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【摘要】 目的 探讨上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白的表达情况。方法 应用免疫组织化学法检测78例上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白的表达。结果 78例上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白阳性表达56例。MMP2蛋白的表达与上皮性卵巢癌组织学分型无关(P>0.05)；与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 MMP2蛋白与上皮性卵巢瘤组织的发生、发展及转移有关，可作为判断卵巢癌预后不良的指标。
【关键词】 MMP2；上皮性卵巢癌;表达
Expression of MMP2 protein in epithelial ovarian cancer tissue.
LIU Yu-zhu, ZHANG Yuan, KUANG Hai-yan, et al.
Hainan Provincial Land Reclamation General Bureau Hospital, Haikou 570203, Hainan, P. R. China
Abstract：Objective To investigate the expression of MMP2 protein in epithelial ovarian cancer tissue. Methods The expression of MMP2 protein in 78 cases of epithelial ovarian cancer tissue was detected using immunohistochemistry. Results The expression of MMP2 was detected in epithelial ovarian cancer tissue of 56 cases. The expression of MMP2 was related to differentiation degree, clinical stage, and lymph node metastasis, but not with histological type. Conclusion The expression of MMP2 protein is related to the occurrence, development and metastasis of epithelial ovarian cancer, and be used as an indicator for judging poor prognosis.
Key words：MMP2; Epithelial ovarian cancer
卵巢恶性肿瘤是最常见的生殖道恶性肿瘤之一，其恶性程度高，预后差，早期诊断困难，病死率居妇科恶性肿瘤首位［1］。基质金属蛋白酶(Matrixmetallopreinase MMP2)是调节细胞外基质动态平衡的最重要酶系,对细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)具有广泛的降解作用。其中明胶酶A的底物为明胶、胶原和层黏连蛋白等,表达于各种恶性转化细胞。本研究采用免疫组化法检测MMP2在上皮性卵巢癌细胞中的表达,分析表达结果与病变的意义。探讨其与上皮性卵巢癌的发生以及与分期、分级之间的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
78例卵巢癌标本选自病理科2005～2O07年保存的资料完整并经病理证实的卵巢癌石蜡包埋组织，患者年龄32～67岁。其中组织学分型为55例浆液性腺癌，23例黏液性腺癌。分化程度为41例高分化，23例中分化，14例低分化，临床分期为26例Ⅰ～Ⅱ期，52例Ⅲ～Ⅳ期。其中45例有淋巴结转移。以上所有病理切片均由两位病理科医师重新读片。
1.2 方法
所有标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋，5μm厚连续切片。免疫组化采用SP法。主要试剂为鼠抗人MMP2单克隆抗体（Maxim Biotech公司产品）和SP免疫组化试剂盒(北京中山生物技术公司产品)。按照试剂盒说明书进行操作，每组染色均以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。
1.3 结果判定
MMP2蛋白阳性表达为胞浆和胞膜均出现明显的棕黄色颗粒。高倍镜下选择10个有代表性的视野计数，每个视野计100个肿瘤细胞，参照有关文献，确定阳性细胞数<10%为阴性，阳性细胞数占10%～25%为弱阳性(+)，阳性细胞数占25%～50%为中度阳性(++)，阳性细胞数>50%为强阳性(+++)。
1.4 统计学处理
采用SPSSl.0版统计学软件包行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白的表达
