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【摘要】 目的 采用薄层扫描法对散结乳癖贴膏中姜黄素的含量进行测定，以确定该产品的质量标准中含量的测定方法。 方法 散结乳癖贴膏系由莪术、姜黄、急性子、天葵子等组成的外用复方制剂。姜黄素是姜黄的主要成分之一，一般以薄层扫描法对其组分进行分离测定，以此作为姜黄的定量分析指标。 结果 采用薄层扫描法对散结乳癖贴膏中姜黄素的含量限度进行测定，基本能真实地反映姜黄素的含量限度，该方法简便，可操作性强。 结论 薄层扫描法是目前中药复方制剂中测定某一组分含量行之有效的方法之一，能准确地测定其含量限度。
关键词 散结乳癖贴膏 姜黄素 薄层扫描法
散结乳癖贴膏是一种中药的三类新药，目前已投入生产和销售。它的质量标准中含量测定方法是对中药姜黄中姜黄素的含量限度进行控制，以使产品的质量处于受控的状态。本文仅对姜黄素含量测定的方法—薄层扫描法进行研究，以确定散结乳癖贴膏质量标准中的含量测定方法。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 CS-930型薄层扫描仪（日本岛津）;PHS-2型酸度计（上海分析仪器厂）;层板缸（上海信宜仪器厂）;标准层析板（日本岛津）;姜黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号:823-9401）;硅胶G（青岛海洋化工集团公司）;甲醇、冰醋酸、氯仿、无水乙醇等其他试剂均为分析纯（西安化学试剂厂）。
1.2 薄层色谱条件
1.2.1 薄层板制备 称取硅胶G8g，加0.3%CMC-Na约12ml，调成糊状，均匀涂于20cm×20cm的标准层析用玻璃板上，自然干燥，用前于105℃烘1h。
1.2.2 色谱条件 展开剂:氯仿-甲醇-冰醋酸（96∶3∶1）;展开方式:上行法。
1.3 扫描条件 扫描波长:λs=425nm，λs=650nm;扫描方式:反射式锯齿扫描，狭缝0.2mm×0.2mm，背景补偿;线性校正:CH=1;扫描速度:10mm/min;低速:10mm/min。将对照品及供试品进行波长扫描，结果λs=425nm，选择λs=650nm。
1.4 线性关系
1.4.1 对照品溶液的制备 精密称取姜黄素对照品1.7mg，加甲醇溶解并制成每1ml含姜黄素0.17mg的溶液，即得。
1.4.2 标准曲线 分别精密吸取对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0μm，点于同一薄层板上，照色谱条件展开、取出、晾干。在扫描条件下测定，结果见表1。以点样量（X，μg）和斑点吸收度积分值（A）作图得一直线，并进行线性回归，得回归方程为:
X=3.2616×10 -5 A-0.9989+0.0289，r=0.9989
线性范围0.17～1.36μg。由于标准曲线没有通过原点，故用外标二点法进行含量测定。
表1 标准曲线测定结果（略）
1.5 供试品溶液制备
1.5.1 萃取溶剂的考察 精密称取姜黄适量，分别用不同溶剂，浸泡过夜，超声30min，照“标准曲线”项上操作，测定不同的溶剂萃取情况 ［1］ ，结果见表2。
表2 不同溶剂萃取情况（略）
表2可见，无水乙醇和甲醇萃取情况相近，但甲醇沸点低，故实验中选择甲醇为萃取溶剂。
1.5.2 供试品溶液 取本品10贴，剪碎混匀，取约1g，精密称定，加1g硅藻土，混匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，浸泡过夜，加热回流至无色，蒸去甲醇，残渣加无水乙醇使其溶解，并定量转移至10ml量杯中，摇匀，作为供试品溶液。
1.6 精密度实验
1.6.1 板内精密度 吸取对照品溶液及供试品溶液各2μl，分别点样5次于同一薄层板上，照“标准曲线”项下操作，测定结果见表3。
表3 板内精密度实验结果（略）
1.6.2 板间精密度 照“供试品溶液制备”和“标准曲线”项下操作，将对照品及供试品分别点于5块不同薄层板上，进行测定，计算样品含量，结果见表4。
表4 板间精密度结果（批号:000521）（略）
1.7 稳定性实验 吸取对照品溶液及供试品溶液2μl，分别点于同一薄层板上，照“标准曲线”项下操作，测定不同时间下同一斑点的吸收度积分值，结果见表5。衰减率用下式计算:衰减率（%）=积分值 （0） -积分值 （1）
积分值 （0）×100%
表5 稳定性实验（略）
结果表明，测定的薄层板显色后在2h内斑点基本稳定。
1.8 重现性实验 取本品（批号:020521）5份，精密量取，照“供试品溶液制备”和“标准曲线”项下操作，测定结果见表6。
表6 重现性结果（略）
1.9 干扰实验 按处方量制备不含姜黄阴性样品，照“供试品溶液制备”和“标准曲线”项下操作，进行色谱扫描，结果阴性样品在与姜黄对照品相应的位置无吸收峰，说明样品的姜黄素来源于姜黄 ［2］ 。
1.10 回收率实验 取样品（批号:020521，含量0.767mg/g）2g，加每1ml含1.0mg姜黄素甲醇溶液1ml，混匀，照“供试品溶液制备”和“标准曲线”项下操作，测定结果见表7，回收率按下式计算。
回收率（%）= 测定总姜黄素量-样品中相当于姜黄素的量
添加姜黄素的含量 ×100%
表7 回收率结果（略）
1.11 样品测定 取本品，精密量取，照“供试品溶液制备”和“标准曲线”项下操作，结果见表8。
表8 样品测定结果（略）
2 结果
对三批样品实际测定，本品中姜黄素的含量在0.7～1.1mg/g范围内，考虑到原料药材产品和品质的影响，故含量 限度暂定为本品每1g含姜按姜黄素计不得少于0.5mg ［3］ 。
3 讨论
本含量测定方法科学、重现性好，能有效控制该产品的质量，目前该方法已收入国家食品药品监督管理局标准（标准号为YBZ05302004）。
参考文献
1 何顺志.中国姜黄属植物根茎中姜黄类化合物的含量测定.中国药科大学学报，1990，21（2）:95.
2 杨模坤.姜黄及其制剂中姜黄素的测定.中药材，1987，13（12）:28.
3 赵德水.姜黄及其制剂中姜黄类化合物德高效液相色谱分离与测定.药学学报，1986，21（5）:382.
（编辑江 枫）
作者单位:161003齐齐哈尔鹤翔制药有限责任公司
齐齐哈尔黑龙集团鼎恒升药业有限公司
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