子宫内膜癌组织IGF1与其受体表达及意义

【摘要】  目的 探讨子宫内膜癌组织中胰岛素样生长因子1(IGF1)及其受体(IGF1R)表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测20例正常子宫内膜组织(对照组)及46例子宫内膜癌组织中IGF1、IGF1R的表达。结果 IGF1在对照组和子宫内膜癌组阳性表达率分别为60.00%和60.87%，两者差异无显著性（χ2=0.004，P>0.05）；过度阳性表达率分别为0和23.91％,差异有显著性（χ2=4.147，P<0.01）；子宫内膜癌组织中IGF1阳性表达及过度表达与手术病理分期无关(χ2=5.434、4.328，P>0.05)，而过度表达在不同病理分级之间的差异有显著性(χ2=7.163，P<0.05)。IGF1R在两种组织中的阳性表达率分别为70.00% 和60.87%,差异无显著性(χ2=0.511，P>0.05)；过度表达率分别为0和36.96%，差异有显著性(χ2=8.117，P<0.01)；子宫内膜癌组织中IGF1R阳性表达及过度表达与手术病理分期无关(χ2=5.550、4.369，P>0.05)，而在高分化与中、低分化内膜癌组织之间差异有显著性(χ2=8.859、8.584，P<0.05)。结论 IGF1、IGF1R表达与子宫内膜癌发病有关，并可作为子宫内膜癌预后预测的一个指标。

【关键词】  子宫内膜肿瘤 胰岛素样生长因子Ⅰ 受体 IGF1型 免疫组织化学

　　EXPRESSION OF INSULINLIKE GROWTH FACTOR1 AND INSULINLIKE GROWTH FACTOR1 RECEPTOR IN ENDOMETRIAL ADENOCARCINOMA

　　CHI XIAOYAN, WANG YANKUI

　　Department of Obstetrics and Gynecology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China

　　［ABSTRACT］ Objective To evaluate the expression and clinical significance of IGF1/1R in endometrial adenocarcinoma.Methods Immunohistochemical staining of IGF1/1R were performed by SP in 20 cases of normal endometrial as control group and 46 cases of endometrial carcinoma as experimental group. Results Positive expression of IGF1 was found in 60.00% of the control group and 60.87% of the experimental, difference was not significant (χ2=0.004,P>0.05). Over expression of IGF1 was found 0 of the control group and 23.91% of the cancer, the difference was significant (χ2=4.147,P<0.01). Expression and over expression of IGF1 in the carcinoma did not correlate with clinical stage (χ2=5434,4.328;P>0.05), but over expression of IGF1 correlated with cellular differentiation (χ2=7.163,P<0.05).  Positive expression of IGF1R was found in 70.00% of the control group and 60.87% of the cancer. No significant difference of positive expression rate was observed in the two groups (χ2=0.511,P>0.05). Over expression of IGF1R was in 0 of the control group and 36.96% of the cancer. Significant difference of over expression was noted between the two groups (χ2=8.117,P<0.01). Expression and over expression of IGF1R in endometrial adenocarcinoma did not correlate with clinical stage (χ2=5.550,4.369;P>0.05), but correlated with cellular differentiation (χ2=8.859,8.584,P<0.05). Conclusion Expression of IGF1/1R is related to tumorigenesis of endometrial adenocarcinoma, and IGF1 and IGF1R can be regarded as predictive makers of prognosis of endometrial adenocarcinoma.

    ［KEY WORDS］ Endometrial neoplasms; Insulinlike growth factor Ⅰ; Receptor, IGF type 1; Immunohistochemistry

    子宫内膜癌是女性生殖器三大恶性肿瘤之一,绝大多数为腺癌,近年其发病率逐渐增高。有学者研究发现,子宫内膜间质和腺上皮细胞合成和表达的胰岛素样生长因子1（IGF1）及其受体（IGF1R）在类固醇激素的作用下参与子宫内膜的增生和分化[1]。二者在多种肿瘤组织中均呈高表达状态,这种表达与肿瘤的分化程度、预后有关[2]。目前尚无同时研究IGF1、IGF1R与子宫内膜腺癌关系的文献。本实验采用免疫组织化学技术检测IGF1及IGF1R在子宫内膜腺癌组织中的表达，探讨其在子宫内膜癌发生和治疗中的意义。

