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［摘要］ 目的 探讨SD大鼠血液样品于不同时间放置后对血液分析仪检测结果的影响。方法 对随机抽取的 20只SD大鼠眶静脉采血获得的血液样品分别在即刻和放置3、6 h后用血液分析仪对各项血液指标进行测定。结果 标本存放3、6 h后WBC、GRAN （%）降低，LYM （%）总数逐渐增高，存放3 h 对RBC、PLT数无明显影响，存放6 h RBC数明显降低、PLT数明显升高。Hb在标本存放3 h和6 h后改变均差异无显著性。结论 采血后立即检测结果较好，如果不能立即检测应将标本置于4 ℃冰箱内存放，可提高血细胞各项参数的准确性。
［关键词］ 血液分析;存放时间
随着中医药领域对某些病症致病机制及中医、中药治疗某些疾病机制研究的不断深入，对各种病症结合动物模型的研究逐渐成为中医药研究的热点。而许多动物实验中均涉及动物各项血液指标的分析。在日常对各种动物血液分析的过程中，因为某些客观因素的限制，有时对采集后的动物血液标本不能及时检测，需要放置一定时间才能检测。而放置时间的长短是否可能造成对血液分析结果的影响较少报道，本研究重点探讨标本采集后立即检测及分别存放3 h、6 h后对结果的影响，现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 动物来源 健康未交配的SD大鼠20只，雌雄各半，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。
1.2 仪器与试剂 HEMAVET全自动五分类动物血液分析仪（英国DREW公司），溶血剂、稀释液等均为原厂提供。
1.3 检测方法 SD大鼠眶静脉采血后经1.25%EDTA - K2抗凝，按操作规程由同一操作人员按同样手法分别于标本采集后 0、3、6 h经血液分析仪分别对白细胞总数（WBC）、红细胞总数（RBC）、血小板计数（PLT）、血红蛋白（Hb）、中性粒细胞分类（GRAN）、淋巴细胞分类（LYM）、单核细胞分类（MO）、嗜酸粒细胞分类（EO）、嗜碱粒细胞分类（BA）进行测定，室内温度 25 ℃。比较不同存放时间结果的差异，用SPSS 10.0 进行统计分析，所得数据用（±s）表示。
2 结果
不同存放时间对血液分析的影响结果见表 1，与标本采集后立即测定的结果相比，标本存放 3 h和 6 h 后 WBC、GRAN 降低，LYM、MO 增高。标本存放 3 h 对 RBC数无明显影响；存放 6 h，RBC数降低差异有显著性。存放3 h 和6 h 后 PLT总数逐渐增高。因血液中嗜酸及嗜碱粒细胞比例较少，随放置时间的变化不显著。
表1 不同贮存时间对血液分析结果的影响 （略）
经对照分析发现，采血后存放时间对WBC、RBC、PLT均有影响，其中标本存放3 h和6 h后WBC、GRAN （%）降低，LYM （%）、MO（%）逐渐增高，与0 h相比差异有显著性（P<0.05）；存放3 h 对RBC、PLT数无明显影响，存放6 h后，RBC数明显降低与0、3h相比差异有显著性（P<0.05）；PLT数明显升高，与0、3h相比差异有显著性（P<0.05）。Hb在标本存放3 h和6 h后改变均差异无显著性。
3 讨论
HEMAVET全自动五分类动物血液分析仪采用电阻抗法和聚焦流专利技术，主要用于各种实验动物的血液细胞成分的分析。其白细胞计数原理是在白细胞计数室中加入溶血剂使红细胞破碎成不被仪器计数小孔识别的碎片，以达到单独计数的目的。而对WBC的分类是通过溶血剂处理后各种WBC体积的大小来区分的。本研究表明，标本存放3、6 h 对多数血液分析参数均有不同程度影响，主要影响WBC和PLT结果。血液中红细胞数量是白细胞的103倍，所以有核红细胞或未被完全破坏的红细胞对白细胞计数及分类有一定的影响。放置时间过长的WBC脆性增大，容易造成溶血过度，使部分WBC因受溶血素破坏而结果偏低。WBC分类计数中过度溶血的部分WBC膜受损，细胞体积缩小甚至形成裸核，使相对体积较大的WBC （如单核细胞、中性细胞）减少，而相对体积较小的WBC（如淋巴细胞）增多。血液标本放置时间过长，会产生大量破碎的红细胞碎片，而使PLT数量明显升高。因此采血后放置30 min内检测结果较好且稳定，如果因为某些客观原因标本必须放置较长时间才能测试的情况，应将标本置于4 ℃冰箱内存放，可提高血细胞各项参数的准确性。另外本次研究未考虑所用动物的年龄、体重、营养及喂养环境条件、季节、血样的采集、运送条件等对血液分析结果的影响，因此有必要在统一的试验条件下进行进一步的深入研究，探讨不同种属、性别和年龄的实验大鼠的血液标本与存放时间的相关性。
作者单位： 110032 辽宁沈阳，辽宁中医药大学
（编辑：魏 冉）