不同年龄患儿对呼吸道合胞病毒感染的免疫反应

【摘要】  目的 观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染的小于6个月和大于12个月患儿与同年龄对照组相比是否存在年龄相关性的不同细胞因子反应。方法 选择60例小于2岁的RSV性毛细支气管炎住院患儿，分为小于6个月和大于12个月两组，并设有同年龄的对照组。通过测定血清细胞因子(IFNγ、IL4、IL10、IL13)的浓度来观察对RSV感染的免疫反应。结果 RSV感染组与对照组相比，IFNγ、IL10、 IL13水平在大于12个月年龄组差异有统计学意义(P﹤0.05)。而小于6个月年龄组 IFNγ水平差异有统计学意义(P﹤0.05)。两组对照组中所有细胞因子均无年龄相关性差异。结论 不同年龄婴儿对RSV感染的免疫反应存在差异。

【关键词】  呼吸道合胞病毒 ;年龄;免疫反应

Immune response to respiratory syncytial virus (RSV) infection in children

　　WU Fuling1 SONG Xiufeng2 LI Yingying1 HU Yan1

　　1 Department of Pediatrics ,Affiliated Hospital of Binzhou Medical University，Binzhou 256603;

　　2 Department of Pediatrics,Central Hospital of Shengli Oil Field

　　【Abstract】 Objective To observe the agerelated difference in cytokine response to respiratory syncytial virus (RSV)infection between less than 6 months and more than 12 months compared with agematched controls.Methods Select 60 less than two years old RSV bronchiolitis hospitalized children,divided into less than 6 months and more than 12 months groups, with the same age group. By measuring the serum concentration of cytokines (IFNγ, IL4, IL10, IL13) to reflect the immune response of RSV infection.Results Comparing with agematched controls, IFNγ, IL10, IL13 level in more than 12 months age group were statistically significant differences(P<0.05), and less than 6 months age group the level of IFNγ significant differences(P﹤0.05). comparing the cytokine levels of two control groups,all cytokines had no difference.Conclusion Infants of different ages on the immune response to RSV infection is different.

　　【Key words】 respiratory syncytial virus,age,immune response

　　呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿毛细支气管炎最常见的病原体，临床以喘憋、三凹征和喘鸣为主要特点。 研究表明，在细胞因子的反应上1岁以内婴儿存在明显年龄相关性不同[1]。近年对感染RSV的婴儿和动物模型的研究表明在RSV感染时有大量的可溶性因子的释放(包括白细胞介素、白三烯、趋化因子)[2]。目前还没报道有关不同年龄患儿对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的免疫反应的动态变化,我们对此作一研究，报道如下。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 60例小于2岁初次患RSV感染性毛细支气管炎的住院患儿为研究对象，这些患儿均表现为气促、呼吸困难、呼气相延长伴喘鸣。病人分小于6个月(n=30)和大于12个月(n=30)两组，所有病人均为足月产且无并发症，并且除外有下列情况之一者：①以前有过喘鸣，常规使用过支气管扩张剂或抗炎药物，②以前存在慢性肺疾病，③先天性心脏病，④病人存在特异体质。两组患儿病情严重程度无统计学差异。对照组也分为小于6个月(n=30)和大于12个月(n=30)，来源于儿保门诊健康婴幼儿，无呼吸道症状，无过敏性疾病，无传染性和炎症性疾病。不同年龄RSV感染性毛细支气管炎与对照组相比在年龄、性别及喂养上无差别。两组患儿一般情况比较见表1。表1 两组患儿的临床特征和一般情况比较于5天人数﹤6月 0 7 - - >12月 0 5*-- 注：*与﹤6月RSV组相比P>0.05

　　1.2 试验方法 病人入院后立即取血清标本，并采集同期的对照组血标本，部分用于RSV病原学检测，部分储存于-70℃直到细胞因子分析，细胞因子IFNγ、IL4、IL10、IL13的测定用ELISA法。IFNγ、IL13、IL4、IL10试剂盒购于深圳晶美生物工程有限公司，所有操作步骤均按说明书进行。

