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［摘要］ 目的 探讨三羟乙基芦丁的制备过程与条件，筛选最佳结晶溶剂，以优化其制备工艺及提高其含量。方法 以芦丁与环氧乙烷为原料，以甲醇、水等溶媒，在碱催化剂存在下合成三羟乙基芦丁。结果 显示三羟乙基芦丁的合成有一个最佳反应点（此时含量最高），其粗品含量可达73%以上。结论 甲醇为最佳结晶溶剂，精制后其含量可达90%以上。
［关键词］ 芦丁；三羟乙基芦丁；合成；工艺
Study on preparation of 3′，4′，7-Tri［O-（2-hydroxyethyl）］ rutin
LIU Yue-jin，CHEN Dao-peng，Cui Yan.
School of Chemical Engineering，Shenyang Institute of Chemical Technology，Shenyang 110142，China
［Abstract］ Objective To investigate synthetic process and conditions of 3′，4′，7-tri［O-（2- hydroxyethyl）］ rutin and select its better solvent for crystallization to optimize its technics and increase its content.Methods It was synthesized by rutin and ethyleneoxide in methanol-water or water，which was catalyzed by sodium monoxide.Results Showed that the synthetic process of 3′，4′，7-tri［O-（2-hydroxyethyl）］ rutin pass an optimizing point when it had the highest content，and the content of its product could reach over 73%，and that methanol was better solvent for crystallization，after refining the content of its product was over 90%.Conclusion Methanol is the optimal crystal solvent for synthesizing rutin，it can increase the contents of the rutin.
［Key words］ rutin; 3′，4′，7-tri［O-（2-hydroxyethyl）］ rutin; synthesis; technics
三羟乙基芦丁又名曲克芦丁（troxerutin），化学名3′，4′，7-三［Ｏ-（2-羟乙基）］芦丁；英文名3′，4′，7-tri［O-（2-hydroxyethyl）］rutin，是维脑路通（venoruton）的主要成分。结构如下：
图1 三羟乙基芦丁结构式（略）
三羟乙基芦丁的制备方法：（1）以水合芦丁和氯乙醇为原料在维生素C或重亚硫酸钠的存在下，加热到85℃～100℃，2h，中和、精制而得［1］。（2）以水合芦丁和环氧乙烷为原料，以氢氧化钠、吡啶等碱为催化剂催化成醚反应，再中和、精制而得［2］。由于芦丁分子有4个酚羟基，在反应过程中先后生成一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁，且除四羟乙基芦丁外一羟、二羟、三羟乙基芦丁都有异构体，故反应复杂。又由于一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁的分子理化性质差别小，反应终点的控制和监测都不易，一般采用高效液相色谱法（HPLC）［3］。本文以HPLC监测，水合芦丁和环氧乙烷为原料，研究三羟乙基芦丁的合成过程中一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁的变化情况和合成条件以及三羟乙基芦丁粗品的精制。
1 资料与方法
1.1 仪器与材料 高效液相色谱仪（型号：SP2000，物理光谱公司，美国）。芦丁（含量≥95%，成都欧康植化科技有限公司）；环氧乙烷（化学纯，上海市普陀区永生试剂厂）；甲醇（分析纯，开原市化学试剂一厂）；乙醇（分析纯，天津市百世化工有限公司）；正丁醇（分析纯，沈阳市化学试剂厂）；氢氧化钠（化学纯，沈阳市精细化学品公司）；三羟乙基芦丁对照品［含量77.7%，由曲克芦丁片（河南天方药业股份有限公司）提取精制］；乙腈（色谱纯，进口分装，美国）；四氢呋喃（色谱纯，美国B& J）；枸橼酸（分析纯，上海迈坤化工有限公司）。
