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【摘要】 目的 考察超细三七粉对小鼠的免疫调节作用。方法 采用DTH实验，血清溶血素测定，小鼠碳廓清实验和相关指标测定不同剂量对小鼠影响的研究。结果 低、中、高剂量均可增强DNFB引起的小鼠迟发性超敏反应;中、高剂量样品均具有增强小鼠血清溶血素反应的作用;中剂量具有增强小鼠单核-巨噬细胞功能的作用。结论 超细三七粉具有明显的免疫调节作用。
关键词 超细三七粉 免疫调节 血清溶血素 迟发性超敏反应 单核-巨噬细胞
Study on immunization of superfine Sanqi powder capsule
Wang Chaoliang，Gao Mingju，Fan Jiahong，et al.
Wenshan Prefecture Institute of Sanqi Science and Technology，Yunnan663000.
【Abstract】 Objective To research immunization of superfine Sanqi powder in rats.Methods To observe the effect of different Sanqi powder dosage on rats by DTH，Serum hemolysin determination and mouse Carbin clearance experiment.Results All of the lower，middle and high dosage strengthened the delayed hypersensitivity of rats on DNFB，the middle and high dosage could enhance serum hemolysin of rats，the middle dosage increased the function of mono，nuclaer-macrophage.Conclusion The superfine Sanqi powder capsule have obvious immunization.
Key words superfine Sanqi powder capsule immunization serum hemolysin the delayed hyper sensitivity mono nuclear-macrophage
三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen是中国特有的名贵栽培药用植物。具有活化瘀、消肿定痛等功效。现代药理、药化研究表明:三七含有30余种单体皂苷，17种氨基酸，15种微量元素，70余种挥发油和三七素、多糖、黄酮等多种活性物质除用于治疗心脑血管疾病外，还具有抗疲劳、耐缺氧、抗衰老和提高机体免疫等功能 ［1］ 。超细粉碎技术是国际上近20年发展起来的一项高新技术，在我国仅有10年左右的历史，现已广泛应用于新型陶瓷、耐火材料、造纸、微电子材料及国防尖端技术等领域。近年开始应用于制药、食品等领域。我国目前已开发出超细珍珠粉、超细西洋参粉等产品，并已上市销售 ［2］ 。 超细三七粉主要采用现代超细粉碎技术将三七加工成10μm以下（≥1200目）的超细微粉，可提高三七的生物利用度，促进人体的吸收（比传统方法加工的三七粉≤150目，生物利用度提高1倍以上，但疗效却不降低 ［3］ ）。为此，我们根据其特性，重点研究了超细三七粉对小鼠模型的影响，观察其免疫调节作用，以拓宽三七的应用领域。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康雄性ICR小鼠40只，体重18～22g，二级，由中国药科大学实验动物中心提供，饲养环境安静、清洁，符合要求，其中环境温度22±2℃;相对湿度40%～70%。
1.2 仪器 721分光光度计、GB303电子天平、AE-240电子分析天平、TCS-500电子秤。
1.3 实验方法
1.3.1 DTH实验 将小鼠按体重随机分入1200、400和 200mg/（kg·d）3个剂量组和1个对照组，每组10只。样品用双蒸水配制，每日经口灌胃，灌胃容积为20ml/kg体重，对照组灌双蒸水。25天后，小鼠腹部去毛，1%二硝基氟苯（DNFB）丙酮麻油溶液50μl涂抹致敏。致敏后5天，小鼠右耳均匀涂抹1%DNFB丙酮麻油溶液10μl进行攻击，左耳涂抹丙酮麻油溶液作为对照，攻击后24h处死小鼠，剪下左右耳壳，于同一部位取直径8mm的耳片称重，左右耳片重量之差作为肿胀度。同时取小鼠的胸腺及脾脏，以每10g小鼠的脾重（mg）和胸腺重（mg）作为脾脏/体重比值和胸腺/体重比值。