　　1  材料与方法

　　1.1  标本来源

    选择青岛大学医学院附属医院和即墨市人民医院妇产科子宫内膜腺癌组织标本46份。病人年龄43～70岁, 平均年龄50.24岁。肿瘤病理分级：高分化16例，中分化23例，低分化7例；手术病理分期（FIGO，2000）：Ⅰ期31例，Ⅱ期10例，Ⅲ期5例。同时，选择20例因宫颈癌行子宫全切术，病理证实为正常的子宫内膜组织标本作为对照。

　　1.2  主要试剂

    本文兔抗人单克隆抗体IGF1Ab、IGF1RAb购于武汉博士德生物工程有限公司；SP9001/9002HistostainTMPlus Kits免疫组化染色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

　　1.3  方法

　　1.3.1  检测方法 

　　所有标本经40 g/L甲醛固定,石蜡包埋,每块连续切取3张4 μm厚的切片,贴附于用生物胶处理的载玻片上,60 ℃烤60 min。切片脱蜡至水,清洗3次。体积分数0.03的H2O2封闭内源性过氧化物酶20 min,清洗3次。切片微波抗原修复,冷却、清洗。加一抗IGF1Ab、IGF1RAb1(1∶40), 湿盒4 ℃过夜。清洗后,加PV 6000 PicTureTM二抗,37 ℃ 30 min。清洗3次。DAB显色,苏木精衬染,脱水,封片,光学显微镜下观察。以PBS代替一抗作为阴性对照。

　　1.3.2  结果判断 

　　IGF1蛋白表达阳性为胞浆内出现棕黄色细颗粒，IGF1R蛋白表达阳性为胞膜上出现棕黄色细颗粒。综合染色强度及分布范围进行半定量分析：染色强度阴性为0分，染色弱但强于阴性对照为1分，染色清晰为2分，染色强为3分；分布范围评分标准：阳性细胞数<10%为0分，10%～30%为1分，31%～60%为2分，>60%为3分。上述两种评分相加0～1分为（-），2分为（+），3～4分为（），5～6分为（）[3]。+、、为阳性表达，、为过度表达[2]。

　　1.3.3  统计学分析

　　应用SPSS 11.0软件进行统计学处理，数据比较采用χ2检验。

　　2  结果

    IGF1在子宫内膜的腺上皮细胞和间质细胞均有阳性表达,而IGF1R的阳性颗粒则主要局限于腺上皮细胞的胞膜上,胞浆及核膜上未见染色颗粒,偶可在间质细胞和血管内皮细胞见到其微弱的蛋白表达。

　　2.1  IGF1在子宫内膜癌组织中的表达及与病理分级和手术病理分期的关系

　　2.1.1  子宫内膜癌组织中IGF1的表达 

　　IGF1在正常子宫内膜细胞中的阳性表达率为60.00%,无过度表达；而在子宫内膜癌细胞中的阳性表达率为60.87%,过度表达率为23.91%。两者相比IGF1阳性表达率差异无显著性，过度表达率差异有显著性(χ2=4.147，P<0.01)。见表1。

　　2.1.2  IGF1在子宫内膜癌组织中表达与病理分级、手术病理分期的关系 

　　子宫内膜癌细胞膜IGF1阳性表达在高分化与中、低分化之间差异无显著性，而过度阳性表达在高分化与中、低分化之间差异有显著性（χ2=7.163，P<0.05）。IGF1阳性表达及过度表达在手术病理分期Ⅰ～Ⅲ 期间差异均无显著性。见表1。表1   IGF1表达及与子宫内膜癌病理分级、手术病理分期的关系分组nIGF1表达(略)注：*为子宫内膜癌ⅠB、ⅠC期之间比较，**为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较

　　2.2  IGF1R在子宫内膜癌组织中的表达及与病理分级和手术病理分期的关系

　　2.2.1  子宫内膜癌组织中IGF1R的表达 

　　IGF1R在正常子宫内膜组织细胞中的阳性表达率为70.00%,无过度表达；而在子宫内膜癌细胞中的阳性表达率为60.87%,过度表达率为36.97%,两者相比IGF1R 阳性表达率差异无显著性，IGF1R过度表达率差异有显著性(χ2=8.117，P<0.01)。见表2。表2  IGF1R表达及与子宫内膜癌病理分级、手术病理分期的关系分组nIGF1R表达(略)注：*为子宫内膜癌ⅠB、ⅠC期之间比较，**为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较

