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【摘要】 目的 探讨遗传性球形红细胞增多症（HS）的红细胞趋化因子受体活性的变化规律。方法 取0.2ml S180灭活细胞（5×106/ml）加入全血细胞（或白细胞）0.2ml和血浆0.2ml中，混匀，置37℃水浴1h。1h取出离心，上清液用免疫酶联法测定IL-8含量，算出红细胞IL-8的吸附率。结果 HS患者与恶性肿瘤患者相似。HS肿瘤组红细胞IL-8吸附率（-0.45±0.75，n=5）明显低于正常人（0.5±20.28，n=7），差异有显著性（P<0.05）。结论 HS患者红细胞膜趋化因子受体活性明显下降，红细胞调控白细胞免疫反应能力受损是HS患者易病毒感染主要原因之一。
【关键词】 遗传性球形红细胞增多症；红细胞IL-8吸附率；IL-8
遗传性球形红细胞增多症（hereditary spherocytosis，HS）是一种遗传性红细胞膜缺陷疾病［1］，红细胞具有天然免疫功能，在血液免疫反应中具有重要的免疫调控作用［2］，红细胞膜具有多种免疫分子，其中红细胞趋化因子受体对白细胞（包括粒细胞、淋巴细胞）在免疫反应中产生的IL-8含量具有重要的吸附调控作用，红细胞对白细胞调控起重要的主干道作用［3］。我们用癌细胞激活血液免疫反应，发现遗传性球形红细胞增多症红细胞对癌细胞激活后白细胞产生的IL-8的吸附能力明显低下，表现同恶性肿瘤患者相似，现将资料报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料 枸橼酸抗凝新鲜血标本共12例，其中遗传性球形红细胞增多症1例，直肠癌1例，胃癌2例，卵巢癌1例，献血员7例，IL-8免疫酶联试剂盒商购。癌细胞灭活制剂（S180）输血科血液免疫研究室自制（浓度5×106/ml）。
1.2 方法
1.2.1 预备实验 全血细胞（含红细胞和所有白细胞）、白细胞和血浆的制备，将2ml新鲜枸橼酸抗凝血水平离心2500r/min，离心5min后，取上层血浆至另一试管备用，用生理盐水恢复原体积，混匀，从中取出0.2ml至10ml试管实验管1和2，第1管加蒸馏水2ml轻轻吹打不超过1min（试管在烧杯中），即刻加高渗盐水恢复，再加生理盐水至刻度，混匀；第2试管直接加生理盐水至刻度，混匀。2个试管同时水平离心2500r/min，离心5min，倒尽上清液，第1管称为白细胞，第2管称为全血细胞（全血细胞中的白细胞总数与白细胞管是相等的）。
1.2.2 正式实验 每个标本做2个管，全血细胞激活管：0.2ml的癌细胞和0.2ml血浆加入0.2ml全血的白细胞中，白细胞激活管：0.2ml癌细胞和0.2ml血浆加入0.2ml白细胞悬液中，2管分别充分混匀，置37℃水浴1h，取出2500r/min，离心5min，取上清液，用IL-8免疫酶联试剂盒测定反应液中IL-8含量（PB/Pg），用公式算每个标本红细胞对IL-8的吸附率=白细胞激活管IL-8含量-全血细胞激活管IL-8含量。
1.2.3 统计学分析 采用t检验。
2 结果
2.1 HS与肿瘤患者、献血员全血细胞激活和白细胞激活组IL-8含量测定结果比较 我们共做1例HS、4例各种肿瘤患者和7例献血员全血激活组反应液中IL-8含量变化，发现HS患者的IL-8含量变化类似肿瘤患者，2管IL-8含量都很高，而且未测到上限，而献血员IL-8含量偏低，见表1。 表1 HS、肿瘤患者与献血员的全血细胞激活组、白细胞 激活组IL-8含量比较
献血员 13.68 33.20 0.59
2.2 HS、肿瘤组与献血员组红细胞IL-8吸附率比较 将检验标本归类为HS、肿瘤组与献血员组比，发现献血员全血细胞激活组IL-8含量低于献血员白细胞激活组IL-8含量，而HS、肿瘤组全血细胞激活组IL-8含量高于HS，肿瘤组白细胞激活组IL-8含量，按红细胞IL-8吸附率比较，HS、肿瘤组红细胞吸附IL-8能力明显下降，表现在HS、肿瘤组红细胞IL-8吸附率明显低于献血员红细胞IL-8吸附率，见表2，HS患者红细胞IL-8吸附率等于零，见表1。 表2 HS、肿瘤组与献血员组红细胞IL-8吸附率比较 注：与献血员组相比，t=5.039，△P<0.01；与献血员组相比，t=2.643，*P<0.05；与献血员组相比，t=2.758，▲P<0.05
3 讨论
红细胞膜趋化因子受体（ECRR）对IL-8有吸附作用，可使血液循环中IL-8含量保持在最佳低水平，当机体某部位出现病患时，白细胞可不会因血液循环中IL-8等趋化因子的吸附作用，而可穿过血管壁进入病变区域，参与炎症反应和免疫反应消灭致病原，而HS患者由于红细胞膜遗传性缺陷，趋化因子受体严重损伤，因此对血液循环中IL-8含量的下调能力明显下降，肿瘤患者，特别是消化道恶性肿瘤患者贫血状况严重，红细胞膜也有损伤，所以红细胞对IL-8的吸附力与献血员相比明显低下［4］，HS在抗原激活情况下，红细胞调控白细胞免疫反应能力明显低下，使免疫反应处于低下状态，所以HS患者极易感染病毒是可理解的，其有关机制还有待深入研究。
【参考文献】
1 邓家栋，杨宗礼，杨天楹，等.邓家栋临床血液学.上海：上海科学技术出版社，2001，537-541.
2 郭峰，张乐之，花美仙，等.疫苗激活红细胞增强白细胞释放IL-8的实验研究.药学服务与研究杂志，2005，5（2）：105-108.
3 郭峰.血液免疫反应路线图理论.肿瘤学杂志，2005，11（3）：15.
4 郭峰，钱宝华，张乐之.现代红细胞免疫学.上海：第二军医大学出版社，2002，1.
作者单位： 200433 上海，第二军医大学长海医院实验诊断科（△输血科血液免疫研究室）
（编辑：田 雨）