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【摘要】 目的 探讨地锦草乙醇提取物(AE)和石油醚提取物(PEE)对口腔病原菌的体外抗茵作用。 方法 用试管倍比稀释法测定两种提取物对常见口腔病原的最小抑茵浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)，判断其抗菌活性。 结果 AE对变异链球菌、粘性放线菌和牙银卟啉单孢菌等3种常见口腔病原茵的MIC分别为25mg／ml、50mg／ml、12.5mg／ml，MBC分别为50mg／ml、>100mg／ml、25mg／ml，PEE的MIC分别为5％、10％、2.5％，MBC分别为10％、>20 %、10％。 结论 两种提取均有一定抗菌作用，但醇提物抗茵作用较强。
【关键词】 地锦草提取物 口腔病原菌 最小抑茵浓度(MIC) 最小杀茵浓度(MBC)
Observation of the antibacterial effect of extracts from Herba Euphorbia humifusa on oral pathogenic bacteria in vitro.
LIU Ai-hua, BAO Fu-kai, ZHANG Jie, et al.
(Faculty of Basic Medical Sciences，Kunming Medical College, Kunming 650031; Guangbo Tech Co.Ltd, Kunming 650031,Yunnan, P.R. China; )
Abstract：Objective To explore antibacterial effects of alchohol extract (AE) and petroleum ether extract (PEE) from Herba Euphorbia humifusa on common oral pathogenic bacteria in vitro. Methods Minimal inhibition concentration (MIC) and minimal bacteriasidal concentration (MBC) of AE and MBC to Streptococcus mutans (SM), Actinomyces viscous (AV) and Porphyromonas gingivalis(PG) were tested. Results MICs of AE to SM, AV and PG were 25mg/ml,50mg/ml,and 12.5rag/ ml, MBCswere 50mg/ml, > 100mg/ml, 25mg/ml, respectively. MICs of PEE were 5%, 10%,2.5%,MBCs were 10%,>20%,and10%. Conclusion AE and PEE show certain antibacterial activity agaist SM, AV and PG, but AE shows stronger activity.
Key words：Herba Euphorbia humifusa; Extract; Oral pathogenic bacteria; MIC; MBC
地锦草(Herba Euphorbia humifusa)又名血见愁，味苦，性平；有清热利湿，凉血止血，解毒消肿之功。中医和民间用于治疗痢疾，小儿腹胀，出血及高血压等。现代药理研究表明，地锦草含黄酮类、槲皮素、没食子酸、鞣质等，对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌有抑菌作用，但目前尚未见到地锦草抗口腔微生物的报道。本研究探讨了地锦草提取物对口腔常见病原菌的体外抑菌作用［1,2］。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 供试样品 地锦草乙醇提取物(AE、浸膏干粉)、石油醚提取物(PEE、黄色浓缩液)，均由昆明广博科技有限公司实验室提取纯化，阳性对照药甲硝唑为美国Sigma-Aldrich公司产品。
1．1．2 菌种 变异链球菌ATCC25175、粘性放线菌ATCCl5987，牙龈卟啉单孢菌ATCC33277，均购自四川大学华西口腔医学院。
1．1．3 培养基 牛心脑浸液血琼脂平皿(BHI)、放线菌富集培养基、厌氧菌液体培养基原料由上海生物制品研究所提供，本室配制。
1．2 方法［3,4］
1．2．1 供试菌液的制备 将上述冷冻干燥保存的厌氧菌标准菌株在相应的厌氧菌液体培养基中复苏后，转种到BHI血平皿、放线菌富集培养基上置厌氧缸内抽气换气后，37℃厌氧培养48～72h，刮取菌苔用生理盐水稀释，配成3×105cfu/ml备用。
1．2．2 药物原液的配制 用NS将AE配为200mg／ml，PEE配为40％(V／V)。甲硝唑(MTZ)为阳性药对照，原液浓度0.1mg／ml。
1．2．3 最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MIC)的测定 用试管内倍比稀释法测MIC。每组用12只试管，1～10号管用于药物系列稀释，11号管为细菌对照，12号管为空白对照。各管药物浓度见表1。每管加菌量0．1ml，厌氧培养24h后观察结果，确定MIC。取未见细菌生长的各管培养物各0．1ml涂布于相应的琼脂平皿上，培养24h，平皿不长菌落的最小稀释度的药物浓度即为该药对相应细菌的MBC。
3 讨论
目前细菌耐药问题日益严重，给感染性疾病治疗带来困难。因此，从植物成分中寻找有效的抗菌物质成为当前研究的热点。我们先前的研究及其他作者的报道已证明，一些植物成分有抗口腔病原菌的作用。本研究进一步证明，从植物药中寻找抗菌药充满希望。
表1 各试管中药物最终浓度（略）
2 结果
AE和PEE均对三种受试口腔病原菌有抑菌作用，见表2。
表2 AE和PEE对口腔病原菌的MIC及MBC（略）
从目前的结果看，地锦草两种提取物均有抗菌作用，说明其抗菌活性物质不只一种。其中抗牙龈卟啉单孢菌的作用较强，而抗粘性放线菌的作用较弱，拟进一步对提取物进行分析，找出抗口腔微生物的活性单体，为口腔抗菌药物的开发打下基础。
【参考文献】
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作者单位：昆明医学院基础医学院，云南 昆明 650031； 昆明广博科技公司， 云南 昆明 650101.