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【摘要】 目的 探讨抗精子抗体与不孕妇女年龄的关系。 方法 用传统微量精子凝集试验（MTAT）对1485例不孕妇女做血清抗精子抗体（AsAb）检查，并按年龄组别分析。 结果 总阳性率为27.88%，在27～36岁年龄段AsAb阳性率显著高于其他组别。 结论 AsAb阳性率与不孕妇女年龄有明显关系。
【关键词】 抗精子抗体;不孕;年龄
抗精子抗体影响不孕结论是肯定的 ［1］ ，对不孕妇女与血清抗精子抗体（AsAb）的关系屡有报道，但该抗体的产生是否与年龄有关却少有报道。本文统计了前来我服务中心就诊的1485例不孕妇女血清进行AsAb测定的情况以及对其阳性率与年龄的关系进行分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料 对象是前来我中心妇科门诊就诊的不孕妇女1485例，经临床检查并排除器质性病变，不孕年限≥2年，年龄22～41岁。按年龄阶段不同分为4组:A组22～26岁，B组27～31岁，C组32～36岁，D组37～41岁。
1.2 方法
1.2.1 血清样品采集与保存 抽取不孕妇女的外周静脉血2ml，凝血后离心并收集血清，经56℃30min灭活后-20℃保存待测。
1.2.2 精子样品处理 已婚已育健康男性，手淫方法取精，常规清液分析后选活力≥75%，精子密度≥40×10 6 /ml者备用。精液先经上游法筛选并离心收集精子，实验时用Ham's F10培养液调精子浓度至40×10 6 /ml左右。待测血清用Tyrode's液稀释至1∶16，此浓度亦作阴性和阳性的分界点。
1.2.3 检测方法 本文采用微量精子凝集试验（MTAT）法 ［3，4］ ，略加改良，试验在72孔微量反应板中进行，先取10μl稀释血清置于反应孔中，然后每孔加入已处理并调好浓度的精子样品1μl，并设阴、阳性对照，37℃孵育1h、2h和3h各观察1次，以第3h的结果为最后结果判定。
1.3 结果观察 以20×倒置显微镜进行:（1）以2～3条精子为1个凝集团，每个视野下观察有3个凝集团以上，且游离活动精子数占70%以上者判为（+）。（2）以5～10条精子为1个凝集团，每个视野下观察有3个凝集团以上，且游离活动精子数50%～60%者判为（++）。（3）以10～30条精子为1个凝集团，每个视野下观察有2～3个凝集团，且游离活动精子数占30%者左右，判为（+++）。（4）若以30条精子以上为1个凝集团，每个视野下观察有1个以上凝集团，且游离活动精子数5%～10%者左右，则判为（++++）。
1.4 统计学方法 本文收集资料经整理后，采用χ 2 检验方法分析组别之间的差异。
2 结果
1485例不孕妇女血清中AsAb阳性414例，占27.9%（414/1485），各年龄组别的阳性率，见表1。结果显示:不孕妇女血清AsAb的变化情况及各年龄组AsAb阳性率之间比较差异有显著性。
表1 用MTAT法检测1485例不孕妇女血清各组别之间AsAb阳性率的情况（略）
3 讨论
AsAb产生的原因非常复杂，可能与下述因素有关:（1） 女性生殖道局部的损伤及感染是其中非常重要的因素，进入体内的精子以及精浆中的可溶性抗原被吸收入血，诱使体内产生免疫应答。（2）丈夫精液中缺乏免疫抑制因子，从而女性生殖道内的免疫识别系统处于对精子较为敏感的状态。（3）女性体内免疫系统处于某种非正常状态时亦有可能导致体内AsAb的产生。
AsAb对不孕的影响，多项研究表明 ［2］ ，AsAb对不孕的影响十分复杂，其主要表现在:（1）影响精子的输送过程，包括精子自身凝集、降低其活动能力等。（2）阻碍精子与卵子的结合及受精卵的着床。（3）干扰已着床胚囊的生长发育并使之变性流产。所以AsAb影响不孕的结论是肯定的。本文的实验结果可以看出，在女性处于生育高峰期（B组27～31岁，C组32～36岁），此两组在不孕人群中所占比例最大，占82%，AsAb阳性率明显较其他组别高，这一期间的妇女大都处于已婚一段时间，和精液接触的机会与频率可能相应较其他组别高。这一年龄阶段正是女性从成年过渡到中年的时期，也是女性生殖系统炎症的高发期，因而不但炎症损伤可能增加了精液内可溶性抗原入血的机会，而且某些炎症物质也可能与精子表面抗原有交叉反映性;加上体内免疫系统处于活跃和敏感阶段等等因素，都可能提高AsAb的阳性率。结果表明，AsAb与不育妇女年龄有一定关系。此外，这一段时期女性内分泌系统也处于活动高峰期，内分泌系统的变化是否与免疫以及AsAb的产生有关，也是值得认真思考和深入研究的课题。
现用于检测AsAb的方法很多 ［3，4］ ，但根据笔者的体会，用MTAT法对不明原因的不孕妇女进行普查及初步筛选是比较好的方法，这种方法以活动精子作为抗原，它不但比较符合自然的生理状态，也能避免精子内部抗原的暴露而对实验结果造成干扰，进而提高了精子表面抗原的特异性。本法不但操作简便，重复性好，而且可直接观察精子凝集的具体类型。一般认为，当AsAb滴度≥1∶16时，精子的活动明显降低，根据实验笔者认为，1∶16的滴度可作为凝集抗体的阴性和阳性的分界限，但滴度小于这个比例时（如1∶8）并不能完全排除AsAb对生育的影响，因为AsAb对生育的干扰是多方面的，在低滴度抗体时，同样可能会相对推迟生育的时间 ［5］ ，并且体内抗体产生的浓度并非总是衡定不变的。
【参考文献】
1 李华，唐乃富，颜淑霞，等.抗精子抗体和SPIM对“不明原因”原发性影响.现代妇产科进展，1998，7（1）:59.
2 张文浩.不孕症的免疫学因素.国外医学·计划生育分册，1990，9（2）:68.
3 马天根，张国芬，孟衍建.检测不育患者血清凝集抗体的三种方法比较.男性学杂志，1991，4（4）:221.
4 黄宇峰.男性病实验诊断手册，第2版.南京:东南大学出版社，1993，24-27.
5 周作民，沙家豪，胡志刚，等.抗精子抗体和精子活动及顶体蛋白酶关系的研究.男性学杂志，1991，5（3）:145.
（编辑:新 竹）
作者单位:523079广东省东莞市计划生育服务中心