点击显示 收起
摘要:目的 探讨肝癌病人治疗前后血浆凝血酶调节蛋白（TM）、蛋白C（PC）抗原和D-二聚体（D-D）的临床意义。 方法 用ELISA法对25例肝癌病人治疗前、后血浆TM、PC抗原，用免疫比浊法对其D-D含量进行检测。 结果 肝癌病人Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期各指标差异均有显著性，自Ⅰ期到Ⅲ期，血浆TM、D-D逐渐升高，PC抗原逐渐降低。Ⅰ、Ⅱ期病人手术后PC进一步降低，D-D升高，TM下降，但Ⅱ期病人TM仍较对照组高。 结论 血浆TM、PC抗原、D-D含量可作为肝癌病情进展，疗效观察及预后的指标之一。
关键词:肝癌;凝血酶调蛋白;蛋白C;D-二聚体
Clinical significance in determination of plasma thrombomodulin protein C antigen and D-dimer in liver cancer pa-tients.DENG Rui-lian，LUO Bing-fen，KUANG Mu-zhu.（1.Shilong People's Hospital of Dongguan City，Dongguan523321，Guangdong，P.R.China）
Abstract:Objective To study the clinical significance of plasma thrombomodulin（TM），protein C（PC）antigen and D-dime（D-D）before and after treatment in liver cancer patients. Methods 25liver cancer patients were selected into the study，the levels of plasma thrombomodulin and protein C antigen were measured by ELISA，and D-D was tested by immunoturbidimetric method. Results There were differences among three periods（l，II，III）of hepatocarcinoma，plasma levels of TM and D-D in-creasing and PC decreasing with upgrading of the stage.The PC levels of patients among two periods（I，II）after operation decreased far more，the DD levels increased，and the TM levels went down but these in II periods were higher than that in the contrast groups. Conclusion The plasma levels of TM，PC antigen and D-D can be used as one of die indicator of the development，curative effect and prognosis of liver cancer.
Key words:Leukemaia;Meoplasmas;Thrombomodulin;Protein C;D-dimer
目前有关凝血酶调节蛋白（thrombo-modulin，TM）多限于对其抗凝机制的研究，而血浆TM与恶性肿瘤的病情进展、疗效观察及预后的关系尚不十分明确。蛋白C（proteinC，C）为血浆中主要抗凝物质之一，在TM-凝血酶复合物的作用下发挥抗凝作用。D-二桑体（D-dimer，D-D）为交联纤维蛋白的最终降解产物，由于恶性肿瘤常并发出血、血栓甚至DIC，D-D作为诊断DIC和新鲜血栓的敏感指标，得到了广泛应用。其血浆水平升高反映机体凝血利纤溶系统的双重激活，是继发性纤溶亢进的敏感性和特异性指标。对25例肝癌病人血浆TM、PC、D-D的动态检测，探讨肝癌病人手术前后的血凝状态以及纤溶活性，进一步揭示其临床意义，以期为肝癌的病情发展、疗效观察及预后提供有效参考指标。
1 材料与方法