1.3.2 血清溶血素测定 采用半数溶血（HC 50 ）测定法。动物分组、剂量和处理同DTH实验。连续灌胃25天后每鼠腹腔注射2%（v/v）压积SRBC0.2ml致敏。免疫5天后，小鼠摘眼球采血，取血清测溶血反应，另设不加血清（以SA缓冲液代替）的对照管为比色空白，于540nm分别测定各管光密度值，最后按公式进行测算。
1.3.3 小鼠碳廓清实验 动物分组、剂量和处理同DTH实验。连续灌胃30天后小鼠每10g体重尾静脉注射1∶3（v/v）稀释的印度墨汁0.1ml，注入后立即计时，并分别于2、10min从内眦静脉丛取血0.025ml，加到2ml0.1%碳酸钠中，测OD 600nm 。并取肝、脾称重，根据公式求小鼠指数a值。
1.3.4 统计处理 实验结果以（ˉx±s）表示，并进行t检验。
2 结果
2.1 二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应（DTH），结果（见表1～3）。由表1、表2可见，实验后各受试物剂量组小鼠增重与对照组相比差异无显著性;各组小鼠胸腺/体比值、脾/体比值差异亦无显著性（P>0.05）;由表3可见，各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均高于阴性对照组值，并随剂量增高而增加，经方差分析及两两比较统计学处理，低、中、高剂量组差异有显著性（P<0.01）。试验说明低、中、高剂量均可增强DNFB引起的小鼠迟发性超敏反应。 各剂量组小鼠的血清数溶血值（HC 50 ）均高于阴性对照组值，且随着剂量增加而升高，经方差分析及两两比较统计学处理，中、高剂量组差异有显著性（P<0.05）。实验表明，中、高剂量样品均具有增强小鼠血清溶血素反应的作用。
表1 样品对小鼠实验前后体重的影响 （略）
表2 样品对小鼠脏器（略）
表3 样品对小鼠耳廓迟发性超敏反应的影响 （略）
2.2 超细三七粉具有增强小鼠血清溶血素反应的作用 见表4。
2.3 超细三七粉具有增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的作用 见表5。
表4 样品对血清溶血素水平的影响 （略）
表5 样品对小鼠碳廓清的影响 （略）
各剂量组小鼠的吞噬指数均高于阴性对照组，结果经方差分析及两两比较统计学处理，中剂量组差异有显著性（P<0.05）。实验表明中剂量具有增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的作用。
3 讨论
近年来三七制品在医学中的应用已取得很大进展 ［4］ ，研究表明三七总皂苷对免疫功能有增强作用，并在调节血脂、调节血压、抗疲劳、耐缺氧等方面有较好的作用。但国内外进一步的研究较少，其原因主要还是三七制品的提取和深加工较落后。本实验结果表明，将三七加工成超细粉，对小鼠迟发性超敏反应、小鼠血清溶血素反应、小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能有增强作用，结果提示本品具有明显的免疫调节作用。超细微粉在胃肠道的吸收机制尚未完全阐述，考虑其吸收除了与粒径大小、组成成分、表面亲水性、电荷等微粒本身的特性有关外，还易受到其他因素的影响。进一步探讨超细三七粉的吸收机制和药理作用将有重大的意义。
参考文献
1 Wan S Q，Gong T J，et al.China sanqi.Yunnan Ethnic Publish house.
2 Li CL，Ling Q，Fei C H.The study on super pulverization process and characteristics of products of ChineseMedicine-Sanqi.Chinapowder sciˉence and Technology（中国粉体技术），2001，12（6）:21-22.
3 Liu C M，Yang H Y.An experiment on Sanqi of different pulverization degreesdissolvingoutin vitro.Chin Tradit Pat Med（中成药），1998，17（2）:900-903.
4 Wu D C，Wu H.Study on antiobesity of Anorphophallusrivieri ultrafine grindingandnanometerpowder.Chinese Traditionl and Herbal Drugs（中草药），2003，34（2）:141-143.
（收稿日期:2003-12-16） （编辑芷 兰）
作者单位:663000云南省文山州三七科学技术研究所
663000云南省文山赛参生物科技公司