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【摘要】 目的：研究多巴胺D2受体（DRD2）基因TaqI A多态性、多巴胺D3受体（DRD3）基因Ser9Gly功能多态性、5-羟色胺2A（5-HT2A）受体基因A-1438G、T102C多态性与精神分裂症伴发迟发性运动障碍（TD）的相关性。方法： 使用异常不自主运动量表（AIMS）评定精神分裂症患者有无TD及TD严重程度。应用聚合酶链反应（PCR）-限制性片段长度多态性（RELP）法分析TD组和非TD组的各受体基因位点的等位基因频率和基因型分布。结果：DRD2基因TaqI A 的等位基因频率（P>0.05）和基因型（P>0.05）分布在TD组(n=42)与非TD组(n=52)之间均无显著性差异，且不同基因型间的AIMS总分值差异也无显著性（P>0.05）。DRD3基因Ser9Gly的等位基因频率（P>0.05）和基因型（P=0.08）分布在TD组(n=42)与非TD组(n=52)之间均无显著性差异，且不同基因型间的AIMS总分值差异也无显著性（P>0.05）。5-HT2A受体基因T102C多态性位点与A-1438G为完全连锁不平衡，TD组(n=42)与非TD组(n=51)的基因型总体分布的差异无显著性（P>0.05），等位基因频率分布的差异有显著性（x2=4.36，υ=1，P<0.05）。结论：在中国汉族男性精神分裂症患者中DRD2基因的TaqI A多态性、DRD3功能基因的Ser9Gly多态性可能不是影响TD发生的主要危险因素。5-HT2A受体基因的T102C、A-1438G多态性可能与男性精神分裂症患者的TD相关联。
【关键词 】 精神分裂症；迟发性运动障碍；多巴胺D2受体；多巴胺D3受体；5-羟色胺2A受体；多态现象（遗传学）
Association between the dopamine D2 、dopamine D3 、serotonin 2A receptor gene and tardive dyskinesia in chronic schizopnrenia
XU Xiao-feng，ZHANG Xiao-bin
(Department of Psychiatry of YangZhou Wu Tai Shan Hospital, Yang Zhou 225003,China)
【Abstract】 Objective：The present study was to investigate whether the genetics variation of the dopamine D2 receptor (DRD2) 、dopamine D3 receptor (DRD3) and serotonin 2A receptor（5-HT2A）gene was associated with tardive dyskinesia （TD）in chronic schizophrenic patients receiving long-time typical antipsychotics. Methods:42 male schizophrenic Patients with TD, 52 without TD were entered the study. The diagnosis of TD was made according to the Abnormal Involuntary Movement Scale(AIMS) score, with the AIMS score≥3 as having TD. Psychiatric symptoms were rated using the Brief Psychiatric Rating Scale（BPRS）.The receptor gene polymorphism was analyzed with the polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism.Results: (1) There were no significant differences in the distributions of the allelic frequencies and genotypes of TaqI A polymorphism of DRD2 gene between the groups (P>0.05). Genotypes of DRD3 gene were not correlated with total AIMS scores in TD patients. (2) There were no significant differences in the distributions of the allelic frequencies and genotypes of Ser9Gly polymorphism of DRD3 gene between the groups (P>0.05). Genotypes of DRD3 gene were not correlated with total AIMS scores in TD patients. (3) The T102C polymorphism was in complete linkage disequilibrium with the A-1438G polymorphism. There were no significant differences in the distribution of genotypic of the 5-HT2A gene between the groups（P>0.05）. A significant excess of C/A allele was in patients with TD compared to those without TD（c2=4.36，υ=1，P<0.05）. ⑶There were no significant differences in clinical demographic characteristics and scores of clinical assessment between the patients with TD and those without TD（P>0.05）.Conclusions: Our result suggest that the TaqI A polymorphism of DRD2 gene and Ser9Gly polymorphism of DRD3 gene may be not a mainly risk factor for the development of TD in Chinese Han male schizophrenia, but the T102C and A-1438G polymorphism of 5-HT2A receptor gene may be association with TD in chronic male schizophrenic patients.
