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【摘要】 目的：了解惠州市军团菌的污染现状及人群军团菌的感染程度，为制定预防和控制军团菌感染策略提供依据。方法：采用分离鉴定与ELISA方法，对惠州市186份集中空调冷却塔水进行军团菌分离鉴定，对215例暴露人群及152例对照人群进行军团菌抗体IgG检测。结果：本次调查集中空调嗜肺军团菌检出率为51.3%，共检出62株嗜肺军团菌，其中，LP1型37株、LP2～LP14型25株;215份暴露人群中检出军团菌抗体阳性29份，阳性率13.4%，152份对照人群中检出军团菌抗体阳性7份，阳性率4.6%。结论：惠州市集中空调冷却塔水中军团菌污染现状较为严重，已对暴露人群的健康造成潜在威胁，对这一潜在传染来源应采取立体、有效防范措施。
【关键词】 军团菌 抗体 集中空调
Huizhou air-conditioning corps bacteriacontamination and population survey report
ZHANG Jian,XU Li-qing,LUO Ze-yan,et al
(Huizhou centers for disease control and prevention,Huizhou 516000,China)
【Abstract】 Objective:To investigate the status of the Legionella contamination and infection in crowd in Huizhou City,in order to constitute the prevention and control strategy of Legionella infection.Methods:186 Cooling tower water samples from central air conditioning system in Huizhou City were cultured and then Legionella was isolated and identified;The antibodies IgG against Legionella of 215 dangerous group and 152 control were detected by Enzyme-linked Immunosorbent Assay(ELISA).Results:The detection rate of Legionella pneumophilia in this survey of central air conditioning system is 51.3%,62 strains of Legionella pneumophilia were isolated,among them 37 strains were serovar LP1,and 25 strains were serovar LP2～LP14;There were 29 cases of anti-Legionella positive in the 215 dangerous group,with the positive rate of 13.4%,and there were 7 cases of anti-Legionella positive in the 152 control,with the positive rate of 4.6%;Conclusion:The water in cooling tower of central air conditioning system in Huizhou city has been contaminated seriously with Legionella,and it has already being a latent threat to the health of dangerous group,thus spatial and effective preventive measures to this potential source of infection should be taken as soon as possible.
【Key words】 Legionella;Antibodies;Central air conditioning
随着改革深入、经济腾飞，各地高楼大厦如雨后春笋般拔地而起，人们对工作、生活、娱乐、购物环境的要求也越来越高，安装中央集中空调成为高层建筑必备的基础设施之一。为了规范公共场所集中空调通风系统的卫生管理，做好传染病预防工作，保护公众健康，卫生部制定了《公共场所集中空调通风系统卫生规范》，其中要求冷却水、冷凝水中军团菌(采样量200ml)不得检出。为了做好本市的基线调查，对本市8家宾馆及2家外企中央集中空调冷却塔中的冷却水进行初步调查，并对长期工作在公共场所的健康工作人员进行军团菌抗体IgG调查，与非此行业工作的对照人群进行比较，现将结果报告如下：
1 资料与方法
1.1 军团菌病血清流行病学调查