　　2.2.2  IGF1R 在子宫内膜癌组织中表达与病理分级、手术病理分期的关系 

　　子宫内膜癌细胞膜IGF1R阳性表达及过度表达在高分化与中、低分化之间差异有显著性(χ2=8.859、8.584，P<0.05)。IGF1R阳性表达及过度表达在手术病理分期Ⅰ～Ⅲ 期各组间差异均无显著性。见表2。

　　3  讨 论

　　3.1  IGF1及IGF1R的结构及生物学作用

    成熟的IGF1是由70个氨基酸残基组成的单链多肽，和胰岛素原有50%的序列相同，IGF1在人体有许多不同的效应，能够增加氨基酸运输到细胞内，增加葡萄糖运输，增加蛋白质合成，减少蛋白质降解，并且增加RNA合成。因此，IGF1具有促进细胞有丝分裂的生物学功能。

    IGF1R和胰岛素受体有70%的同源性[4]，其胞外配体主要为胰岛素样生长因子(IGFs)[5]。当受体和配体结合后激活胰岛素受体底物1(IRS1)，IRS1再和细胞内其他传递信息的物质作用，从而产生生物学效应。具有促进细胞有丝分裂、细胞增殖的作用，且细胞增殖能力与细胞表面IGF1R 数目呈正比。

　　3.2  IGF1及IGF1R在正常子宫内膜中的表达

    ZHOU等[6]研究结果显示，子宫内膜IGF1的表达位点在内膜间质细胞，腺上皮细胞无表达。IGF1的mRNA在增殖期高度表达，分泌期则明显减弱。GIUDICE等[7]的研究结果与之基本相同，并且显示IGF1在早孕蜕膜组织中的表达明显减弱。在正常子宫内膜中，IGF1在增殖期高度表达，提示其对子宫内膜的增殖有一定的影响。

    IGF1R是一种广泛存在于细胞膜表面的酪氨酸激酶受体，在细胞生存和细胞增殖中发挥着重要作用[8]。IGF1R在子宫内膜上的分布也较广泛,免疫组化和原位杂交法均证实人子宫内膜的间质细胞和腺上皮上都有IGF1R的基因表达,而且在腺上皮上的表达比间质细胞更丰富[9]。本文研究结果与其相一致。

　　3.3  IGF1及IGF1R在子宫内膜癌细胞中的表达及意义

    本研究结果表明，IGF1在子宫内膜腺癌中的过度表达显著高于正常子宫内膜组织，且与内膜腺癌病理分级相关，低分化癌组织中IGF1的表达高于高分化癌组织。说明IGF1在子宫内膜腺癌的发生中具有重要意义。WAKSMANSKI等[9]检测子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常对照人群血清中IGF1浓度，显示子宫内膜癌及子宫内膜不典型增生病人血清中IGF1浓度明显升高，与对照组相比较具有显著性差异（P<0.001）。

　　PETRIDOU等[10]检测子宫内膜癌及正常子宫内膜组织中IGF1、 IGF2表达水平发现，两者在子宫内膜癌组织中呈高水平表达。由此可见，IGF1与子宫内膜腺癌的发生密切相关。

    本文结果还显示，IGF1R在子宫内膜腺癌中的过度表达也显著高于正常子宫内膜组织，且与子宫内膜腺癌病理分级相关，分化程度低的肿瘤细胞IGF1R的表达明显高于分化程度高的肿瘤细胞，与文献的研究结果一致[11]。刘新琼等[12]的研究显示，在子宫内膜癌中IGF1R的表达显著高于正常子宫内膜组织。张俊梅等[13]研究表明，IGF1R的数量与肿瘤的病理分级相关,未分化的肿瘤细胞IGF1R高于分化好的肿瘤细胞。有研究显示，被激活且过度表达的IGF1R能够保护细胞免受诸如足叶乙甙、细胞因子TNFα、TNFβ及其他损伤因子所诱导的细胞凋亡[14]。由此推测，在子宫内膜癌组织中编码IGF1R的基因失调，使IGF1R处于高表达水平，从而促进细胞分裂增殖使其向着恶性表型转化，并抑制肿瘤细胞的凋亡[15]。上述结果表明，IGF1R在内膜细胞的恶性转变及恶性增殖中发挥着重要作用。

    综上所述,IGF1及IGF1R在子宫内膜癌细胞中有表达,且随恶性程度的增加其表达量增加,故测定IGF1、IGF1R的表达量可以预测子宫内膜癌的预后,对临床治疗可能具有一定的指导意义。

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作者单位：青岛大学医学院附属医院妇科,山东 青岛 266003