【Key words】Schizophrenia; Tardive dyskinesia; dopamine D2 receptor; dopamine D3 receptor; Serotorin 2A receptor; Polymorphism (Genetics)
长期使用典型抗精神病药物后（APS），大约有20%~30%的患者会发生迟发性运动障碍（TD）［1］。虽然TD的病理机制还不太清楚，但家系和动物模型研究表明遗传因素在TD的发生中起一定的作用［2］。不同种族中精神分裂症的TD发生率不尽相同，在有精神分裂症家族史的病人中TD的发生率有明显的一致性，这说明遗传因素可能影响TD的发生，黑质纹状体区多巴胺受体超敏是TD的发生机制假说之一。5-羟色胺2A(5-HT2A)受体的拮抗剂能改善脱水吗啡所引起的大鼠刻板式的口周运动症状［3］，这表明5-HT2A受体可能在APS所致的TD中起一定的作用。为探讨患者个体素质对TD发生的影响，本文在中国汉族男性精神分裂症患者中研究多巴胺D2受体(DRD2)基因TaqI A多态性、多巴胺D3受体（DRD3）基因Ser9Gly功能多态性和5-HT2A受体基因的A-1438G、T102C多态性与经典抗精神病药所致TD的关系。
1 对象与方法
1.1 研究对象
入组标准：从2000年10月到2001年11月期间，符合中国精神疾病分类方案与诊断标准第2版修订本(CCMD-2-R)精神分裂症的诊断标准，住院时间至少8年以上，住院期间一直服用第一代抗精神病药物，所有患者为江苏籍贯。依据Schooler等［4］的TD研究诊断标准，使用异常不自主运动量表（AIMS）评定TD；AIMS总分≥3分（躯体有一处大于或等于3分，躯体有两处或多处等于2分）即可诊断为TD；量表评定先后于半年内进行3次，3次AIMS评分均大于3分者为TD患者。在扬州五台山医院长期住院的男性患者中共有42例，年龄43~76岁，平均（56±10）岁，统计分析取最后一次AIMS评分值。TD组的病期为10~52年，中位数为31年；服药总时间9~50年，中位数为30年；日服抗精神病药物剂量（折算成氯丙嗪）平均(324.3±141.1) mg；精神疾病家族史阳性为11例。非TD者52例，全为男性，年龄36~75岁，平均（55±7）岁，3次AIMS评分均为0分，非TD组的病期为22~52年，中位数为30年；服药总时间17~52年，中位数为30年；日服抗精神病药物剂量（折算成氯丙嗪）平均(350.8 ±124.0) mg；精神疾病家族史阳性为13例。所有对象均排除器质性疾病及其他神经精神疾患。TD组与非TD组的人口学和临床学资料匹配严格，两组间各临床变量的差异无显著性（P>0.05）。
1.2 研究方法
1.2.1 DNA的提取 采用酚氯仿法提取外周血基因组DNA。
1.2.2 基因多态性的检测 DRD2基因TaqIA多态性的检测： 按文献设计引物和反应条件［5］。DRD3功能基因Ser9Gly多态性的检测：按文献设计引物和反应条件［6］。5-HT2A受体基因A-1438G 多态性的检测： 按文献设计引物和反应条件［7］5-HT2A受体基因T102C多态性的检测：按文献设计引物和反应条件［8］。
1.2 3 数据处理 统计分析使用SPSS 10.0软件包。x2吻合度检验各组基因型是否符合Hardy-Weinberg平衡法则，x2检验用于比较两组间基因型和等位基因频率分布，独立样本T-test用于比较TD和非TD两组间或不同基因型亚组间临床变量，而Mann-Whitney U 用于比较总AIMS和总BPRS评分在组间的差异。
2 结果
2.1 研究对象的DRD2基因TaqIA多态性的分析
TD组和非TD组的DRD2基因TaqIA 多态性位点的等位基因频率和基因型的比较见表1。结果显示两组间的分布无显著性差异 (x2=0.19, υ=1, P>0.05;x2=0.51,υ=2, P>0.05)。
表1 DRD2基因TaqIA多态性位点的等位基因频率和基因型分布（略）
2.2 研究对象的DRD3功能基因Ser9Gly多态性的分析
TD组和非TD组的DRD3功能基因Ser9Gly多态性基因型和等位基因频率的比较见表2。结果显示两组间的分布无显著性差异 (x2=4.98, υ=2, P=0.08；x2=0.84, υ=1, P>0.05)。
表2 DRD3基因Ser9Gly 多态性位点的等位基因频率和基因型分布（略）
2.3 研究对象的5-HT2A受体基因A-1438G、T102C多态性的分析
