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【摘要】 目的探讨增食灵颗粒对小儿厌食症模型小鼠血清瘦素（Leptin）的影响。方法采用病因模拟法建立小儿厌食症动物模型，分别对模型小鼠血清瘦素含量进行检测。结果增食灵颗粒可以明显增加厌食症小鼠的食欲，提高血清瘦素含量，与空白对照组和模型对照组比较，差异均有统计意义（P<0.05或P<0.01）。结论增食灵颗粒可明显增加厌食症小鼠的食欲，提高血清瘦素水平，这可能是增食灵颗粒发挥临床疗效的作用机制之一。
【关键词】 增食灵颗粒；小儿厌食症；瘦素；实验研究
小儿厌食症是以小儿较长时间食欲不振或减退，甚至拒食为临床特点的儿科常见病、多发病，对儿童生长发育影响较大。近年来现代医学研究发现，外周和(或)中枢脑肠肽分泌紊乱可影响食欲中枢功能活动，进而影响摄食行为[1]，而对小儿厌食发生发展及其特效疗法的深入研究将有助于推动人类对摄食生理调控机制的进一步认识和提高儿童健康水平[2]。以我科张士卿教授治疗小儿厌食症的经验方组方加减的增食灵颗粒，经多年临床观察，疗效肯定。本实验主要从“脑肠肽—食欲中枢”对摄食行为的调控角度来探讨瘦素在小儿厌食症发病过程中发挥的作用及其该药的治疗机理，为新药开发和临床安全用药提供一定的科学依据。
1材料
1.1实验动物
SPF级昆明种小鼠60只，体质量（18±4）g，雌雄各半，由甘肃中医学院实验动物中心提供，合格证编号：SCXK(甘)2004-0006-0000003。
1.2主要药品及试剂
增食灵颗粒实验用制剂由甘肃中医学院科研实验中心提供；江中健胃消食片（江中药业股份有限公司，批号0606006）；蒸馏水；Leptin放免试剂盒(北京科美东雅生物技术有限公司提供，批号20061225)；4 %甲醛溶液；20 %乌拉坦溶液。
1.3实验仪器
台式高速低温离心仪、微量滴定管、BS110S型电子分析天平、常用手术器械、试管等。
2方法
将60只小鼠适应性喂养1周后，随机分为5组，每组12只，分别为空白对照组（A组）、模型对照组（B组）、阳性对照组（C组）、增食灵颗粒大剂量组（D组）、增食灵颗粒小剂量组（E组）。然后采用病因模拟法进行动物造模，即A组以常规饲料喂养，其余4组用特制饲料喂养（特制饲料采用鱼松、肉松、奶粉、玉米粉、黄豆粉、白糖、鲜鸡蛋、鲜肥肉按照1∶1∶1∶2∶1∶1.8∶2比例混匀，捏成饼状，晾干，4 ℃冷藏备用），所有动物在同一条件下(室温20～24 ℃，相对湿度50 %)饲养，均自由进食饮水，每日记录进食量，以造模小鼠摄食量平均下降20 %～30 %为模型成功标准，或体质量低于对照组10 %～15 %为造模成功［3］。造模成功后，各组开始灌胃，每日1次，连续灌胃10 d。A组和B组灌服等体积（均为2 mL）蒸馏水，D组和E组分别灌服增食灵颗粒25 g/（kg·d）、12.5 g/（kg·d），C组灌服江中健胃消食片水溶剂2.5 g/（kg·d）。于末次给药后次日，断颈采全血1 mL加入试管内，以3 000 r/min的速度低温离心15 min，取血清，-20 ℃保存待测。采用放免法分别对其进行检测，所有数据均采用均数±标准差（±s）表示，用SPSS13.0统计软件处理，各指标组间比较采用单因素方差分析，当P＜0.05时认为组间数据差异有统计学意义。
3结果
3.1各组实验动物摄食量变化比较见表1。表1各组实验动物摄食量变化比从表1得知，造模第14 d，各组造模动物进食量与A组比较显著下降（P＜0.05），平均降低21.8 %；第35 d各组造模动物进食量与A组比较有高度统计意义（P＜0.01），平均降低24.4 %，说明造模成功。灌胃10 d后，与B组比较，各治疗组进食量差异有高度统计意义（P＜0.01）；与A组比较,各治疗组进食量差异无统计意义（P＞0.05）；与C组比较，D组和E组进食量无差异（P＞0.05）。说明增食灵颗粒对模型小鼠的摄食量具有明显地增加作用，其疗效与江中健胃消食片相当。
3.2各组实验动物血清瘦素含量的比较
见表2。表2各组实验动物血清瘦素含量的比较 从表2得知，与A组比较，B组血清瘦素水平显著降低（P＜0.01）；D、E组及C组均可显著提高血清瘦素水平（P＜0.05或P＜0.01）；各治疗组疗效比较差异无统计意义（P＞0.05）。结果表明，增食灵颗粒具有提高厌食症小鼠血清瘦素水平的作用，且其效果与江中健胃消食片相当。
4讨论
中医学认为引起小儿厌食症的原因众多，但无论何种因素所致，其病机关键均为脾胃失调、纳化失常。因此治疗厌食症的关键即为运脾和胃、消食导滞。增食灵颗粒（苍术、乌梅、鸡内金、茯苓、槟榔、胡黄连、炙甘草）是张士卿教授将厌食症病机与“脾健不在补贵在运”的指导思想相结合，经过多年临床探索研制而成。诸药合用，可谓消补并举，动静相合，标本同治，补而不滞，消导而不伤正，共奏健脾助运、消食和胃、行气补中之功，正合小儿厌食症之病机。
瘦素作为一种由脂肪细胞释放入血液的多肽类激素，可作用于下丘脑的摄食中枢，调节机体摄食反馈通路中的传入饱食信号，抑制食物摄取、减少能量摄入、增加能量消耗，调控体内的脂肪组织消长，以保证机体不发生过度肥胖或消瘦，从而在机体摄食和能量代谢方面起非常重要的作用［4-5］。
本实验中，模型对照组小鼠血清瘦素水平较空白对照组显著降低，我们推测小鼠瘦素水平降低可以减少机体的能量消耗，是机体在饥饿、消瘦状态下的一种适应性的保护反应，以便保存能量，维持生存，也就是说瘦素水平的变化可能不是厌食症的病因，而是厌食症的一种结果，提示瘦素在小儿厌食症发病过程中对食欲影响起一定作用。与模型对照组比较，增食灵颗粒可提高模型小鼠血清瘦素水平，提示该药促进摄食的机理与其对瘦素的良性调节作用有关。
【参考文献】
[1]Kalra S P,Dube M G,Pu S,et al.Interacting appetite|regulating pathways in the hypothalamic regulation of body weight[J].Endocr Rev,1999,20(1):68-100.
[2]张月萍,杜永平,汪受传,等.小儿厌食发生发展及运脾法作用中枢机制研究的新思路[J].中国中医基础医学杂志,1998,4(4):18.
[3]张月萍,杜永平.小儿厌食脾运失健证动物模型的建立[C].全国第12次中医儿科学会议论文集,1-2.
[4]Froguel P H,Guy|grand B,Clement K.Genetic of obesity: towards the understanding of a complex syndrome[J].Press Med,2000,29:564-571.
[5]Bouret S G,Draper S J,Simerly R B.
作者单位：1.甘肃中医学院，甘肃兰州 730000；2.甘肃中医学院附属医院，甘肃兰州 730020； 3.宝鸡市中医医院，陕西宝鸡 721000