。

    对胸腺、脾脏和淋巴结三种淋巴器官进行比较，发现凋亡在胸腺最明显，凋亡现象出现早，凋亡细胞数目多，并可完全破坏其正常结构，组织恢复较晚。这些结果表明，糖皮质激素对免疫系统有明显的抑制作用，这种抑制主要影响非成熟淋巴细胞，在停药一段时间后，淋巴器官的结构和功能可恢复正常。

【参考文献】
  ［１］ Mcewan BS,Biron CA,Brunson KW,et al.The role of adrenoconticoids as modulators of immune function in health and disease:neural,endocrine and immune interactions［J］.Brain Res Rev,1997,23(1/2):79133.

［2］ Bakker JM,Schmidt ED,Kroes H,et al.Effects of neonatal dexamethasone treatment on hypothalamopituitary adrenal axis and immune system of the rat［J］.J Neuroimmunol，1997,74(12):6976.

［3］ 潘景轩，朱振宇，李惠珍，等.糖皮质激素诱导大鼠胸腺细胞程序性死亡的研究［J］.中国免疫学杂志，1996，12（4）：228.

［4］ 周安宇，湛贴璞，邹万忠，等.地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡［J］.上海免疫学杂志，1995，15（1）：65.

［5］ 王晓菲，蒋莉，赵欣欣，等.甲基强的松龙诱导大鼠胸腺淋巴细胞凋亡的研究［J］.中国风湿病学杂志，2000，4（1）：2526.

［6］ Cohen JJ.Glucocorticoidinduced apoptosis in the thymus［J］.Semin Immunol，1992，4(6):363369.

［7］　夏洪生，张玲梅，李克松，等.地塞米松诱导脾淋巴细胞凋亡模型的制备［J］.深圳中西医结合杂志，2004，14（5）：270271.

［8］ Ahmed SA,Sriranganathan N.Differential effects of dexamethasone on the thymus and spleen:alterations in programmed cell death,lymphocyte subsets and activation of T cells［J］.Immunopharmacology，1994，28(1):5566.

［9］ 刘铁军，李宁，高居忠.糖皮质激素对大鼠肠屏障功能的损害［J］.中华器官移植杂志，2005，26（10）：610611.

作者单位：滨州医学院基础学院 烟台市 264003