TD组和非TD组的5-HT2A受体基因的A-1438G和T102C多态性位点表现为完全不连锁平衡，即T012和-1438G两等位基因同时出现。由表3显示， TD组与非TD组的基因型总体分布的差异无显著性（x2=4.37，υ=2，P>0.05），等位基因频率分布的差异有显著性（x2=4.36，υ=1，P<0.05）。
表3 5-HT2A受体基因A-1438G、T102C多态性位点的等位基因频率和基因型分布（略）
2.4 AIMS评分值与其他临床变量间的关系
在TD组中，各受体基因多态性位点的不同基因型亚组在病程、服药总时间、日服抗精神病药物剂量、BPRS评分和AIMS评分的差异无显著性（P>0.05）。
3 讨论
抗精神病药物尤其是经典抗精神病药的长期使用，导致大约25%的精神分裂症病人发生迟发性运动障碍（TD）。给大鼠长期使用抗精神病药物后，可出现空洞的咀嚼运动（VCMS），在不同种的大鼠中VCMS的发生率和严重性是不同的。有些患者使用抗精神病药物治疗长达数十年不会产生TD，而有的仅数月即可产生。不同种族病人对TD的易感性不同，在有精神分裂症家族史的病人中TD的发生有明显的一致性，这说明遗传因素在影响TD发生中起到一定的作用。
我们发现DRD2基因的TaqIA多态性位点的基因型和等位基因频率在男性患者中TD组与非TD组间无明显差别。Chen等［5］发现女性伴有TD者A2A2基因型及A2等位基因明显高于非TD者，而男性TD者与非TD者之间无差别，这与本研究结果一致。具有A2等位基因型者脑区D2受体密度高于A1型，可能会影响抗精神病药物与D2受体的结合［9］。故我们推测DRD2基因的TaqIA多态性位点的突变不是导致男性精神分裂症患者发生TD的易感因素。
在影响运动控制的脑区如纹状体腹侧和壳核腹侧有DRD3的mRNA和蛋白的表达，DRD3基因的敲除鼠表现为过度活动，与TD病人的不自主运动表现相似。Steen等［10］首次报道伴有TD的精神分裂症患者的DRD3基因的Gly等位基因频率高于非TD者，认为Gly/Gly基因型是精神分裂症患者易患TD的危险因素。Rietshel等［11］在德国病人中发现DRD3基因的Ser/Gly多态性与TD的发生之间无任何关联。荟萃分析发现白种人的DRD3基因的Ser/Gly多态性与精神分裂症的发病有一定的关联，而在中国和亚洲其他人种中未发现有这种关联［12］。故从本研究中我们推测我国精神分裂症患者中DRD3基因的Ser/Gly多态性对TD的发生无显著性影响。我们的研究结果与Garcia-Barcelo等［13］对香港中国种族的精神分裂症患者DRD3基因的Ser/Gly多态性与TD发生关系的研究结果一致。
5-HT2A受体是不典型APS的作用受体之一，不典型APS具有高5-HT2A受体的结合力和低多巴胺D2受体结合力特征。在调节运动的脑区如纹状体区有5-HT2A受体的表达，通过抑制大鼠脑区的多巴胺神经系统后，纹状体区的5-HT2A受体的结合力和mRNA的表达增加。新型的非典型APS引起较低TD的发生率，可能就是通过高阻断5-HT2A受体，对防止TD的发生具有一种保护作用。
本研究结果显示，5-HT2A受体基因的A-1438G、T102C多态性与中国汉族男性精神分裂症伴有TD相关联，在TD组有较多的C/A等位基因，C/A等位基因可能是TD发生的易感因素之一，但不同基因型对TD的严重程度无明显影响。我们的研究与Segman的结果不同，且Segman同时发现在TD组中，不同基因型间的AIMS的分类评分存在显著差异［14］。而Basile［15］却未能发现5-HT2A受体基因的A-1438G多态性与TD的发生之间存在关联。这些可能与我们的样本少或选择偏倚有关（缺乏女性患者），也可能与不同人群中TD发生的病理生理机制不同。
目前认为精神分裂症是一种多基因遗传性疾病，故可能是多基因影响抗精神病药物所致的TD的易感性。应对这些基因进行相互联合分析，我们发现超氧化物歧化酶（MnSOD）基因的Ala-9Val 多态性与TD的发生无关联［16］，对DRD3基因与MnSOD基因的联合分析显示同时具有DRD3的Ser等位基因和MnSOD的Val等位基因的患者更易发生TD［17］。我们的研究还需要在大样本和女性TD病人中得到重复，以及在不同基因之间做相互联合分析。
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（江苏省扬州五台山医院，江苏 扬州 225003）