点击显示 收起
摘要:目的 评价无偿献血者血液抗-HIV检测模式应用的效果。 方法 根据国家有关规定，用两种抗-HIV（1+2）ELISA试剂对每一份献血者标本进行初、复检，对阳性者送HIV确认实验室进行确认，并进一步评价单一试剂检测与双重试剂筛查检测的效果。 结果 在54591份无偿献血者标本中，国产试剂初筛163份阳性，经确认其中9份为真阳性，国产试剂的灵敏度、特异性分别为100.0%、99.72%;进口试剂初筛149份阳性，经确认其中9份为真阳性，进口试剂的灵敏度、特异性分别为100.0%、99.74%。单一试剂检测与两种试剂同时检测在灵敏度差异无显著性，在特异性单一试剂检测与两种试剂同时检测差异极显著性（P<0.01），单一试剂检测优于两种试剂同时检测。 结论 增加检测次数或选用进口试剂排除HIV感染意义有限，改进血液筛查手段实为提高血液安全性的首要途径。
关键词:献血;HIV;血液筛查;检测模式
Evaluation of the positive results of anti-HIV in unpaid blood donors with the detective model.
CHE Jia-lin，WANG De-wen，WANG Qing，et al.
（Dongguan Municipal Central Blood Bank，Dongguan523930，Guangdong，P.R.China）
Abstract:Objective To understand the infectious status of HIV in unpaid blood donors and evaluate the results of detection model in screening donated blood. Methods ELISA reagents were used in initial，repeated detection of donated blood samples and the positive ones were sent to HIV laboratory for confirmation.The true positive value，false positive value，true negative value and false negative value of the samples detected were calculated.The results obtained with singular reagent was compared with that using double reagents. Results Out of the5491samples163were initially screened as positives by using domestic made reagent and9were confirmed to be true positives with the sensitivity and specificity were100%and99.72%;149samples were initially screened as positives by using imported reagent and9were confirmed to be true positives with the sensitivity and specificity of100%and99.74%.It showed that the results of detection with single reagent was superior than that of double reagents. Conclusion The significance of increasing detection times or using imported reagent for detection of HIV infection is limited and to improve techniques for blood screening is the first way of choice.
Key words:Unpaid blood donor;Blood screening;Detection model
为保障临床用血需要和安全，保障献血者和用血者身体健康，1998年10月1日我国颁布实施《中华人民共和国献血法》，在我国实行无偿献血制度，同时《献血者健康检查要求》规定各级采供血机构必须采用不同厂家生产的试剂对献血者血液进行两次检测，合格后方可供临床应用。但采用的筛查模式国内报道不一 ［1，2］ ，现对2004年筛查的54591份血样采用不同检测模式进行抗-HIV筛查情况报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集2004年无偿献血者标本54591份，分离血清待测。
1.2 抗-HIV筛查试剂 国产和进口ELISA试剂各一种，分别以A、B表示，以上2种试剂均经过中国药品生物制品检定所批批检定，且在有效期内使用。
1.3 主要仪器 Tecan Rsp200全自动加样仪（瑞士帝肯），Dade Bering BepⅢ全自动酶免处理系统（德国贝灵）。
1.4 方法 分别用国产、进口两种抗-HIV（1+2）ELISA试剂对每一份献血者标本进行初、复检。两种试剂均阴性，不考虑共同漏检因素，判为阴性;任何一种或两种试剂同时为阳性判为可疑，可疑样本送广东省疾病控制中心HIV确认实验室进行免疫印迹法（Western Blot）确认。同时，根据确认实验室反馈的结果，计算每种试剂的检测结果中所包含的真阳性、假阳性、真阴性、假阴性数，进一步分析单一试剂与双重试剂检测的灵敏度和特异性，计算方法:灵敏度=真阳性/真阳性+假阴性，特异性=真阴性/真阴性+假阳性。
