胆管感染疾病细菌学分析

【摘要】  目的 了解感染性胆管病人胆汁中细菌分布情况,为临床治疗提供依据。方法 采用厌氧培养箱,用抽气换气靶粒催化耗氧法造成厌氧环境,对178例胆管疾病病人胆汁进行了厌氧菌与需氧菌分离培养。结果178例病人胆汁中有120例呈细菌培养阳性(67.4%),其中纯厌氧菌和纯需氧菌阳性率分别占7.3%和9.0%,混合阳性率占51.1%。 共检出细菌株301株,其中厌氧菌占55.8%,需氧菌占44.2%。结论 胆管感染病原菌中,厌氧菌具有较高的检出率,且混合感染多见,提示厌氧菌在胆管疾病感染中占较重要地位。

【关键词】  细菌,厌氧;细菌,需氧;胆管疾病;胆汁

　　BACTERIOLOGICAL ANALYSIS OF INFECTION IN BILE DUCT 

　　ZHANG PUYU, LI JING, WANG XIBO, et al

　　(Laboratory Department, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China);

　　［ABSTRACT］ Objective To investigate the bacteria in the bile of patients with infection of biliary tract and offer a basis for clinical therapy. Methods Anaerobic environment was created by using palladiu catalysis for culture of anaerobic and aerobic bacteria in bile of 178 patients with the tract infection. Results Of the 178 patients, 120(67.4%) showed a positive result, in which, 7.3% were anaerobic, 9.0% aerobe, and 51.1% with both anaerobic and aerobic. The bacteria were isolated in 301 strains, 55.8% of which were anaerobic, and 44.2%, aerobe. Conclusion A higher detection of anaerobic bacterium is found in biliary tract infection and mixed infection seen more commonly, suggesting anaerobic infection is responsible for a more important place in this problem.
   
　　［KEY WORDS］ Bacterium, anaerobic; Bacterium, aerobic; Biliary tract diseases; Bile

    胆管感染是一种常见病，检查感染源并及时了解各种细菌的致病性，对选用针对性抗菌药物非常重要,其中厌氧菌的致病作用更应引起临床重视。本文对178例胆管疾病手术病人胆汁细菌培养结果进行了分析。现报告如下。

　　1  材料和方法

　　1.1  标本来源

    我院手术治疗胆管疾病病人178例，其中胆管结石88例，胆管感染26例，阻塞性黄疸54例，胆管囊肿等10例。

　　1.2  仪器与试剂

    DY1型厌氧培养箱由浙江义乌冷冻机厂生产。牛肉、牛心浸液厌氧血琼脂平板按文献［1］方法制备，并加入维生素K1、氯化血红素及无菌脱纤维羊血。API 20A微量生化检测板及附加鉴定试剂由法国生物梅里埃公司生产。

　　1.3  标本采集

    手术过程中以无菌针筒抽取胆汁，排尽空气后即将针头插入无菌橡皮塞内迅速送检。
　　
　　1.4  厌氧菌检测

    将标本划种于预还原的厌氧血琼脂平板，随即放入厌氧培养箱，并放入常温催化剂钯粒和煮沸后处于无色还原状态的亚甲蓝厌氧指示剂一管，速密封后用抽气换气法造成厌氧环境。37 ℃ 孵育72～96 h后，观察并记录菌落特性。挑取不同可疑菌落涂片观察菌落形态，经耐氧实验后，对只在厌氧环境生长的专性厌氧菌用API 20A生化系列进行鉴定，按文献［2］等方法鉴定到种。同时，做标本涂片与培养结果对照。

　　1.5  需氧菌分离鉴定

    按常规方法进行。

　　2  结 果

　　2.1  各病种胆汁标本厌氧菌培养

    178例胆汁标本中有120例检出病原菌，总检出率67.4%。其中纯厌氧和纯需氧菌检出率分别为7.3%和9.0%，两者混合阳性率为51.1%，分别占阳性标本的10.8%、13.3%和75.8%。厌氧菌和需氧菌检出率分别为58.4%和60.0%。见表1。表1  不同病种胆汁培养结果（略）
　　
　　2.2  厌氧菌种类分布

