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【摘要】 目的 用反相高效液相色谱法测定速感宁胶囊中绿原酸的含量。方法 采用Shim-pack VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm) 色谱柱为固定相；流动相为乙腈-水-磷酸（80∶400∶1）；流速为1ml/min；检测波长为327nm；紫外检测。并进行了线性范围和加样回收率试验。测定了3个批号的样品。结果 HPLC法可用于测定速感宁胶囊中绿原酸含量的测定。结论 该方法简便、准确、可靠，可用于速感宁胶囊的质量控制。
【关键词】 速感宁胶囊；绿原酸；金银花；反相高效液相色谱法
速感宁胶囊是由柴胡、贯众、牛黄、大青叶、金银花等组成。具有清热解毒、消炎止痛等作用。用于治疗感冒、流行感冒、咽喉肿痛以及小儿腮腺炎等疾病。测定绿原酸的含量能够反映和控制该胶囊的内在质量。本实验采用HPLC法测定绿原酸的含量，为控制速感宁胶囊的质量标准提供依据，现总结报告如下。
1 仪器与试剂
岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪，SPD-10A 紫外分析仪，CTO-10AS柱温箱，DGU-12A 脱气机，KQ-250DE数控超声波清洗器。绿原酸对照品购自中国药品生物制品检定所（批号：0753-200411）。速感宁胶囊为天津美伦医药有限公司生产(批号：031103，040706，040405)。甲醇和乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。水为二次蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Shim-pack VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm); 流动相：乙腈-水-磷酸（80∶400∶1）；流速：1ml/min；检测波长：327nm［1］；柱温：30℃；进样量：20μl。在此条件下，样品中绿原酸与相邻成分达到基线分离，保留时间为4.370min。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取低温真空干燥至恒重的绿原酸对照6.5mg，置于50ml的容量瓶中，加50%甲醇适量使之溶解，再加50%甲醇至刻度，作为储备液（浓度0.131mg/ml）。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取速感宁胶囊粉末0.5g，置于25ml的容量瓶中，加50%甲醇至刻度，密封，30℃超声萃取40min［2］，取出，放冷，加50%甲醇补充至刻度，过滤，即得。
2.4 标准曲线的绘制 精密量取对照品储备液0.5、1、2、3、4、5ml置于10ml的容量瓶中，分别加入50%甲醇至刻度，摇匀。按上述色谱条件分别进样进行测定。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算得回归方程为y=764890.350x+12922.847，r=0.9987, 线性范围为0.13～1.32μg。
2.5 精密度试验 精密吸取一定浓度的对照品溶液，按上述色谱条件，连续进样5次，测绿原酸峰面积的平均值为180956.0094, RSD=2.36%。
2.6 重现性试验 取同一批号的样品0.5g，按2.3项下方法分别制备5份 ，按上述色谱条件测定绿原酸的含量，RSD=1.67% (n=5)。
2.7 稳定性试验 精密吸取同一浓度的供试品溶液于不同时间测定，结果表明在24h内稳定。
2.8 回收率试验 精密吸取5份已测得绿原酸含量的样品，分别加入不同浓度的绿原酸对照品，按样品测定方法进行测定，结果见表1。
表1 速感宁胶囊中绿原酸的回收率测定(略)
2.9 样品的测定 取供试品和对照品溶液各20μl，按上述色谱条件测定计算绿原酸的含量，结果见表2。
表2 速感宁胶囊中绿原酸含量 (略)
2.10 空白实验 取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照品溶液（按处方工艺制成的不含绿原酸的样品供试液）按上述条件测定，结果表明供试品溶液与对照品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性对照液在此位置处无色谱峰,见图1。
3 讨论
本文对样品提取条件进行了探索，先后采用甲醇和50%甲醇超声提取，结果表明50%甲醇提取色谱峰明显。经测定绿原酸在波长327nm处有最大的吸收峰，故本实验选此波长提高了检测的灵敏度。本法操作简便,结果准确,可用于本制剂中绿原酸的含量测定。
【参考文献】
1 倪坤仪.现代色谱分析.南京：中国药科大学出版社，1995，190.
2 祝德秋，崔岚.HPLC测定清炎颗粒中绿原酸的含量.中成药，2003，25(9):776-附1.
作者单位： 300400 天津，天津医药教育中心
(编辑：乔 晓)