1.5 统计学处理 采用t检验。
2 结果
2.1 对54591份样本进行检测 A、B两种试剂同时阴性结果54295份，共（单一和二种试剂）初筛出阳性296份，初筛阳性率为0.54%，296份初筛阳性样本经确认9份为真阳性，其余287为假阳性，假阳性率为0.53%。其中，国产试剂共检出163份阳性，经确认9份为真阳性，其余154份为假阳性，假阳性率为0.28%;进口试剂共检出149份阳性，经确认9份为真阳性、其余140份为假阳性，假阳性率为0.26%;A、B两种试剂同时检测假阳性287份（7份两种试剂同时假阳性）。经确认为阳性的9份样本，为两种试剂同时检出。三种模式检测数据见表1。
2.2 依据表1的结果，分别计算出每一种试剂及2种试剂同时检测的灵敏度、特异性（见表2）。
表1 三种模式检测献血者血样抗-HIV结果（略）
表2 不同模式检测献血者血样抗-HIV的效果（略）
三种检测模式灵敏度无显著差别，可能为真阳性例数过小所致，应进一步放大真阳性的标本量。A试剂检测与单一B试剂检测的特异性无显著差别（t=0.84<t 0.05 =1.96，P>0.05），A试剂或B试剂检测与A、B两种试剂同时检测特异性差别极显著（t=11.53，t=12.12>t 0.01 =2.58，P<0.01）。
3 讨论
近年来我国所发现的HIV感染者和AIDS病人逐年增加，个别地区已经开始进入HIV感染的快速增长期，形势严峻。根据WHO的统计，全球HIV感染者约5%～10%为经血液传播而感染 ［3］ ，而当前我国血液传播率更高 ［4］ ，尽管通过无偿献血，血液的安全性得到了很大的提高，但无偿捐血者当中也存在HIV感染的情况。本文对2004年54591献血者中有9位无偿献血者确认抗-HIV阳性，献血者中阳性率为0.016%（9/54591）。
《献血者健康检查要求》规定各级采供血机构必须采用不同厂家生产的试剂对献血者血液进行两次检测。但是鉴于目前试剂质量不均一性，不能排除未被选择的试剂在某一性能方面优于被选择的两种试剂的可能，而且每个采供血机构对上百种诊断试剂的选择受多种因素的影响。葛红卫等 ［1］ 报道，选择3种试剂对3项ELISA检测，结果显示，3项ELISA试验均存在单一试剂的检测效能好于或等于双重或多重试剂综合检测的效能。本文表2结果显示，在灵敏度方面单一试剂同两种试剂同时检测差异无显著性（P>0.05），在特异性方面单一试剂同双重试剂同时检测差异极显著性（P<0.01），单一试剂优于两种试剂同时检测。本文单一A试剂检测，假阳性154份，单一B试剂检测，假阳性140份，A、B两种试剂同时检测假阳性287份（7份两种试剂同时假阳性），导致了报废血液的增加。因此采用两种试剂同时检测保证血液安全措施有限。
现在采供血机构选用一种国产、一种进口试剂，甚至两种都用进口试剂的检测模式，增加了检测成本。但随着国家对检 测试剂的管理规范，国产试剂的质量逐年提高，目前已达到国际上先进试剂的水平 ［6，7］ 。因此，通过选用进口试剂来达到提高检测质量的意义有限。
国际输血界通用的血液筛查原则为以一种试剂进行检测，初筛阳性的标本，进行双孔复测 ［8］ 。提高诊断试剂的灵敏性、特异性及改进血液筛查手段作为提高血液筛查安全性的首要途径。血清学技术经过多年的发展，敏感性特异性有了很大的提高，目前欧美等国已开始在血清学检测的基础上采用混合法应用核酸技术进行复检，我国经过一段时间的整顿，也已确定开放结核分枝杆菌，沙眼衣原体、乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒等的分子生物学检测。随着试剂商品化，操作自动化的发展，分子生物学技术必将成为病毒学检测的首选方法 ［9］ 。
当前我国的无偿献血者大多是首次捐血，多次重复捐血的比例较少。安全血液来自固定、志愿的无偿献血者，因为他们的血液经常得到检测，而且他们明白如果有危险行为就不会去捐血。因此，各级采供血机构应该加大无偿献血宣传的力度和深度，建立一支固定的、志愿的低危无偿献血者，这将是我们今后无偿献血工作的重点和发展方向。其次，尽快将核酸检测（NAT试验）或ELISA抗原检测纳入常规血液筛查，而不是增加ELISA检测次数或选用进口试剂，因此有关部门参照国际输血行业质量规范，尽快制订出适合我国无偿献血形势需要的血液筛查行业标准及判定原则，使我国采供血机构血液筛查工作更加规范化。
参考文献:
［1］葛红卫，王鸿捷，李莉华，等.采供血机构血液筛查模式及其效能探讨［J］.中国输血杂志，2002，15（1）:17～19.
［2］古金龙，朱友亮，韩志英，等.血液初复检使用不同厂家试剂的必要性［J］.中国输血杂志，2002，15（1）:52.
［3］ Sloand EM，Pitl E，Klein HG.Safety of the blood supply［J］.JAMA， 1995，274:1368.
［4］季阳.输血相关艾滋病的积极预防与控制［J］.健康必读，2003（1）:13.
［5］强来英，林旭东，沈彤庆，等.国产抗-HIV ELISA诊断试剂质量提高的血清学证实［J］.中国输血杂志，2003，16（2）:81～83.
［6］季阳、贾桂芳，周琼秀，等.8种艾滋病病毒抗体诊断试剂的质量评估［J］.中国输血杂志，2002，15（2）:206.
［7］强来英，沈彤庆，林旭东，等.国内部分厂家的HIV抗体诊断试剂的质量评估［J］.中国输血杂志，2004，17（4）:267～268.
［8］New York Blood Center.Testing Policies［R］.Version May31，1996:4～29.
［9］黄如欣，赵春红.病毒核酸检测技术新进展［J］.中国输血杂志，2000，13（增刊）:7～10.