1.1 研究对象 对照组选择东莞市石龙人民医院、深圳市沙头角人民医院门诊健康体检者12例，均无心脑血管疾病，无肝肾疾病，其中男8名，女4名，平均年龄48岁（12～68岁）;肝癌组选择东莞市石龙人民医院、深圳市沙头角人民医院住院肝癌病人25例，男16例，女9例，平均年龄49岁（7～93岁），所有病人均经手术、影像或病理学检查确诊。参照全国肝癌防治研究协作会议肝癌临床分期方案 ［1］ ，将肝癌分为三期。包括已手术的Ⅰ期8例和Ⅱ期11例，Ⅲ期6例（已无手术指征）。
1.2 检测方法 肝癌病人术前和术后7d，分别采集清晨空腹静脉血1.8ml，129mmol/L枸橼酸钠9:1抗凝，4℃，3000r/min，离心10min，分离血浆，置-80℃冻存待测。PC、TM含量测定采用ELISA法，试剂盆分别购自上海大阳生物技术公司和法国DIACLONE公司;D-D含量测定采用免疫比浊法，试剂盒购自法国SPA-GO公司，均严格按说明书进行检测。
1.3 统计学处理 所有数据均以x±s表示，采用SPSS10.0统计软件进行t检验和方差分析。
2 结果
肝癌病人Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期各指标差异均有显著性，即自Ⅰ期到Ⅲ期，与对照组相比手术前血浆TM、D-D逐渐升高，PC逐渐降低，见表1。Ⅰ、Ⅱ期病人手木后PC进一步降低，D-D升高，TM下降，但Ⅱ期病人TM仍较对照组高。表1 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期肝癌测定结果（略）注:与正常对照比较，※t=3.263-5.917，P<0.05;与术前比较， # t=2.84-10.644，P<0.05;各组间比较采用方差分析，并进行两两比较，与Ⅰ期比较， △ P<0.05:与Ⅱ期比较， □ P<0.01。
3 讨论
3.1 肝癌病人血浆TM测定 目前，有关血浆TN在肝癌中变化及意义国内罕见报道。本文结果表明，自Ⅰ～Ⅲ期，血浆TM值逐步升高，差别显著，说明血浆TM与肿瘤临床分期相关，随病变进展，病情加重，而逐步升高，故TM可作为病情进展的指标。Lindahl等 ［2］ 研究发现结肠、直肠癌病人在发病初期血浆TM值水平正常，到疾病晚期则显著升高，胰腺癌病人在发病初期血浆TM水平就高于正常值，到疾病晚期升高更为显著，表明血浆TM水平同肿瘤的进展呈正相关，并且随病情的恶化，其值逐渐升高。肿瘤病人血浆TM除来自由于肿瘤细胞的侵袭导致血管内皮细胞损伤外，也可能为肿瘤病人体内大量的蛋白溶解酶裂解内皮细胞表面的TM，使之脱落释放入血所致。而肿瘤细胞自身所产生的TN释放入血，也可能是肿瘤病人血浆TM水平升高的原因之一。肿瘤病人肝肾功能的损害可致血浆小分子TM的清除减少，最终也可能导致血浆TM的升高。肿瘤病人血浆TM水平升高可能为肿瘤发展的后发事件.检测其水平可判断肿瘤的预后。
但Boffa等 ［3］ 对97例不同类型肿瘤病人血浆TM值进行了测定，结果显示结肠、直肠癌、胰腺癌及前列腺癌病人的血浆TM值随疾病进展而逐步升高，尤以前列腺癌和胰腺癌为最高。恶性间皮瘤病人血浆TM显著降低，但发生内脏转移的病人血浆TM值升高（与正常对照相比差异显著性） ［4］ 。血浆TM降低意味着内皮细胞TM减少，将导颈凝面酶雨内吞减少，进而导致纤维蛋白的形成和间皮瘤细胞与内皮细胞的粘附，促进肿瘤的继发性转移。
3.2 肝癌病人血浆D-D测定 恶性肿瘤常并发出血，血栓形成甚至DIC，D-D作为诊断DIC和新鲜血栓的敏感指标，在恶性肿瘤中得到广泛应用。本研究发现，25例各期肝癌病人，术前D-D水平均有明显升高，同文献报道一致 ［5～6］ 。其原因可能为肿瘤细胞具有较高的纤维蛋白溶解活性，同时肿瘤细胞也分泌大量的纤维蛋白原激活物（主要为尿激酶型），导致局部纤维蛋白的溶解。而术后病人血浆D-D水平进一步升高，可能是由于手术创伤所致凝血溶解而导致的D-D暂时性升高。但也有文献报道恶性肿瘤病人术后血浆D-D明显升高，1周后下降，低于术前。我们于术后第7d天采血，可能恰处于此转折点上，使得血浆D-D维持在降低前的高水平上。提示今后在选择治疗方案时，应注意其对凝溶活性的影响，拟采取相应的防范措施，避免治疗相关毒副作用的发生。
本文研究发现，Ⅰ～Ⅲ期肝癌病人血浆D-D水平逐步升高，差别显著。说明D-D随病程进展，病情加重，而逐步升高，与临床分期相关，可作为一个重要的预后指标。肝癌病人D-D含量升高可能与纤溶酶原激活物（u-PA）将纤溶酶原转变成纤溶酶，后者可将纤维蛋白降解 ［7］ 有关。因为肝癌细胞表面的u-PA受体与分泌的u-PA结合，使在癌细胞上结合的u-PA起着局部蛋白酶水解的作用，尤其是u-PA受体的表达主要集中在它侵袭的部位，而在未侵袭的部位无u-PA受体表达。而且，虽然在肝癌中可同时找到纤溶酶原激活物抑制物（PAI），但在相应侵袭的外周部位，u-PA浓度高，而PAI少。肝癌细胞穿透血管壁基低膜的能力与该癌细胞上的u-PA受体结合的u-PA量有关，如果阻断u-PA与肝癌细胞上的受体结合，则这种侵袭能力就丧失。故血浆中D-D含量越高，恶性程度也就越高，转移和复发的机会也就越多。
