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【摘要】 目的 探讨抗滋养细胞膜抗体（ATA）、抗子宫内膜抗体（EmAb）、抗HCG抗体对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的影响。方法 选择2002年1月～2007年7月在本生殖医学中心由于不明原因性不育、女方输卵管因素和（或）男方轻度少弱精子症因素不育而接受IVF-ET治疗的妇女140例，其中多次种植失败31例,生化妊娠丢失26例及临床妊娠丢失18例，持续妊娠65例（对照组）。比较各组和对照组妇女各种不育因素所占比例，同时比较各组妇女血清ATA、EmAb和抗HCG抗体阳性率。结果 多次种植失败组、生化妊娠丢失组及临床妊娠丢失组不明原因性不育明显高于对照组（χ2=8.2～14.6,P<0.01）； 多次种植失败组、生化妊娠丢失组及临床妊娠丢失组ATA阳性率显著高于对照组（χ2=6.8～11.8，P<0.01）；生化妊娠丢失组和临床妊娠丢失组抗HCG抗体高于对照组（χ2=4.4、5.3，P<0.05）；多次种植失败组妇女血清EmAb阳性率明显高于其他组（χ2=5.5，P<0.05）。结论 免疫性因素是不明原因性不孕的重要原因；过度表达的ATA可干扰整个妊娠过程，抗HCG抗体的存在能增加IVF-ET临床妊娠流产率和生化妊娠流产率；EmAb可干扰胚胎种植，导致IVF-ET反复种植失败。
【关键词】 子宫内膜
THE CORRELATION OF ANTITROPHOBLAST ANTIBODY, EMAB AND HCG-AB WITH IVF-ET PREGNANCY OUTCOMEYANG ZONG-ZHI, SONG DONG-PO, ZOU SHU-HUA, et al（Medical and Health Care Center For Women and Childen of Qingdao, Qingdao 266011, China） ［ABSTRACT］ObjectiveTo assess the effect of antitrophoblast antibody, EmAb and HCG-Ab on in vitro fertilization and embryo transfer （IVF-ET） outcome.MethodsThis study included 140 infertility women of unexplained reasons, salpingemphraxis and/or male factor undergoing IVF-ET, of whom, 31 with repeated failure of implantation; 26 with biochemical loss of pregnancy; 18 with clinical pregnancy loss. Sixty-five with clinical pregnancy served as control group. The ratio of different reasons of infertility and the rate of antitrophoblast antibody （ATA）, EmAb and HCG-Ab in different groups were compared.ResultsThe rate of immune infertility was higher in repeated implantation failure group, biochemical pregnancy group, and clinical pregnancy loss group than in control group （χ2=8.2-14.6,P<0.01）, the ATA positive rate in those three groups was also higher than that of the control group （χ2=6.8-11.8,P<0.01）. The serum EmAb in the repeated implantation group was higher than the other groups （χ2=5.5,P<0.05）.ConclusionImmune factor is an important cause of unexplained infertility; overexpress of ATA may interfere the whole course of pregnancy. EmAb can interfere embryo implanting and HCG-Ab is one of the reasons of decreasing IVF-ET pregnancy. ［KEY WORDS］Fertilization in vitro; Embryo transfer; Autoantibody
