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首页医源资料库在线期刊中国热带医学杂志2007年第7卷第10期

云南省啮齿动物中汉坦病毒自然感染状况调查

来源:中国热带医学
摘要:【摘要】目的调查云南省啮齿动物汉坦病毒自然感染状况,为制定云南省肾综合征出血热的预防控制提供科学依据。方法用鼠笼和鼠夹在云南省11个县(市)进行捕鼠,捕获的啮齿动物进行分类鉴定并解剖取肺脏组织和用直接免疫荧光法检测汉坦病毒。结果在调查的11个县(市)共捕获5属8种啮齿动物1303只,黄胸鼠......

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【摘要】    目的 调查云南省啮齿动物汉坦病毒自然感染状况,为制定云南省肾综合征出血热的预防控制提供科学依据。 方法 用鼠笼和鼠夹在云南省11个县(市)进行捕鼠,捕获的啮齿动物进行分类鉴定并解剖取肺脏组织和用直接免疫荧光法检测汉坦病毒。 结果 在调查的11个县(市)共捕获5属8种啮齿动物1 303只,黄胸鼠和褐家鼠为居民区优势种,高山姬鼠和大绒鼠为野外优势种。调查县(市)汉坦病毒自然感染率范围为2.5%~7.1%;居民区黄胸鼠、褐家鼠、小家鼠和大足鼠中汉坦病毒自然感染率分别为3.8%(24/637)、5.5%(15/274)、4.2%(2/47)和3.0%(3/100);野外高山姬鼠、大绒鼠、中华姬鼠和臭鼠[KG-*3〗句鼠[KG-*3〗青中汉坦病毒自然感染率分别为2.2%(3/139)、1.8%(3/163)、0(0/4)和14.3%(1/7)。 结论 云南省啮齿动物汉坦病毒自然感染普遍,存在以褐家鼠-黄胸鼠为主要宿主的汉城型病毒的循环形式和以高山姬鼠-大绒鼠为主要宿主的汉滩型病毒的循环形式。

【关键词】  啮齿动物 汉坦病毒 肾综合征出血热 自然感染

  Investigation into the naturally infectius status of Hantaviruses in rodents in Yunnan Province, China.

  ZHANG Yun-zhi, ZHANG Hai-lin, YANG Wei-hong, et al.

  (Yunnan Provincial Institute of Endemic Diseases Control and Prevention, Dali 671000, Yunnan, P. R. China)
   
  Abstract:Objective  To investigate the situation of the natural infection of Hantaviruses (HV) in rodents and offer guidance for the control and prevention of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) in Yunnan Province, China.  Methods  The rodents had been captured by a special trap, the lung tissues of the rodents was taken after identified and stored in -196℃ liquid Nitrogen. HV was detected by direct immunofluorescence assay (DIFA) from the lung tissues of the rodents.  Results  The 1 303 rodents belonging to 8 species of 5 Genera were captured in 11 counties or cities in Yunnan. Rattus flavipetus and Rattus norvegicus were the dominant species in the residential areas and Apodemus chevrieri and Eothnomys melanogaster were the dominant species in the field. The total natural infection rates of HV in rodents in Xiangyun County, Longling County, Yongsheng County, Lancang County, Xundian County, Yulong County, Jingdong County, Luxi County,Yingjiang County, Dali City and Binchuan County  were  7.1%(2/28),6.0%(5/84),5.6%(9/162),5.2%(5/96), 5.0%(9/181), 3.0%(3/100),2.7%(8/291),2.7%(3/113),2.6%(1/38),2.5%(3/119)and 3.3%(3/91)respectively. The natural infection rate of HV in Rattus flavipetus, Rattus norvegicus, Mus musculus and Rattus nitidus was 3.8%(24/637),5.5%(15/274),4.2%(2/47)and 3.0%(3/100)respectively in the residential areas. The natural infection rate of HV in Apodemus chevrieri, Eothnomys melanogaster, Apodemus draco and Suncus murinus was 2.2%(3/139),1.8%(3/163),0.0%(0/4)and 14.3%(1/7)respectively in the field.  Conclusion  The rodents were infected naturally and generally by HV in Yunnan Province. There were two types of HV in Yunnan Province, genotype of Seoul circling in the main hosts of Rattus norvegicus and Rattus flavipetus and the genotype of Hantaan circling in the main hosts of Apodemus chevrieri and Eothnomys melanogaster. But, the major type in rodents was the genotype of Seoul circling in the main hosts of Rattus norvegicus and Rattus flavipetus, which were associated with the light and sporadic cases of HFRS in Yunnan Province.
   