3.3 肝癌病人血浆PC测定 相关研究表明，妇科良、恶性肿瘤病人术后血浆PC抗原水平均降低，但与良性肿瘤病人相比，恶性肿瘤病人降低更为显著 ［8］ 。PC抗原降低，不仅预示着血栓性疾病的可能发生，而且是导致血栓性疾病的原因之一。本文研究发现Ⅰ～Ⅲ期肝癌病人血浆PC抗原水平逐步降低，差别显著。表明肿瘤细胞产生促凝物质，导致PC消耗增加，而在手术过程中，凝血系统被激活，PC进一步消耗。文献报道 ［9］ 恶性肿瘤病人术后一周PC抗原为最低，两周后恢复至正常水平。可能是随着肿瘤的进展，病情的加重，肝功能的进一步降低，PC消耗逐步加重，而肝合成的PC进一步减少所致。
参考文献:
［1］汤钊献.现代肿瘤学［M］.上海:上海医科大学出版社，1993，561～562.
［2］Lindahl AK，Boffa MC，Abidgaard U.Increased plasma thrombomodulin in cancer patients［J］.Thromb Haemost，1993，69:112.
［3］ Boffa MC，Lapeyrere C，Berard M，et al.Plasma thrombomodulin level in malignancy varies according to the tumor type［J］.Now Rev Fr Hematol，1994，36（Suppl）:S87.
［4］ Kleofish A，Greco MA，Karpatkin S.Thrombin stimulates melanoma tumor cell binding to endothelial cells and subendothelial matrix［J］.Int J Cancer，1993，53:978.
［5］ Zurborn KH，Duscha H，Gram J，et al.Investigation of coagulatioin system and fibrinolysis in patients with disseminated adenocarcinomas and non-Hodgdin's lymphomas［J］.Oncology，1990，47（5）:376.
［6］Edoute Y，Hain N，Rinkevich D，et al.Cardiac valvular vegetations in cancer
patients;a prospective echocardiographic study of200patients［J］.AM J Med，1997，102（3）:252.
［7］Hamaguchi M.Morishita Y.Takahashi l，et al.FDP D-dimer induce the se-cretion of interleukin-l.urokinase-type plasminogen activator，and plas-minogen activator inhibitor-2in a buman promonocytic leukemia cell line ［J］.Blood，1991，71:94.
［8］Noda K.Wada H.Yamada N，et al.Changes of hemostatic molecular markers after gynecological surgery［J］.Clin Appl Thromb Haemost，2000，6（4）:197.
［9］Fujita H.Soluble thrombomodulin，a possible predicator of thrombotic crisis
in thrombotic disease［J］.J Dermatol.2000，27（9）:573.
作者单位:1.东莞市石龙人民医院检验科，广东东莞 523321;
2.深圳市沙头角人民医院，广东深圳 518081.
作者简介:邓瑞莲（1965～），女，主管检验师，主要从事临床检验工作。
收稿日期:2005-04-10