点击显示 收起
摘要:目的 了解广东省流感监测网络实验室的运转情况，为确保网络实验室的敏感性提供科学依据。 方法 通过问卷和现场调查的方法，根据《广东省流感监测规范》对当地实验室的监测质量和水平进行全面评价。 结果 全省流感网络实验室都配有专职人员和实验室，但是部分实验室资料记录不完整，个别缺乏必备的仪器设备。2003年全省采集流感样病例标本4176份，分离到510株流感病毒，阳性率为12.2%;其中H3N2亚型流感48l株，乙型流感29株。各市病毒分离率在0～28.9%标本采集合格率是79.3%～100.0%，市级实验室结果和省级实验室结果符合率30.0%～100.0%，省级实验室结果15d内反馈率是92.7%。 结论 广东省流感网络实验室在流感监测中可以发挥重要作用，但仍应强化广东省流感监测规范的要求，进一步提高实验室检测技能。
关键词:流感病毒;监测;网络实验室;评价
Evaluation of the running status of Guangdong influenza surveillance network laboratory.
YAN Xin-ge，NI Han-zhong，ZHANG Xin，et al.（Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention，Guangzhou510300，Guangdong，P.R.China）
Abstract:Objective To understand the working status of Guangdong influenza surveillance network laboratories，and to ensure all laboratories performing to high level of sensitivity. Methods The level and quality of network laboratories were evaluated through questionnaire and on-site investigation according to《guideline for influenza surveillance of Guangdong》. Results All network labs have assigned full-time technical staff and specific rooms，however，The test records had not been well done，and nec-essary equipments were lacked in part labs.In2003，4176influenza-like specimens were obtained，and510influenza viruses were isolated，the positive rate was12.2%.Of these，481were influenza A（H3N2）viruses.29were influenza B viruses.Among7pre-fecture laboratories，the isolation rate were between;The timely rate of specimens collected within3days after onset were79.3%～100%，The results coincident rate were30%～100%，comparing prefecture labs with provincial influenza-lab，and the results feed-back rate of provincial influenza-lab within15days was92.7%. Conclusion Network labs could play an important role in influenza surveillance.However，it is necessary to improve technician and strengthen surveillance according to《guideline for in-fluenza surveillance of Guangdong》.
Key words:Influenza virus;Surveillance;Network laboratory;Evaluation
中国华南地区是流感的多发地，世界流感流行的前哨，因此流感监测在广东省整个疾病监测，中占有重要地位。广东省流感监测已有几十年的历史，流感监测网络实验室也经过多年的发展，由最初的1家发展成目前的9家（1个省级实验室和8个地市级实验室），其中2004年新增一家地市级实验室。为了促进整个广东省流感网络实验室检监测水平的提高，2004年初对当时的8家实验室运转情况进行总结和评估。
1 材料和方法
1.1 资料来源 按广东省流感监测规范，市级流感网络实验室采集流感样病例标本进行病毒分离，对血凝试验阳性的标本冷冻送省流感实验室鉴定。并根据评估调查表、现场考察的材料对实验房屋、必备设备、仪器状况、人员结构、培训、运转等方面进行评价。