  Key words:Rodents; Hantaviruses; Hemorrhagic fever with renal syndrome; Natural infection

  随着人类社会活动的日益频繁和生态环境的巨大变化,新发和再次发生的传染病在不断的危害着人类。汉坦病毒属于布尼亚病毒科(Bunyaviridae)汉坦病毒属(Hantavirus, HV),啮齿动物为其自然宿主。迄今为止,HV主要引起人类发生肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)和汉坦病毒肺综合征(Hantavirus pulmonary syndrome, HPS)。HPS主要流行于美洲,我国流行的主要是HFRS。近年来,汉坦病毒在云南省的流行有扩大的趋势。为了解汉坦病毒在宿主动物中的自然感染状况,我们在肾综合征出血热监测的基础上,对啮齿动物中汉坦病毒自然感染状况进行了调查研究。

  1  材料与方法

  1.1  材料

  1.1.1  标本采集  于2004年6~8月间,在云南省选择具有代表性的11个县(市)进行汉病毒的自然感染率调查。用鼠笼和鼠夹在调查的11个县(市)进行捕鼠,捕获的宿主动物进行分类鉴定并解剖取肺脏组织,放入塑料冻存管内。

  1.1.2  采集标本的保存  采集的动物标本放置于-196℃液氮保存,并及时带回实验室进行汉坦病毒相关抗原检测。

  1.2  方法

  1.2.1  鼠肺组织标本抗原片制备  将鼠肺冰冻切片,刀台用 -35℃,刀用 -10℃,冷丙酮固定5~10min,7.2 PBS漂洗后,电扇吹干,-20℃保存。

  1.2.2  直接免疫荧光法  直接荧光抗体购自浙江省疾病预防控制中心,按常规方法进行,将制备的抗原片吹干,加入异硫氰酸荧光素(FITCE)标记的HFRS抗体,工作浓度1:4,稀释用1:50 000的依维氏兰,每孔加0.025ml HV荧光抗体,以恰好将孔覆盖为宜;37℃ 湿盒孵育1h,7.2 PBS 振荡清洗3次,每次5min;吹干后,滴加90%的甘油,置荧光显微镜下观察。

  1.2.3  自然感染率95%可信区间的计算  感染率的标准误 Sp=p(1-p)/n, 其中p为感染率,n为样本数;感染率95%可信区间为:p±1.96Sp[1]。

  2  结果

  2.1  宿主动物的组成  11个县(市)进行了宿主动物调查,结果共捕获宿主动物5属8种1303只,其中,居民区黄胸鼠、褐家鼠、小家鼠和大足鼠分别占58.3%(646/1109)、28.3%(314/1109)、4.3%(48/1109)和9.1%(101/1109),黄胸鼠和褐家鼠为居民区优势种。野外高山姬鼠、大绒鼠、中华姬鼠和臭鼠

  表1  云南省11县(市)HFRS宿主动物种群构成情况(略)

  注:括号内的数字为捕获数

  2.2  汉坦病毒自然感染率  11个县(市)汉坦病毒总的自然感染率为3.9%(3.8%  4.0%)(51/1303),各县(市)汉坦病毒自然感染率最高为祥云县7.19%;最低为宾川县2.5%。居民区黄胸鼠、褐家鼠、小家鼠和大足鼠中汉坦病毒自然感染率分别为3.8%(24/637)、5.5%(15/274)、4.2%(2/47)和3.0%(3/100);野外高山姬鼠、大绒鼠、中华姬鼠和臭鼠

