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【摘要】 目的 采用合适方法检测分析，以提高精液标本质量分析的准确性，为临床提供准确的报告结果。 方法 对200份门诊（剔除无精子）标本，行计算机精液检测分析系统（CASA）初步筛查，取得123份低密度（<50×106/ml）标本，77份高密度（＞50×106/ml）标本，采取传统人工分析，同时行CASA直接分析；对高密度标本稀释后，又再行两种方法的测定，对所得的数据进行客观比较，综合分析，判断结果的差异性和相符性。 结果 人工分析与CASA测定，对低密度标本，精子密度、精子活率、精子（A+B级）活力差异无显著性（P＞0.05）；对高密度标本，精子密度、精子活率、精子（A+B级）活力差异有显著性（P<0.05），稀释标本后，结果差异无显著性（P＞0.05）；精子畸形率差异有显著性（P<0.05）；精子凝集现象CASA无反映；精液其它成份如白细胞等CASA提供含糊不清的信息。 结论 CASA作为一种新的检测技术，有一定的临床应用价值。但对一些重要参数，其结果仍然有不完全准确的地方，不能盲目依赖其结果，应在传统人工分析的基础上，结合CASA的辅助技术，从而提高结果的准确性。
【关键词】 精液 人工分析 计算机辅助分析 结果
本研究通过传统人工分析和计算机辅助（CASA）系统的检测结果。对精液标本的主要参数进行同时比较，目的在于分析两种方法上存在的差异，提高结果的准确性。
1 材料与方法
1.1 标本来源 门诊男性科提供的精液标本200份，年龄22～55岁，平均(30±4.30)岁行CASA初步筛查，得123份低密度标本，77份高密度标本。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 嘱患者禁欲3～7d，用手淫法收集全分精液于干净容器内，立即送检验室置37℃ 水浴箱保温，待液化后进行检测。
1.2.2 检测方法 (1)传统人工分析采用WHO《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》作为操作标准［1］，CASA分析采用SQIAS-1000彩色精液图文分析系统软件（武汉千屏影像技术有限责任公司生产），严格按实验操作手册的要求进行; (2) 人工分析精子密度，用0.38ml盐酸稀释20μl精液,计入计算板进行计数；精子活率用伊红染色，于400倍显微镜下观察，活精子不着色（白色），死精子被染成红色；精子形态分析用瑞—吉染色法，在油镜下观察，以头、颈中段和尾部三部位分类为原则，同时观察非精子成分细胞; (3)高密度标本以3 000r/min离心15min，取上层精浆按1：2稀释精液，于400倍镜下观察100～150个精子。
1.3 资料统计 检测数据用x±s表示，各项指标比较采用t检验。
2 结果
主要观察参数：精子密度、精子活率、精子（A+B级）活力、精子畸形率、精子凝集现象、其它非精子有形成分。
2.1 人工分析与CASA测定对低密度标本，精子密度、精子活率、精子（A+B级）活力结果无显著差异；但精子形态、精子凝集、非精子成分结果差异有统计学意义。见表1。
表1 133例低密度精液的人工分析与CASA分析结果比较（略）
2.2 人工分析与CASA测定对高密度标本，精液检测的各项参数差异均有统计学意义。见表2。
表2 77例高密度精液的人工分析与CASA分析结果比较（略）
2.3 高密度标本进行稀释后，精子密度、精子活力、精子活率CASA测定结果接近人工分析结果，无统计学意义。但精液的其它参数差异均有统计学意义。见表3。
表3 77例高密度精液稀释后人工分析与CASA分析结果比较（略）
3 讨论
精液分析结果的准确性，在男性不育症诊断中占有重要地位。准确的分析其目的是为临床提供正确的诊断及采取有效的治疗。为了达到这一目的，在精液分析时需注意以下问题。
3.1 国内外很多文献对CASA分析结果均有较高评价。其具有用量少，成本低，检测速度快，节省人力的特点［2］，更具有高精确性和提供精子动力学量化数据的优点［3］。其重复性和一致性均优于人工检测［4］，并且能快速准确的测定精子密度、活率、活力等参数，重复性好，可比性强，还可以提供描述精子运动状态的多种参数［5］。但据从观察结果分析，CASA仍存在一些不足。对低密度精液标本；对其它非精子有形成分较少的标本；CASA分析结果均比较准确。对精子密度高的标本，用自身精浆稀释后测定，CASA分析结果均比较准确。对精子畸形率高的标本，对含非精子有形成分较多的标本，在对精子形态分析等方面，CASA分析结果常常引起很大误差。因此对此类标本仍需人工镜检确认。
3.2 对精液标本结果作出最后判断的是专业人员本人，专业技术人员对CASA系统的理解，对人工分析操作的熟练掌握，直接影响结果的准确性。所以操作人员的素质显得很重要，应进行严格的培训，精液分析应以WHO实验室检验手册为工作指南。
3.3 目前CASA分析结果仍不能替代传统人工分析。虽然传统人工分析速度慢，存在着主观误差。结果仍然受人的经验和专业水平的限制。但在精液形态，非精子有形成分的判断上，CASA的报告结果应予以人工纠正。
3.4 精液形态检查与分类，是临床上评价睾丸功能的重要内容。CASA不能正确的反映其特征。必须在染色的情况下，在用油镜检查的基础上进行人工分析和报告结果。
3.5 精子的凝集现象，CASA无法正确反映。人工镜检可以清楚地观察到此现象，当所占百分率＞10%时，提示有生殖道感染或免疫性疾病存在的可能。
3.6 人工分析与CASA检测在精子活率上，虽然没有显著差异，但人工分析结果应更准确。而CASA系统，精子只有产生一定的位移时，才会认为是活的精子，对在原地进行尾部摆动的精子往往认为是死精子。同时在对有形成分较多的标本时，精子游动过程会碰撞一些细胞，产生位移，系统会误认为精子。特别是在少精子症合并生殖道感染的标本中尤为显著。所以离心取上层精浆稀释液进行CASA测定，有形成分的颗粒杂质减少，被误认为精子的机会减少。其结果才能更接近人工分析。
3.7 对精液中非精子有形成分较多的标本，如精原细胞、白细胞、非细胞颗粒等，需人工分析后输入到原细胞数一栏，CASA系统在分析时才会自动的把这部分减除。
综上所述，传统的人工镜检，在精液分析中仍然占有重要位置。特别是在形态方面的判断上，CASA结果应进行人工复核，从而提高结果的准确性。
【参考文献】
［1］ 世界卫生组织. 人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册［Ｍ］. 第4版.北京人民卫生出版社，2001,25～80.
［2］ 吴志平，吴祥林. 高精子密度精液标本质量分析方法探讨［Ｊ］. J.Clin Transfus Lab Med，Oct，2006，Vol 8，No.4
［3］ 吕学君，赵德文. 三种计数精子的稀释液比较［J］. 齐鲁医学检验，1993，8（2）:26.
［4］ 龚平，周治兰，王昌富. 计算机辅助精液分析的临床应用［J］. 中国误诊学杂志, 2004,4（5）：759.
［5］ 张燕，郭贤坤，聂勇，等. 计算机辅助精液检测200例临床分析［J］. 实用医学进修杂志, 200,28（2）：118～121.
作者单位：广东医学院附属医院检验科，广东 湛江 524001.