    168株厌氧菌中，革兰阴性杆菌90株，占厌氧菌总数的53.6%（90/168）；革兰阳性球菌54株，占32.1%（54/168）。前者以脆弱类杆菌最多，占阴性杆菌的41.1%（37/90），次为卵形类杆菌，占16.1%(27/168),后者以厌氧消化链球菌和产气消化链球菌居多，分别占球菌的59.3%（32/54）和29.6%(16/54)。丙酸杆菌22株，占厌氧菌总数的13.1%（22/168）。见表2。表2  168株厌氧菌种分布细菌种类  株数构成比（略）

    全部胆汁标本经需氧培养，共分离出9种细菌133株，占菌株总数（301株）的44.2%，以大肠埃希菌最多（57株），占需氧菌的42.9%；次为变形杆菌26株，占19.5%；革兰阳性球菌14株，占10.5%。

    在178例胆管疾病手术病人胆汁厌氧和需氧培养中，61.0%胆石症和62.5%的胆管感染为两种厌氧菌感染，每一标本平均菌株前者为1.78株，后者为1.62株，其他为一种菌。在需氧菌培养中，多为2种，前者为78.1%，后者为72.7%。

　　3  讨 论

    胆管感染疾病是外科常见病、多发病，以往对病原菌的检测多侧重于需氧菌。本研究结果表明，胆管感染疾病具有较高的厌氧菌检出率，但其在不同病种检出率不尽相同。本文检出率为58.4%（104/178），与文献［3］报道结果相似，其中胆石症和胆管感染较高，分别为78.4%和61.5%，但两者无显著差异，且多为两种厌氧菌并伴需氧菌混合感染。说明胆管结石与厌氧菌感染关系密切。实验表明，由于厌氧菌感染时，厌氧菌产生的β葡萄酸苷酶的作用，使胆汁中游离型和单结合型胆红质比例明显增高，当超过胆酸对它的溶解能力时，可发生胆红素钙的沉淀，形成结石［4］。因此，厌氧菌感染是胆管结石致病因素中不可忽视的主要原因之一。
    本文结果还表明，168株厌氧菌种类与肠道正常菌群组成相似。说明胆管厌氧菌感染是内源性的感染，是由于某些致病因素诱导下菌群移位于胆管所致。

    胆管感染同其他腹腔内感染一样，亦是多菌种混合感染。本研究每份阳性标本平均分离出2.51株细菌（厌氧菌1.40株，需氧菌1.11株）。混合阳性占阳性标本的75.8%（91/120），多菌种之间具有协同致病作用。其机制与需氧菌消耗组织中氧，降低氧化还原电势，合成细菌生长因子对抗吞噬和细胞内杀伤作用有关。近年来通过免疫机制的研究发现，混合感染中厌氧菌能抑制和破坏人体免疫功能，使感染加剧和扩散［5，6］。

【参考文献】
  　　[1]杜平,吕文和. 新编细菌检验用培养基手册[M]. 青岛：青岛海洋大学出版社， 1989：273.

　　[2]陈聪敏,王文风. 厌氧菌及其检验[M]. 上海：上海医科大学出版社， 1989:133.

　　[3]朱方远. 胆汁厌氧菌实验结果分析[J]. 临床检验杂志， 1989，7:150.

　　[4]赵小团. 胆汁厌氧菌感染对胆汁中胆酸及胆红素成份的影响[J]. 中华实验外科杂志， 1988，5：56.

　　[5]吕文和,吴立群,耿新杰. 胆汁中厌氧菌分离培养结果分析[J]. 中华医学检验杂志， 1991，14(1)：44.

　　[6]吴立群,吕秀文,吕文和,等. 腹部脓肿细菌学研究[J]. 青岛医学院学报， 1991，27（4）：323325.

作者单位：青岛大学医学院附属医院检验科，山东 青岛 266003