1.1.1 对象 ①暴露人群：宾馆、酒店的健康从业人员215例;②对照人群：在惠州市CDC体检、非宾馆商场工作的健康从业人员152例。
1.1.2 方法 每例采血2ml，分离血清，采用ELISA试验检测军团菌抗体IgG，阳性者为当时或过去曾有过军团菌感染。试剂来自德国塞润研发有限公司，在试剂有效期内使用。
1.2 中央集中空调冷却塔水军团菌监测
1.2.1 样本来源 随机在本市8家宾馆采集中央集中空调冷却水并进行军团菌检测。另有2家外企主动要求每月进行军团菌检测。共采集水样186份。
1.2.2 采样方法 在各中央集中空调的主机房冷却塔中以灭菌玻璃瓶采集冷却水500ml。立即送实验室当日检验。
1.2.3 军团菌检测
1.2.3.1 水样处理和检验 将水样用装有0.22μm孔径滤膜的过滤器过滤，然后取下滤膜并剪碎与5ml原水样混合并振荡3～5分钟;再从中取1ml水样进行酸处理,1ml水样进行热处理。最后各取0.1ml普通水样、酸处理水样、热处理水样接种于GVPC琼脂平板上， 36℃孵育3～10天观察结果，挑取可疑菌落作鉴定。
1.2.3.2 在GVPC琼脂平板上菌落呈灰白色，形态符合，且血平板培养后不生长者，初步可认定为军团菌。再通过Gram染色涂片镜检和血清分型。最后对初步鉴定的菌株按规定方法作氧化酶、触酶、马尿酸盐水解、明胶液化和无半胱氨酸BCYE琼脂生长等鉴定试验。
1.2.3.3 GVPC平板、BCYE平板、无半胱氨酸BCYE琼脂、血平板由广东省环凯提供，军团菌血清诊断试剂为英国OXOID公司产品，均在有效期内使用。
2 结果
2.1 军团菌检出率 共采集各类集中空调冷却水186份，其中，外企采集110份，宾馆采集76份，共检出62株嗜肺军团菌，检出率为33.3%。其中，外企检出率为20.9%, 宾馆检出率为51.3%。宾馆与外企的检出率差异有统计学意义(χ2=18.7，P<0.01)。检出的62株嗜肺军团菌，血清学分为LP1、LP2～LP14两型。其中,LP1型37株，LP2～LP14型25株。
2.2 两组人群嗜肺军团菌抗体IgG检测率 在215份暴露人群中检出嗜肺军团菌抗体IgG阳性29份，阳性率13.4%。在152份对照人群中检出嗜肺军团菌抗体IgG阳性7份，阳性率为4.6%。两组人群感染的阳性率差异有统计学意义(χ2=7.94，P<0.05)。
3 讨论
3.1 据文献报道，硝酸盐氮、总有机碳、藻体数、细菌总数和军团菌数有正比关系[1]。本次调查的8家宾馆及2家外企集中空调冷却塔外观显示有不同程度的淤泥形成和藻类物生成。要控制军团菌的滋生和繁殖，重要的是考虑破坏集中空调冷却塔水中的军团菌微生态环境，特别是去除冷却水中体积较大的绿-蓝藻种类。阻断军团菌在集中空调冷却塔之间的相互传播，是预防和控制军团菌病爆发流行的根本措施。据调查，宾馆的集中空调系统自安装以来未进行清洗消毒，而2家外企则定期监测、定时清洗消毒，检出率与宾馆有显著差异。
3.2 本调查的集中空调嗜肺军团菌检出率51.3%，LP1型为主要菌株，占62%(24/39)，与文献报道一致。彭晓曼等[2]报道，北京市大饭店集中空调系统冷却塔军团菌阳性率为55.3%(21/38)，1型为主要菌株(5O%)。朱佩云等[3]调查上海部分地铁站集中空调冷却塔水军团菌污染率为45.1%，菌型以LP1型为主，占74%(34/46)。LP1型是引起军团病的主要病原菌，一旦冷却塔中LP1型菌达到一定浓度，很可能引起人群感染甚至暴发，应引起人们的重视。
3.3 通过对不同人群嗜肺军团菌抗体IgG水平调查，暴露人群抗体阳性率显著高于对照人群，说明在集中空调公共场所从业人员中存在嗜肺军团菌隐性感染率较高，一旦冷却塔中军团菌达到一定浓度，很可能引起相关人群感染甚至暴发。
3.4 集中空调冷却塔水已成为军团菌理想增殖场所和潜在传播源，如果较长时间在受到军团菌污染的集中空调环境中工作，无疑是一种潜在威胁。目前尚无有效的军团菌疫苗预防本病的发生，空气传播的特性也使切断传播途径的预防措施难以实现，为了预防军团菌污染危害应采取立体有效的防范措施，现提出如下对策：①卫生行政部门应制定相应的卫生标准，规范使用集中空调部门定期清洗、定期监测的职责;②使用集中空调部门应定期组织人员对集中空调冷却塔进行清洗、保洁，去除底部沉淀物，改变适宜军团菌的生存环境，控制军团菌的生长与繁殖;③卫生部门定期对集中空调冷却塔水进行军团菌监测，采用适当的消毒措施和方法，对冷却塔、集中空调系统管道设施进行定期消毒，以杀灭军团菌;④卫生部门对暴露人群定期进行血清学抗体监测，做好预警，防止军团菌病的暴发;⑤加强对军团菌感染临床症状及预防消毒措施等知识的宣传，强化人们对军团菌的流行病学特征的认识，以防止军团菌病的暴发和流行。
【参考文献】
[1] 郭常义，苏 瑾，阮素云，等.集中空调冷却水军团菌微生态环境与繁殖传播研究[J].中国公共卫生，2O04，20(5)：546-549.
[2] 彭晓曼，王小梅，黎新宇，等.北京市大饭店集中空调冷却塔军团菌污染状况及消毒效果评价[J].中国卫生检验杂志，2004，14(2)：231-232.
[3] 朱佩云，陈 悦，沈建民，等.上海部分地铁站集中空调冷却塔水军团菌污染状况的调查与分析[J].环境与职业医学，2002，19(5)：313-314.
作者单位：惠州市疾病预防控制中心,广东 惠州 516000