1.2 实验室评价指标 标本采集合格率为在病例发病3d内采集的标本数占病例总数的百分比;标本接种及时率为标本24h内接种的比例;符合率为市级实验室分离阳性的标本经省级实验室证实是流感病毒毒株的比例;反馈及时率为省级实验室在15d内向市级实验室反馈结果的比例。
1.3 检测方法 病毒分离采用MDCK细胞，病毒鉴定采用血凝抑制试验，具体步骤见参考文献 ［1］ 。
1.4 试剂来源 病毒鉴定血清和MDCK细胞由中国CDC病毒病预防控制所国家流感实验室提供。
2 结果
2.1 网络实验室的日常工作情况 广东省流感监测网络实验室由1家省级流感实验室，7家地市级实验室组成，在9间医院开展流感样病例监测。其中广州和深圳是全年监测，其余5家实验室是半年监测（3～9月）。在3～9月每家监测医院每周采集10～15份流感样病人咽拭标本（每月不少于40份），10月至次年2月每周采集5～10份标本，各市级疾病预防控制中心实验室能够进行病毒分离，省级实验室对市级实验室病毒分离阳性的标本进行鉴定、分型、反馈结果，并对部分毒株进行抗原分析和基因测序。
2.2 人员配备、培训，仪器设备运转 目前7个地级市和省级实验室都保证有2人或以上专职人员从事流感病毒的检测，并有相对独立的实验室。配备了常用的仪器，有2家地级市仍使用超净工作台进行病毒分离。各级实验室都能对仪器运转进行日常记录和定期的监测。2003年，由省级流感实验室组织举办流感检测技术培训班，对各地市级实验室人员进行技术培训。
2.3 流感网络实验室病原学检测结果 广东省在2003年共采集了流感样病例标本4176份，分离到510株流感病毒。阳性率是12.2%;其中H3N2亚型流感481株，乙型流感29株。结果见表1。
表1 2003年广东省各流感实验室病毒检测情况 （略）
Table1 Detection of influenza viruses in Guangdong in2003
2.4 实验室标本采集、检测及时和准确性 依据《广东省流感监测工作规范》，地市级实验室对标本的采集、处理、接种以及送检都有统一的表格，并要求认真做好记录。由于各地级市实验室的原始记录不完整，使得有些实验室指标不能统计。各项指标结果见表2。
2.5 实验室对疫情爆发的检测 全年共报告疑似流感爆发疫情106起，经实验室病原学证实的有52起，除3月和9月各有1起为B型毒株引起外，其余均为H3N2型毒株引起的。经实验室血清学证实的有4起，均为H3N2型毒株引起。
2.6 血清学检测 由省级流感实验室组织7个地级市实验室开展相关人群血清学检测，结果在一般人群中，血清H1Nl抗体阳性率为83.66%，H3N2抗体阳性率为70.59%，B型Victoria系抗体阳性率为73.86%， B型Yamagata系抗体阳性率为75.82%。而在家禽养殖业人群中H5Nl和H9N2抗体均为阴性。
表2 广东省2003年流感网络实验室相关指标完成情况（略）
Table2 Influenza surveillance indications of Guangdong in2003
注:“-”资料不齐 Note:“-”means data not availlable
3 讨论
3.1 广东省大部分流感网络实验室运转良好，实验室的主要监测指标保持在一个较高水平。2003年，全省从流感样病例咽拭子标本中流感病毒分离率平均是12.21%，佛山市实验室最高，达到28.9%;一半以上的流感疫情得到实验室病原学或血清学证实，说明网络实验室在疫情诊断、证实上起到很大作用。省级实验室组织7个地级市实验室对人群进行血清学调查，并开展病毒鉴定、抗原分析、基因分析，掌握流感病毒变异情况，对流行趋势的估计和病疫苗合理使用提出科学的建议。
3.2 评估中发现的一些问题需要引起足够的重视。
3.2.1 实验室检测的质量控制 各实验室对仪器设备的使用和维护都有认真的记录，但在标本接种、上送方面记录不完整，导致无法科学起初统计标本接种和上送的及时性这两项指标。尤其是前一指标的高低直接影响病毒的分离率。因此有必要完善流感标本的接种、保存、上送程序。
3.2.2 部分实验室工作出现滑坡，表现为病例样本采集不够，全年未分离到流感病毒。可能因为去年SARS流行导至打乱工作计划，也有对流感监测的重要性存在认识不足和放松的主观原因，同时也存在实验技术上的原因。
3.2.3 目前各级实验室对流感病毒分离全部采用的是细胞培养技术，少数实验室病毒分离率偏低，和省级实验室符合率低，省级流感实验室作为全省流感检测的技术中心应对下级实验室加大培训的力度，提高培训的质量。虽然鸡胚对“0”相流感毒株不敏感，但是对乙型流感分离、以及疫苗株的筛选仍有重要作用，因此鸡胚分离技术不但不能放弃，反而应加强在流感监测中运用。
3.2.4 由于各地经济发展不平衡，各个网络实验室发展也不均衡。个别实验室还未配备Ⅱ级生物安全柜。由于引起上感症状的病原体很多，有的病原体传染性很强，应严格按《实验室生物安全通则》的要求开展工作，每一个流感网络实验室必须配备Ⅱ级生物安全柜，在设备未到位前，应暂停病毒分离工作。
参考文献:
［1］郭元吉，程晓雯.流行性感冒病毒及其实验技术［M］.北京:中国三峡出版社，1997.100～102.
作者单位:广东省疾病预防控制中心，广东广州 510300.