  表2  云南省11县(市)啮齿动物中汉坦病毒自然感染情况(略)

  注:表示捕获数为0;表示分子为检测阳性数;分母为检测数

  3  讨论
   
  HFRS是一种由啮齿动物为主要宿主和传染源的自然疫源性疾病,可将疫区划分为姬鼠型疫区、家鼠型疫区和混合型疫区[2]。该调查表明云南省啮齿动物中,不管家鼠和野鼠肺脏组织内,皆检查出汉坦病毒,提示云南省普遍存在汉坦病毒自然感染,自然感染率一般在1%~10%之。以前研究认为,汉坦病毒在宿主动物中的自然感染率大小与当地HFRS的发病率呈正相关。其感染率大小可作为HFRS监测指标之一,也可作为HFRS流行的预警因素。这方面的研究有待于近一步的探讨。
   
  HFRS在云南省广泛分布,以散发及轻型病例为主[3]。一般说来,进入家鼠型疫区,由家鼠汉坦病毒感染的病例,以轻型为主,临床上不易发现;而进入姬鼠型疫区,由姬鼠汉坦病毒感染的病例,以重型为主,临床上容易发现。该调查阐明云南省存在以褐家鼠-黄胸鼠为主要宿主动物的汉城型病毒的循环形式和以高山姬鼠-大绒鼠为主要宿主的汉滩型病毒的循环形式。其中,以褐家鼠-黄胸鼠为主要宿主动物的汉城型病毒的循环形式为主,这与云南省流行性出血热病例,从临床上以散发和轻型病例为主相符。
   
  尽管汉坦病毒的型别具有宿主特异性,但也存在着感染病毒与宿主动物不一致而发生宿主“溢出”的现象[4,5],这往往会导致两种结果的发生,其一这种感染可能只是暂时的,很快在动物体内得以清除,因此这种情况对病毒得以维持和进化无多大意义[6];其二则是发生宿主转换,病毒能够较好地适应新的宿主动物,并加以进化[4,5]。比如,新近有研究者从爱沙尼亚黑线姬鼠分离出DOB型汉坦病毒(Saa株),而这种病毒与黄喉姬鼠来源的DOB型病毒无论是病毒核苷酸序列上,还是从中和试验上均明显不同,这提示黄喉姬鼠型毒株可能发生了宿主转换,传给黑线姬鼠并与之进化,产生了新的汉坦病毒进化分支[7];在HPS相关病毒与鹿鼠和白足鼠之间的进化关系中,也提示存在着这种宿主动物的转换[8];而中国的NC167株也被认为是HTN型病毒从黑线姬鼠转移至社鼠后进化而来[9]。该研究从臭鼠[KG-*3〗句鼠[KG-*3〗青(Suncus murinus)的标本中,也检测出汉坦病毒感染,而臭鼠[KG-*3〗句鼠[KG-*3〗青为食虫类动物,说明其对汉坦病毒的感染也可能存在着宿主动物的“溢出”现象,或可能臭鼠[KG-*3〗句鼠[KG-*3〗青感染汉坦病毒为偶然感染,其作为汉坦病毒的宿主地位有待于进一步的探讨。

【参考文献】
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  [6] Mifang Lang,Li DX, Xiao SY,et al. Antigenic and molecular characterization of hantavirus isolates from China[J].Virus Research, 1994,31:219~233.

  [7] Nemirov K, Henttonen H, Vaheri A,et al. Phylogenetic evidence for host switching in the evolution of hantaviruses carried by Apodemus mice[J].Virus Res, 2002, 90(1-2):207~215.

  [8] Martha CM, Sergey PM,Angela MJ,et al.Genetic diversity and distribution of Peromuscus- Borne Hantaviruses in North America[J]. Emerg. Infect. Dis,1999, 5(1):75.

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作者单位:云南省地方病防治所,云南 大理 671000.

作者: 张云智,张海林,杨卫红,亚红祥,袁庆红 2010-1-13
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