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摘要:目的 分析中山大学附一院2002～2004年分离的耐甲氧西林葡萄球菌的耐药性情况，为合理用药提供数据支持。 方法 用VITEK-60鉴定葡萄球菌，药敏用K-B法，数据用WHONET5.1软件统计分析。 结果 该院耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的分离率较高;MRS主要发生在病房，尤其是重症监护病房。MRS对庆大霉素、环丙沙星、红霉素、克林霉素耐药严重，对氯霉素、利福平尚有较高的敏感率，对万古霉素、替考拉宁的敏感率最高;尚未发现耐万古霉素菌株。 结论 根据药敏结果合理用药和采取有效的感控措施对防止耐药菌的传播非常重要。
关键词:耐甲氧西林葡萄球菌;耐药性情况;重症监护病房;感控措施
Surveillance of distribution and methicillin-resistant staphyloccus in hospital.
HE Shu-hong，CUI Ying-peng，REN Bin.
（Medical Laboratory Department of Affiliated First Hospital of Zhongshan University，Guangzhou510080，Guangdong，P.R.China）
Abstract:Objective To analyze drug resistance status ofMethicillin-Resistant Staphylococcus（MRS）isolated in1st Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University during2002～2004. Methods Staphylococcus was identified with VITEK-60，K-B method was used for drug susceptibility test，data was analyzed with WHONET software. Results The isolation rate of MRS was high;MRS was mainly isolated from in-patient ward，especially in Intensive Care Unit.MRS was severely resistant to Gentamycin，Ciprofloxaci，Erythromycin and Clindamycin，and more sensitive to Chloranfenicol and Rifampin.Vancomycin and Teicoplanin re-mains to be the most effective antibiotics;Vancomycin Resistant Staphylococcuswas not found. Conclusion It's very important to use antibiotics reasonably and adopt effective measure to prevent spread of MRS.
Key words:Methicillin-Resistant Staphylococcus;Drug resistance status;Intensive care unit;Infection control measure
耐甲氧西林葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus，MRS）是院内感染的重要病原菌，由于MRS不仅对甲氧西林耐药，而且对临床广泛使用的多种抗生素耐药。MRS感染多发生于免疫低下的患者，治疗比较困难，容易导致院内的流行和暴发，近年来MRS呈上升的趋势 ［1］ 。因此了解耐甲氧西林葡萄球菌的院内分布及其药物敏感性状况对有效控制MRS引起的感染和防止其在院内播散具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 标本来源 2002年1月～2004年12月从中山大学附属第一医院住院病人感染灶采集的各类标本，包括痰、分泌物、血、生殖道标本、引流液、脓液、尿、插管、胆汁等标本。
1.2 仪器和试剂 法国bioMerieux公司生产的Vitek AMS-60全自动细菌鉴定仪，血培养仪为Bact/Alert120（荷兰Organon产品），药敏纸片为英国OXoid公司生产，培养基基质为哥伦比亚琼脂由bioMerieux公司生产，nitrocefin纸片为英国OXoid公司生产，Vitek AMS-60符合卫生部质控要求。
1.3 方法 用Vitek AMS-60对致病菌进行鉴定，药敏试验采用K-B纸片扩散法，结果按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）2002年制定的规则和标准进行判读 ［2］ 。每周用ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853菌株进行质控，药敏数据用WHONET5进行统计分析。用nitrocefin纸片对测试菌株进行β-内酰胺酶测定，将nitrocefin纸片贴在测试菌株药敏平板上，如显红色则判定为阳性。
2 结果