1.2 三羟乙基芦丁制备 将芦丁30g、甲醇∶水（3∶1）180ml、2.5M氢氧化钠3ml，依次加入带冷凝管的500ml三口烧瓶中，搅拌下缓缓升温至反应温度达75℃。滴加环氧乙烷，以HPLC监测反应终点。接近终点时停止滴加环氧乙烷，继续在上述温度下反应到终点。用盐酸酸化到pH值为2，放置18h，加少量活性碳过滤，滤液置水浴上真空浓缩以回收甲醇，除去水，残余物干燥得粗品36.5g，重量收率121.7%，三羟乙基芦丁含量74.2%。经甲醇结晶，得浅黄色片状晶体24.8g，重量收率67.9%，三羟乙基芦丁含量90.9%。总重量收率82.6%。
1.3 三羟乙基芦丁的HPLC含量测定 HPLC［3］：SP2000高效液相色谱仪，SP-4100泵，SP-UV2000紫外检测器，色谱柱：（Agilent SB-C18，250 mm×4.6 mm，5μm）不锈钢柱，流动相：乙腈-四氢呋喃-0.1%枸橼酸（7∶10∶76），检测波长255nm。理论板数以三羟乙基芦丁峰计应不低于2000。以三羟乙基芦丁对照品做对照，以面积归一化法测定含量。
2 实验结果
2.1 反应介质和最佳反应时间以及反应过程中一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁的含量变化 以氢氧化钠为催化剂、甲醇-水为混合溶剂，在反应温度为75℃，溶解性好，反应速度快，当反应时间为8～9h时，三羟乙基芦丁含量可达73%以上，接近其最高值，芦丁、一羟、二羟乙基芦丁含量接近0，四羟乙基芦丁刚开始生成，之后，三羟乙基芦丁含量迅速下降，四羟乙基芦丁含量迅速升高，所以最佳反应时间为8～9h，见图2、图3。
水为溶剂，反应开始时溶解不好，反应速度慢，反应过程中芦丁、一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁含量变化与甲醇-水为溶剂相似，最佳反应时间为15h，三羟乙基芦丁含量可达71%以上，见图4。
2.2 粗品的结晶 含量为74.2%的三羟乙基芦丁粗品经甲醇、乙醇、正丁醇结晶，甲醇结晶效果好，三羟乙基芦丁含量可达90.9%，收率为67.5%，为淡黄片状或颗粒，见表1。
表1 三羟乙基芦丁粗品经甲醇、乙醇、正丁醇的结晶结果（略）
3 讨论
三羟乙基芦丁是维脑路通的主要有效成分，具有降低毛细血管通透性和脆性，提高毛细血管抵抗力，抑制血小板聚集，防止血栓形成的作用，具有疗效确切、安全可靠、使用方便、价格低廉等特点。近些年来，又发现了三羟乙基芦丁的其他方面的作用，如保护脂质防止过氧化［4］、保护组织免受辐射的损伤［5］、治疗眼睛疲劳［6］、可吞噬自由基［7］等。越来越受到研究者的关注。
很难得到高纯度三羟乙基芦丁（如含量达到99%以上）产品的原因：一方面是三羟乙基芦丁的反应复杂，另一方面是结晶溶剂的选择和结晶方法等。在反应温度为75℃，以氢氧化钠为催化剂条件下，清楚地展示了反应过程中的一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁的产生、变化过程。在此，三羟乙基芦丁达到最高时，四羟乙基芦丁已经开始形成，所以只能取一个最佳值。此反应过程可能也适用于其他反应溶剂。
三羟乙基芦丁的合成反应复杂，但其有一个最佳反应点，此时，三羟乙基芦丁含量最高，相对应的时间即为此条件下的最佳反应时间，这里甲醇-水为混合溶剂时，最佳反应时间为8～9h，水为溶剂时，最佳反应时间为15h。甲醇为最佳的结晶溶剂，可显著提高三羟乙基芦丁的含量。本实验为三羟乙基芦丁生产条件的控制提供了科学的根据。
（本文彩图见封三）（略）
［参考文献］
1 Kvis F.Mixture of O-hydroxyethylated rutin derivatives.Czech.CS225，440，1984-10-01.
2 唐精桥，袁佩瑾，刘炜.曲克芦丁的制备及结构鉴定.中国医药工业杂志，1996，27（7）：291-292.
3 丁少纯，王美芳，徐士飞，等.利用HPLC法测定维脑路通输液中三羟乙基芦丁含量的研究.药物分析杂志，2002，22（4）：318-319.
4 Heijnen CGM，Haenen GRMM，Oostreen RM.Protection of flavonoids against lipid peroxidation： the structure activity ralitionship revisited.Free Radical Research，2002，36（5）：575-581.
5 Maurya DK，Salti VP，Krishnan Nair CK.Radioprotection of normal tissues in tumor-bearing mice by troxerutin.Journal of Radiation Research，2004，45（2）：221-228.
6 成都聚源药物研究开发有限公司.曲克芦丁作为制备治疗各种眼底病变或视疲劳的滴眼液.发明专利申请公开说明书，CN031117164.8，申请日：2003-01-15.
7 Kessler M，Ubeaud G，Jung L.Anti-and pro-oxidant activity of rutin and quercetin derivatives.Journal of Pharmacy and Pharmacology，2003，55（1）：131-142.
（编辑：魏 冉）
作者单位： 110142 辽宁沈阳，沈阳化工学院化学工程学院