目前体外受精-胚胎移植（IVF-ET）技术的成功率一直在30%～40%之间，影响其成功率的主要因素为胚胎的发育潜能以及胚胎种植的内膜容受性。本中心在实际工作中发现部分病人胚胎评分很好但是反复几次胚胎移植后种植均失败。对于反复种植失败妇女在排除各种干扰因素后考虑其为不明原因性的不孕，而不明原因性的不孕中免疫性因素占80%左右。胚胎种植的母-胎界面免疫功能异常常导致胚胎种植失败或早期妊娠的丢失［１］。母-胎界面过度型自身免疫功能异常表达各种自身抗体可导致不育或早期妊娠丢失。本研究对IVF-ET妇女血清中抗滋养细胞膜抗体（ATA）、抗子宫内膜抗体（EmAb）、抗HCG抗体对IVF-ET妊娠结局的影响进行了分析。现报告如下。
1 资料和方法
1.1 研究对象2002年1月～2007年7月，选择在本生殖医学中心因不明原因性不育、女方输卵管因素和（或）男方轻度少弱精子症不育而接受IVF-ET治疗的妇女140例，年龄为21～40岁。其中研究组包括：平均（32.0±4.1）岁，分为多次种植失败组（两次或多于两次胚胎移植种植失败）31例共73个周期；生化妊娠丢失组26例（移植后14 d血清β-HCG≥20 μU，或者移植后14 d血清β-HCG<20 μU，但是血清β-HCG翻倍增长时间<48 h，移植后20 d未见胎囊，移植后30 d未见胎心；早期临床妊娠丢失组18例（诊断为临床妊娠并于前13周妊娠丢失者）。对照组：即临床妊娠组（移植后B超确定临床妊娠，并持续妊娠至13周以后者）65例。各组病人IVF-ET的相关资料比较均无明显差异。见表1。
1.2 检测方法
1.2.1 血清的制备 病人于胚胎移植日清晨8：00时采集空腹静脉血2 mL，当日即以1 500 r/min离心5～10 min，吸取血清0.5～1.0 mL于Eppendorf管内，在管壁上标注病人的编号和姓名，于-20 ℃保存。溶血、浑浊或脂血标本不予采用。
1.2.2 抗体的检测 按照深圳安群生物制品公司提供抗体检测试剂盒，采用BIOTEK-ELX 800检测各抗体吸光度（A）值。凡样品孔吸光度值 ≥阴性对照孔2.1倍,该样品即为阳性。
2 结 果
2.1 不育因素分析研究组各组中单纯不明原因性不育所占比例均高于对照组（χ2=8.2～14.6,P <0.01）。见表2。
2.2 各组病人ATA、抗HCG抗体及EmAb阳性率比较 研究组各组ATA总阳性率均显著高于对照组（χ2=6.8～11.8，P<0.01）；与对照组相比生化妊娠丢失组和临床妊娠丢失组抗HCG抗体阳性率显著升高（χ2=4.4、5.3，P<0.05）；多次种植失败组妇女血清EmAb阳性率明显高于其他组（χ2=5.5，P<0.05），其余各组之间EmAb阳性率无明显差别。见表3。
3 讨 论
3.1 自身免疫异常与不育胚胎对于母体来说是半异己的异体移植物，胚胎能够成功地逃避母体的免疫攻击有赖于母体正常的免疫机制［2］。母体自身免疫异常时表达的自身抗体如EmAb、抗磷脂抗体、抗卵巢抗体可以导致反复自然流产［3～5］。抗HCG抗体可以降低E2和P水平导致不育［6］。ATA作为滋养层淋巴细胞分泌的抗体，当保护性的封闭抗体（抗TLX抗体）减少时，可以与暴露胎儿细胞特异性抗原结合，导致免疫性流产的发生［7］。根据本研究中不育因素所占比例的比较结果可见，不明原因性不育病人所占的比例为13.6%（19/140），19例原因不明病人中有17例血清中出现不同程度ATA或抗HCG抗体或EmAb的表达。说明免疫性因素是不良的IVF-ET妊娠结局重要原因。目前，有关ATA和抗HCG抗体及EmAb与IVF-ET妇女妊娠结局的关系研究，国内外均未见报道。表1 各组病人IVF-ET的相关资料比较表2 各组病人不育因素的比较表3 各组病人血清自身抗体阳性率比较
3.2 ATA、EmAb、抗HCG抗体对IVF-ET妊娠结局的影响根据本文结果分析各组ATA、EmAb、抗HCG抗体阳性比例时显示，排除了病人年龄，不育因素，移植胚胎数量、质量，以及移植日子宫内膜厚度、类型对胚胎继续发育的影响后，研究组各组ATA总阳性率明显高于对照组，差异有显著性。ATA作为滋养层淋巴细胞分泌的抗体，当保护性的封闭抗体减少时，可以与暴露胎儿细胞特异性抗原结合干扰胚胎的种植和继续发育，影响妊娠的整个过程，最终导致流产的发生。另外，从本研究结果还可以看出，生化妊娠丢失组和临床妊娠自然丢失组病人血清抗HCG抗体阳性率明显高于持续妊娠组和多次种植失败组，说明抗HCG抗体对妊娠的支持作用很重要［8］。虽然在IVF-ET后，给予病人常规的黄体支持治疗，但是HCG被其特异性抗体结合后直接中和了HCG的黄体支持作用，导致黄体功能不全，同时减弱了HCG防止胎儿滋养细胞被母体血液中的抗体及免疫活性细胞识别作用，使妊娠不能维持。另外，抗HCG抗体也可以直接针对产生HCG的滋养层细胞分泌不足而引起胚胎早期发育停止，最终导致流产［9］。比较本研究各组EmAb阳性率的结果显示，多次种植失败组妇女血清EmAb阳性率明显高于其他组。说明EmAb可能干扰胚胎的种植。有学者认为，EmAb能够与子宫内膜中的靶抗原结合,发生抗原抗体反应，破坏子宫内膜结构,使子宫内膜发育不良从而对受精卵的接受性降低,影响胚胎着床［10,11］。综上所述，临床医师应重视不育妇女血清免疫学检查并给予合理免疫治疗，以改善IVF-ET妇女妊娠结局。
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作者单位：（青岛市妇女儿童医疗保健中心，山东 青岛 266011）