2.1 MRS的菌群分布 2002年1月～2004年12月3年共分离出葡萄球菌2392株，其中MRS1722株，占71.9%。1722株MRS中金黄色葡萄球菌708株，血浆凝固酶实验初步鉴定为凝固酶阴性葡萄球菌681株，溶血葡萄球菌132株，表皮葡萄球菌130株，模仿葡萄球菌22株，腐生葡萄球菌11株，头状葡萄球菌9株，松鼠葡萄球菌9株，人葡萄球菌6株，沃氏葡萄球菌6株，耳葡萄球菌5株，科氏葡萄球菌2株，木糖葡萄球菌1株。
2.2 MRS的病区分布 MRS主要分布在病房，重症监护病房（ICU）460株，占26.7%，外科病房425株，占24.7%，门诊279株，占16.2%，内科病房262株，占15.2%，其它病区占17.2%。
2.3 MRS的标本分布 从痰标本分离出720株，占41.8%，分泌物178株，占10.3%，血104株，占6%，男性生殖道标本89株，占5.2%，引流液66株，占3.8%，脓49株，占2.8%，尿26株，占1.5%，插管20株，占1.2%，胆汁19株，占1.1%，组织标本10株，占0.58%，大便标本9株，占0.52%，其余标本432株，占25%。
2.4 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的β-内酰胺酶阳性率分别为81%和97%。
2.5 MRCNS和MRSA对12种抗生素的体外药物敏感情况，见表1。表1 1014株MRCNS和708株MRSA对11种抗生素的药物敏感情况（略） 注:MRCNS表示耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌，MRSA表示耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，“N”表示药敏测试株数。R为抗性;I为中介;S为敏感
3 讨论
甲氧西林1959年应用后曾有效的控制了金黄色葡萄球菌产酶株感染的流行。但是自英国报道首例MRSA以来，至今MRSA引起的感染已经在全世界范围流行，MRCNS是近年来引起关注的一种重要的条件机会致病菌，也是引起医院感染的重要病原菌。
中山大学附属第一医院2002年1月～2004年12月3年共分离出葡萄球菌2392株，其中MRS1722株，占71.9%，其中MRCNS1014株，MRSA708株。MRS主要分离自ICU病区，占26.7%，外科病房其次，占24.7%，门诊占16.2%。ICU收治的是危重病人，患者病情重，免疫力低，接受的侵入性治疗比较多，同时抗生素的选择压力比普通病房强，产生MRS率高于普通病房。
全部分离的2392株中，从痰标本分离出720株MRS，占41.8%，分泌物178株，占10.3%，血104株，占6%，男性生殖道标本89株，占5.2%，引流液66株，占3.8%。MRS在住院病人呼吸道标本中分离率高与患者意识障碍、咳嗽、吞咽反射减弱或消失、口咽部分泌物不易排出，易致误吸引起吸入性肺炎和病情重，卧床时间长，易发生坠积性肺炎等因素有关。
表1显示:MRS对青霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、克林霉素耐药严重。对氯霉素、利福平尚有较高的敏感率，其中MRCNS对氯霉素、利福平的敏感率分别为61.9%和78%，MRSA对氯霉素、利福平的敏感率分别为72.9%和78%，氯霉素、利福平可做为治疗MRS感染的治疗用药。利福平是除万古霉素和替考拉宁外对MRS敏感率最高的药物，与王晶 ［3］ 等人的报道相似。MRS对万古霉素、替考拉宁的敏感率最高，尚未发现耐万古霉素葡萄球菌（VRSA）。MRS对青霉素类抗生素全部耐药。葡萄球菌对甲氧西林的耐药机制主要有三种:（1）mecA基因介导产生了低亲和力的PBP2a（2）产青霉素酶（3）PBPs的修饰，其中最为多见的是mecA基因介导的耐药。头孢类抗生素或其它β-内酰胺类抗生素如阿莫西林/克拉维酸可在体外对MRS有一定的敏感率，但根据NCCLS的规定均应报道耐药。早期喹诺酮类抗生素对MRS有良好的抗菌作用，但当喹诺酮类抗生素在临床广泛使用后，耐药性增长迅速，从表1可见MRCNS和MRSA对环丙沙星的敏感率仅为24.3%和2.2%。但林尤仕 ［4］ 等报道治疗轻度MRS的感染可用利福平、环丙沙星治疗，但治疗重度感染仍需用万古霉素。
据解放军总医院报道，病房空气，地面床头以及医护人员的手和工作服的MRSA的分离率较高，因此加强医护人员洗手，严格进行病房的消毒和隔离是有效控制MRS流行的方法 ［5］ 。MRS引起的感染已极其普通，由于其具多重耐药性，且易暴发流行，应引起感染控制部门的高度关注。医院应该建立相应的监测小组，对MRS进行密切监测。掌握MRS的感染现状和传播途径及了解感染的发生、发展趋势对有效控制MRS的传播具有重要意义。
参考文献:
［1］樊剑锋.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究进展［J］.国外医学儿科学分册，1999，26（5）:250～253.
［2］National Committee for Clinical Laboratory Standards.Performance Stan-dards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests［M］.M100-S9，NCCLS，1999，19:32.
［3］王晶，纪芳，乔俊妮，等.耐甲氧西林葡萄球菌的检测及药敏结果分析［J］.大连医科大学学报，2000，22（3）:205～207.
［4］林尤仕，陈海.临床分离细菌耐药性监测及治疗对策［J］.中国热带医学，2003，3（2）:208～209.
［5］张东，高德伟，邹林.老年呼吸监护病房耐甲氧西林葡萄球菌流行的控制［J］.中华医院感染学杂志，2003，13（2）:174～176.
中山大学附属第一医院，广东广州 510080.
收稿日期:2005-03-24