　　1.3 统计学分析 应用SPSS统计学软件，两组间计量资料比较用t检验，P﹤0.05为有统计学意义。

　　2 结果

　　两组患儿细胞因子水平比较见表2。表2 RSV及对照组细胞因子水平比较

　　所有细胞因子，两对照组间比较(﹤6月和>12月)无统计学意义。两组RSV感染性毛细支气管炎患儿血清中细胞因子水平与对照组相比存在年龄相关性不同。与对照组相比 IFNγ、IL10、L13 水平在大于12个月组明显增高(P﹤0.05)，而在小于6个月组IFNγ降低(P﹤0.05)。IL4在两年龄组均无差别。

　　3 讨论

　　本研究显示，RSV感染的婴幼儿血清细胞因子反应出年龄相关性。与对照组相比IFNγ在小于6个月组降低，而IL13 、IL10水平无差别。而在大于12个月组IFNγ、IL10、 IL13 较对照组高。关于婴儿和儿童T细胞细胞因子反应的动态变化已有研究[1～3]，但结果不相同。前炎症和抗炎症细胞因子之间的平衡可以决定RSV感染的临床结果。高水平的血清IFNγ水平可以减少病毒复制但能增加免疫病理反应，而高水平的血清IL10抑制大多数诱导型细胞因子和减少免疫病理反应[4]，有报道表明降低IFNγ反应与严重RSV感染有相关性[5，6]。需要吸氧及机械通气的RSV感染的患儿血清IFNγ水平降低[5]。在我们的研究中，IFNγ 在小于6个月龄感染组低于对照组，由统计学意义(P﹤0.05)，而在大于12个月组高于对照组 。

　　IL10是近年发现的一个重要的Th2类细胞因子，主要由单核巨噬细胞、T细胞、B细胞产生，具有很强的抗炎及免疫抑制作用。它既能抑制Th1细胞因子的释放，又能抑制Th2细胞增生和细胞因子的产生，是对抗气道炎症反应的抗炎因子。有实验发现，转基因鼠感染RSV后，鼻腔产生的IL10对RSV有明显的抑制作用[7]。IL10能够抑制单核细胞分泌IL1β、IL6、TNF及GMCSF等炎症介质，从而减轻炎症反应，这可能对毛细支气管炎的治疗有潜在应用价值。体外研究表明，RSV通过IL10诱导可抑制早期免疫调节因子产生，且可能与严重感染有关[8]。最近有研究揭示在严重的RSV感染性毛细支气管炎和IL10或IL4基因多态性之间的关系上小于6个月组比年长儿更密切，这表明这些细胞因子在不同年龄有不同作用[9]。我们的研究表明，IL10有年龄相关性不同，在大于12个月组有统计学意义，与上述结论不符，所以IL10在RSV感染发病机制中年龄依赖性作用有待于进一步研究确定。

　　自IL13命名以来，通过对IL13生物学功能研究发现，IL13和IL4有许多相似功能。二者都主要由Th2亚群细胞产生，hIL13和hIL4基因均定位于5号染色体上，IL13基因在IL4基因上游50 kb处，在调节单核/巨噬细胞、人B淋巴细胞等方面功能相似，它们之间差异在于对T淋巴细胞功能的调节方面。

　　IL13主要由活化的Th2细胞产生，可抑制IL2、IFNγ的产生，诱导Th0向Th2分化，并对单核/巨噬细胞产生的炎症细胞因子IL1、IL6、IL8与TNFα等有普遍抑制作用，从而减轻组织免疫损伤。 另外，IL13可诱发气道高反应性、嗜酸细胞炎症、杯状细胞增生、黏液集聚 ，哮喘炎症中，IL13影响纤毛细胞和分泌细胞分化，导致气道损伤和阻塞[10] 。 IL13可增加气道高反应性和粘液分泌。在小鼠动物模型研究显示通过IL13介导机制RSV可增强严重过敏性气道反应[11]。我们的研究， RSV感染性毛细支气管炎组中IL13 水平在大于12个月组明显高于对照组(P<0.05)，而在小于6个月组间无差别。

　　总之，我们的研究表明，婴幼儿RSV感染时细胞因子的反应有年龄相关性差异。小于6个月婴儿缺乏细胞因子反应可能是因为在这个年龄阶段生理性免疫系统不成熟。我们的结果表明这种对RSV感染的免疫反应有年龄相关性不同可能对控制RSV感染性毛细支气管炎提供新的治疗方法。

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