78份卵巢癌组织中有56例出现MMP2蛋白阳性表达(占71.8%)，棕黄色染色颗粒可见于胞浆及胞膜，呈片状分布，胞核未见着色。
2.2 MMP2蛋白的表达与上皮性卵巢癌临床病理特点的关系
MMP2蛋白的阳性表达水平在浆液性和黏液性组织学分型中无显著性差异（P>0.05）；但与上皮性卵巢癌的分化程度相关，低分化性癌组织中MMP2的表达显著高于高分化与中分化（P<0.05）；而且MMP2蛋白的表达与临床分期相关，临床Ⅲ～Ⅳ期显著高于Ⅰ～Ⅱ（P<0.01）；有淋巴结转移者显著高于无转移者（P<0.01）；具体相关结果见表1。表1 MMP2蛋白的表达与上皮性卵巢癌临床病理特点的关系分类类别例数MMP2阳性数(略)
3 讨论
卵巢癌是妇女常见的三大恶性肿瘤之一，早期症状不多，而且，由于其位置深居盆腔，缺乏早期症状和体征，易受临床忽视(卵巢癌三联征)，因而75%～80%的患者确诊时已属晚期，失去手术根治的机会，治愈率不到20%，5年生存率低于30%，死亡率高居妇科恶性肿瘤之首［1］，故研究卵巢癌的恶性生物学行为的早期诊断指标，探讨阻断肿瘤浸润和转移的新方法，已成为卵巢癌研究的新热点。
基质金属蛋白酶(MMP2)是一个蛋白水解酶家族，可降解细胞外基质成分。近年来，随着分子生物学的进展，对MMPs的结构、功能，调控及生理病理作用已进行了较为深人的研究，对MMPs在肿瘤侵袭、转移中的作用越来越受到重视。研究证明，MMP2在各型卵巢癌中的表达均有明显增加，MMPs的表达与卵巢癌的临床分期、病理分级和淋巴结转移及预后有关［2］。其中，MMP2基因位于人类染色体16q21，所编码蛋白被认为是肿瘤侵袭转移过程中主要蛋白水解酶，在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用［3］。大量研究表明，MMP2的表达水平与肿瘤的恶性程度密切相关，并被证明参与多种肿瘤的浸润和转移［4］。本研究结果表明上皮性卵巢癌中MMP2蛋白的表达较高，阳性率为71.8%，说明在上皮性卵巢癌组织中，细胞外基质降解作用加强,有利于癌细胞的浸润性生长。在MMP2蛋白与上皮性卵巢癌临床病理关系的研究中，发现MMP2蛋白的阳性表达水平在浆液性和黏液性组织学分型中无显著性差异（P>0.05）；但是在低分化组阳性表达率高于高、中分化组，差异有显著性（P<0.05），即肿瘤组织学分级越高，分化越差，其蛋白表达水平越高，提示它MMP2蛋白的表达与卵巢癌细胞的分化程度相关。而且MMP2蛋白的表达与上皮性卵巢癌的临床分期相关，临床分期越高，MMP2蛋白的阳性率越高，临床Ⅲ～Ⅳ期显著高于Ⅰ～Ⅱ（P<0.01）；有淋巴结转移者显著高于无转移者（P<0.01）。提示MMP2蛋白可能与卵巢癌的进展有关，参与肿瘤的侵袭、转移，研究结果与MMP2蛋白在其它肿瘤中的研究一致。董颖等［5］报道，MMP2表达随肿瘤浸润深度而增加，并与分化程度呈正相关，大量研究表明，分化程度越低的肿瘤细胞分泌MMP2越多，其浸润和转移的能力也越强，提示MMP2可作为检测肿瘤浸润和转移潜能的一种指标。Sato等［6］研究也发现，活性的MMP2能增强肿瘤细胞穿透基底膜基质的能力，是肿瘤细胞侵袭和转移的重要环节，黄晓曦等［7］研究发现MMP2的过表达与乳腺癌组织学分级和腋窝淋巴结转移密切相关，MMP2可以作为乳腺癌预后的标记物，对肿瘤的侵袭和转移进行评估。
因此，MMP2检测有助于反映上皮性卵巢癌生物学行为、临床病理特点及有无淋巴结转转移情况等，对临床治疗及估计预后具有积极的指导意义。MMP2蛋白可以作为卵巢癌诊断的辅助工具、检测肿瘤恶性程度，判断肿瘤转移、预测患者预后的重要工具之一。
【参考文献】
［1］李留霞，张建好，乔玉环，等. 卵巢上皮性肿瘤患者血浆溶血磷脂酸水平测定［J］. 郑州大学学报:医学版，2007 ，42(2):226.
［2］刘春玲，许培茂.基质金属蛋白酶与常见妇科肿瘤的研究进展［J］.中国妇幼健康研究,2007,18(3):243～245.
［3］Huhtala P, Chow LT, Tryggvason K. Stucture of the human type Ⅳ collagenase gene［J］. J Biol Chem, 1990,265(19):1107～1108.
［4］Benassi MS, Gamberi G, Magagnoli G, et al. Metalloproteinase expression and prognosis in soft tissue sacomas［J］. Ann Oncol, 2001,121(1):75.
［5］董颖,赵长宏.基质金属蛋白酶与肿瘤侵袭转移的研究进展［J］.实用肿瘤学杂志,2007,21（4）:384～386.
［6］Sato H, Takino T, Okada Y, et al. A matrix metalloproteinase expression on the surface of invasive tumor cells［J］. Nature, 1994,37:71.
［7］黄晓曦，林修，许东坡. 乳腺癌组织中MMP-TIMP的表达及临床意义［J］. 肿瘤防治杂志，2001,8(3):243.
作者单位：海南省农垦医院东湖院区妇产科,海南 海口 570203.