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【摘要】 目的 了解阳江市区6类食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况。方法 抽检生肉类、熟肉制品类、奶类、水产品类、冷饮类、蔬菜类共6类食品370份样品，采用国家标准方法并参照广东省2006年食源性致病菌监测工作方案对抽取的样品进行单核细胞增生李斯特氏菌分离、鉴定。结果 370份样品中共检出单核细胞增生李斯特氏菌14株，总阳性检出率为3.78%,其中生羊肉中检出2株，生鸡肉中检出5株，熟肉中检出7株，检出率分别为8.00%(2/25)、10.00%(5/50) 和 15.56%(7/45)，其它类中均未检出。结论 阳江市区6类食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌的污染，应加强相关的食品监督管理。
【关键词】 食品；单核细胞增生李斯特氏菌；污染
食品安全是一个重大的公共卫生问题，而单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患的病原菌，在自然界广泛分布，可导致人和动物患脑膜炎、败血症、流产等，病死率高达30％～70％。近年来，欧美等国食源性李斯特氏菌病爆发的报道日益增多［1］。由食物传播的李斯特氏菌病在人群和动物中爆发流行，已引起世界各国的高度重视，被列为九十年代食品中四大病原菌之一。目前，我国尚无食源性李斯特氏菌病的爆发流行的报道，但在动物中的单核细胞增生李斯特氏菌病的爆发流行和禽肉中单核细胞增生李斯特氏菌污染情况已见报道［2］。为了解阳江市区6类食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况，预防食源性的李斯特氏菌病的发生和流行，于2005年10月～2006年9月对生肉类、熟肉制品类、奶类（生奶及消毒奶）、水产品类、冷饮类、蔬菜类共370份样品进行单核细胞增生李斯特氏菌污染状况的监测调查，现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 样品来源及数量
生肉类（包括生猪肉、生牛肉、生羊肉、生鸡肉）、熟肉制品类（非定型包装）、奶类（生奶及消毒奶）、水产品类、蔬菜类、冷饮类共370份,样品分别采自市区各大农贸市场、市肉类联合加工厂、大型奶牛场、大中型酒店及超市、牛奶销售店、冷饮销售店。
1.1.2 采样方法
无菌采样和无菌包装，每件样品200g（ml），样品在4℃保存，8h内送达实验室。
1.1.3 培养基及主要试剂
LB1、LB2增菌液、三糖铁培养基、SIM动力培养基、TSA-YE斜面、血平板、生化培养基、TSB-YE肉汤由本中心自行配制；科玛嘉单核细胞增生李斯特氏菌显色培养基由郑州博赛生物工程有限责任公司提供；奈啶酮酸、吖啶黄、生化反应管由北京陆桥技术有限责任公司提供；API-Listeria鉴定试条由法国生物梅里埃公司提供。
1.1.4 标准菌株
单核细胞增生李斯特氏菌（CMCC54007）、金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、马红球菌由卫生部药品生物制品检定所提供。
1.1.5 实验小鼠
雄性，体重16～20g,由广东省医学实验动物中心提供。
1.2 采用的检验方法
1.2.1 参照中华人民共和国国家标准GB/T4789.30-2003《食品卫生微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》和广东省2006年食源性致病菌监测工作方案。
1.2.2 小鼠毒力试验
将可疑菌株的纯培养物接种于TSA-YE中，在30℃培养24h，离心，弃去上清液，用0.85%灭菌生理盐水制备成浓度为1010cfu/ml的菌悬液，取此菌悬液进行小鼠腹腔注射，每只0.5ml,每组3只，同时设阴性对照组和阳性对照组，阴性组注射无菌肉汤，阳性组注射标准菌株肉汤。观察7d内小鼠死亡情况。
2 结果
2.1 镜检及鉴定结果
从370份样品中分离出14株单核细胞增生李斯特氏菌，总阳性率为3.78%（14/370）。镜检均为革兰氏阳性小杆菌，湿片镜检出现轻微旋转或翻滚样的运动。
2.2 小鼠毒力试验
14株单核细胞增生李斯特氏菌经TSB-YE纯培养24h,制备成浓度为1010cfu/ml的菌悬液，注射小鼠腹腔。实验组与阳性组5h后开始发病，表现为精神萎靡不振、厌食、抽搐、瘫痪， 72h内死亡，阴性对照组健康存活，无异常。
2.3 6类食品中单核细胞增生李斯特氏菌的污染情况
由表1可见非定型包装熟肉的污染情况最严重,检出率为15.56%,其次为生鸡肉和生羊肉, 检出率分别为10.00%和8.00%。表1 阳江市区6类食品中单核细胞增生李斯特氏菌的污染情况（略）
3 讨论
单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患的病原菌，广泛存在于自然界中，在绝大多数食品中都能找到它。食品能在食品链中的任何一个环节受到单核细胞增生李斯特氏菌的污染，这种情况在那些潮湿气候的地区尤为显著。
在本次监测调查的阳江市区6类食品中，非定型包装熟肉的污染情况最严重，阳性率为15.56％。这可能是由于熟肉制品多由小作坊生产，对原料和生产过程缺乏卫生质量控制导致带菌率高。单核细胞增生李斯特氏菌不是一种特别的抗热菌种，也不是芽孢菌，可以在巴氏灭菌的条件下被破坏。因此在食品加工中，至少要保证70℃持续2min以上的加热时间，如果加热过程不稳定，则可能降低杀菌效果。熟肉制品即使已经过热加工处理充分灭活了单核细胞增生李斯特氏菌，但如果盛具为半开放或开放状况，这就极易造成加工后二次污染，因此蒸煮后防止二次污染是极重要的。本次抽检的生羊肉、生鸡肉中单核细胞增生李斯特菌的污染率高可能是由于畜类屠宰和销售过程的交叉污染引起的。有文献报道：生肉类食品单核细胞增生李斯特氏菌污染并非肌肉内部存在的单核细胞增生李斯特氏菌，而是在畜牧类屠宰和销售过程中的交叉污染［3］。
单核细胞增生李斯特氏菌在3～45℃范围内均可生长，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。本次监测调查从超市销售的生鸡肉中检出单核细胞增生李斯特氏菌，该超市销售的生鸡肉放在冷藏柜内保存。由于单核细胞增生李斯特氏菌有嗜冷特性，可以在冰箱贮藏的许多生熟食品中繁殖，若冷藏柜没有定期消毒，可能会造成交叉污染，建议定期对冷藏柜进行清洗消毒。家用冰箱存放的食品食用前必须进行加工和制备，例如加热和消毒，以避免和消除单核细胞增生李斯特氏菌。
本次调查研究表明阳江市6类食品中单核细胞增生李斯特氏菌的污染状况不容乐观，存在食物中毒的潜在危险。应加强对屠宰过程和贮藏、运输、销售各环节的卫生监督和管理，提高公众在食品贮藏和加工方面的卫生知识水平，预防食源性李斯特氏菌病的发生和流行。
【参考文献】
［1］韩怀忠.食源性李斯特菌病［J］.中国食品卫生杂志，1993，8（5）：49.
［2］杜蔷，吴桂红，尹明.北京烤鸭中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况调查［J］.食品科学，1997，7：61.
［3］张秀丽，廖广兴.河南省单核细胞增生李斯特氏菌污染状况调查［J］.中国公共卫生，1998，14（10）：617.
作者单位：阳江市疾病预防控制中心，广东 阳江 529500.