反相高效液相色谱法测定养肝澳平合剂中丹皮酚的含量

　　【摘要】 目的 测定养肝澳平合剂中丹皮酚的含量，以控制制剂质量。方法 反相高效液相色谱法（RP—HPLC）。用十八烷基键合硅胶为固定相，以甲醇:冰乙酸:水（58:2:40）为流动相，检测波长274nm。结果 方法准确、可靠、重现性好。结论 可用于制剂质量控制。

　　关键词 养肝澳平合剂 反相高效液相色谱法 丹皮酚

　　养肝澳平合剂是我院验方，临床使用十余年，由当归、丹皮、赤芍、茵陈、丹参、郁金、砂仁等13味中药精制而成。具有养血、活血、凉血理气、清热解毒等作用，主治肝炎。经预试及第一阶段临床总结ALT复常率71.1%。GGT复常率58.1%，HBeAg转阴率80%。丹皮为其中君药之一。为了控制制剂质量，我们采用反相高效液相色谱法测定养肝澳平合剂中丹皮酚的含量 ［1］  。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪;Resolve ODS-C 18  柱;486可调紫外检测仪;U 6 K进样器H66025T型超声清洗机;十万分之一电光天平（德国sartorius）。  

　　1.2 试药 养肝澳平合剂（本院制剂室提供，批号为020821，030228，030521，030912），丹皮酚对照品，分装号为708-9013，购于中国药品生物制品检定所，所用药材均购于南京市药业股份公司，所用试剂均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 丹皮酚的测定

　　2.1.1 色谱条件的选择 Resolve ODS-C 18  ，流动相为甲 醇:冰乙酸:水（58:2:40），检测波长274nm，流速为1.0ml/min。
  
　　2.1.2 标准曲线的绘制 精密称取干燥至恒重的丹皮酚对照品4.18mg，置10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。回归方程为:Y=2.12×10 6 X+3.3×10 3 ，r=0.9996（线性范围0.418～6.592μg）。

　　2.1.3 样品溶液的制备与测定 精密量取养肝澳平合剂5 ml，置三角烧瓶中，以甲醇为溶
媒，超声提取4次，加甲醇15ml/次，提取15min，过滤、合并滤液于蒸发皿中，水浴蒸去甲醇
，残渣再加流动相溶解并转移至25ml容量瓶中，继续加流动相稀释至刻度，吸取样品溶液10
μl注入HPLC仪，测定不同批号合剂中含量，结果见表1。
   
　　表1 试样测定结果 （略）
  
　　2.1.4 回收率测定 精密量取已知含量的养肝澳平合剂5 ml，共5份，每份精密加入丹皮酚适量，用样品溶液制备方法制备并依法测定。结果见表2。

　　表2 丹皮酚加样回收试验 （略）
   
　　2.1.5 精密度试验 精密量取批号为030228养肝澳平合剂样品5份各5ml，分别按样品溶液的制备方法制备与测定，测得丹皮酚峰面积积分值相对偏差（RSD）为1.65%。  

　　2.1.6 重现性试验 精密量取批号为030228养肝澳平合 剂样品5份各5ml，分别按样品溶液制备方法制备并依法测定。结果见表3。

　　表3 重现性试验（略）

　　3 小结

　　通过试验测定可看出4批次样品中丹皮酚含量最高为1.25mg/ml，最低为1.15mg/ml，建议含量不低于1.10mg/ml。可作为含丹皮酚制剂质量控制的参考。

　　参考文献
    
　　1 刘放，黄卫平.HPLC法测定牡丹皮及其制剂中丹皮酚含量.基层中药杂志，1997，11（1）:32.
    
　　（收稿日期:2004-06-09） （编辑罗 彬）

　　作者单位:210029江苏省中医院