血管内皮生长因子C在宫颈癌组织表达及其意义

【摘要】  目的 探讨血管内皮生长因子C（VEGFC）在宫颈癌发生发展中的作用。方法 选取宫颈鳞癌组织68例、宫颈上皮内瘤样变及原位癌（CIN）组织25例、正常宫颈组织12例，采用SP 免疫组化染色方法检测VEGFC的表达。结果 宫颈癌组织VEGFC表达阳性率明显高于正常宫颈组织及CIN组织，差异有显著性（χ2=4.10、4.53,P<0.05）。有淋巴结转移宫颈癌组织的VEGFC表达阳性率明显高于无淋巴结转移组织（χ2=6.11，P<0.05）。VEGFC表达与宫颈癌的病理分级有关，低分化宫颈癌组织中VEGFC表达阳性率高于中高分化癌组织，差异有显著性（χ2=6.01，P<0.05）。结论 VEGFC表达与宫颈癌的发生发展相关，对宫颈癌的分化及淋巴结转移可能起促进作用。

【关键词】  子宫颈肿瘤；血管内皮生长因子C；淋巴转移

 EXPRESSION AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF VEGFC IN CERVICAL CANCER  ZHANG  HONG, WANG  YANKUI(Department of Gynecology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College,  Qingdao 266003, China) ; ［ABSTRACT］ Objective To study the effect of vascular endothelial growth factorC (VEGFC) on the occurrence and development of cancer of the cervix.  Methods Immunohistochemical method was used to detect the expressions of VEGFC in 68 squamouscellcancer (SCC) samples, 25 cervicalintraepithelialneoplasia (CIN) samples and 12  normalcervicaltissue (NCT) samples. Results The expression rate of VEGFC in SCC was manifestly higher than that in the NCT and CIN, the differences were significant (χ2=4.10, 4.53;P<0.05). The higher expression of VEGFC was seen in SCC with lymphnode metastasis than that without metastasis (χ2=6.11,P<0.05), its expression was associated with the pathological grading of cervical cancer, which was higher in the poorly differentiated than that in the moderately and welldifferentiated, the differences were significant (χ2=6.01,P<0.05). Conclusion The expression of VEGFC is involved in oncogenesis and  development of cervical cancer, which may promote the differentiation and lymph node metastasis of this malignancy.

    ［KEY WORDS］ Cervix neoplasms; Vascular endothelial growth factor C; Lymphatic metastasis

    宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，其转移是一个多步骤、多因素参与的复杂过程，除直接蔓延外,最常见的扩散途径即为淋巴转移。血管内皮生长因子（VEGF）家族成员对肿瘤的生长以及转移具有重要的影响,VEGFC为其家族的新成员，可调节肿瘤血管新生以及淋巴血管生成，促进肿瘤细胞生长并通过淋巴系统向全身扩散。目前对VEGFC促进肿瘤生长、侵袭和转移作用的研究已成为热点。本研究采用免疫组织化学方法检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样变及原位癌（CIN）组织、宫颈癌组织中VEGFC的表达，并分析其与临床分期、组织学分级及淋巴结转移的关系。

    1  资料与方法

    1.1  一般资料

    选取2005～2008年青岛大学医学院附属医院妇科手术切除或活检标本105例，术前均未行放疗或化疗。其中正常宫颈组织12例，CIN组织25例，宫颈鳞癌组织68例（其中14例为Ⅱb期以后的病例，仅取活检标本，未行手术治疗）。54例宫颈鳞癌手术切除组织中，无淋巴结转移39例,有淋巴结转移15例；按FIGO 2000分期，Ⅰ期36例，Ⅱa期18例。68例宫颈鳞癌病理组织学分级：高分化6例，中分化21例，低分化41例。

    1.2  VEGFC检测方法

    采用SP免疫组化方法，DAB显色，苏木精复染细胞核，按试剂盒说明操作。兔抗人VEGFC抗体及SP免疫组化试剂盒购自Santa Cruz 公司，DAB显色剂购自福建迈新公司。

    1.3  结果判定

    VEGFC阳性染色呈棕黄色颗粒状，定位于细胞浆。低倍镜下（200倍）选取阳性细胞最密集区，计数5个视野中的1 000个肿瘤细胞，计算阳性细胞占肿瘤细胞的百分率，阳性细胞百分率≥10%为阳性表达，<10%为阴性表达[1]。

    1.4  统计学处理

    采用SPSS 10.0及PPMS 1.5[2]统计学软件进行数据处理,各组间率的比较采用χ2检验和确切概率法。

    2  结    果

    2.1  VEGFC在3种组织中表达的比较

    VEGFC阳性染色呈棕黄色颗粒状，主要位于肿瘤细胞胞浆内，间质中邻近肿瘤细胞的淋巴管和血管内皮细胞中亦有表达。12例正常宫颈组织中除1例VEGFC表达呈阳性外，其余表达均为阴性；在25例CIN组织中5例VEGFC呈阳性散在表达；而在68例宫颈鳞癌组织中VEGFC表达阳性30例，多为弥散性分布。宫颈癌组织VEGFC表达阳性率明显高于正常宫颈组织及CIN组织，差异有显著性（χ2=4.10、4.53,P<0.05）。

    2.2  有无淋巴结转移宫颈癌手术病人VEGFC表达的比较

    54例宫颈癌手术病人中，有淋巴结转移组9例VEGFC表达阳性，阳性率60.00%；无淋巴结转移组中8例VEGFC表达阳性，阳性率为20.51%，二者比较差异有显著性（χ2=6.11，P<0.05）。

    2.3  VEGFC表达与宫颈癌病理分级的关系

    6例高分化宫颈癌病人VEGFC表达阳性1例（16.67%），21例中分化宫颈癌病人VEGFC表达阳性5例（23.81%），因高分化病人样本例数少与中分化合并为一组进行统计，其VEGFC表达阳性率为25.93%；41例低分化宫颈癌病人VEGFC表达阳性22例（53.66%），二者比较差异有显著性（χ2=6.01，P<0.05）。

    3  讨    论

    VEGF家族是一类特异性作用于血管内皮细胞的生长因子，该因子对肿瘤的生长转移具有重要影响。VEGFC是1996年由JOUKOV等[3]克隆并分离出的VEGF家族新成员，在成人主要表达在淋巴结、心脏、胎盘、卵巢、小肠和甲状腺等组织[4,5]，其主要作用于淋巴内皮细胞，介导淋巴管内皮的趋化、细胞增殖和淋巴管增生，有学者称之为淋巴管内皮细胞生长因子。

    本研究采用免疫组化方法检测VEGFC在正常宫颈上皮、CIN及宫颈癌组织中的表达，结果显示，宫颈癌组织VEGFC表达的阳性率明显高于正常宫颈组织及CIN组织，说明VEGFC的表达对宫颈癌的发展起促进作用。VEGFC的表达与病理分化程度有关，在低分化宫颈癌组织中表达阳性率较高，而在中高分化癌组织中表达阳性率较低，提示VEGFC具有抑制癌组织分化的作用。

    此外，本研究结果还显示，VEGFC表达与淋巴转移有关，有淋巴结转移宫颈癌组织的VEGFC表达阳性率明显高于无淋巴结转移组织。邹三鹏等[6]研究显示，VEGFC在淋巴结无转移的宫颈癌组织中的表达阳性率为32.4％，在有淋巴结转移的宫颈癌组织中的表达阳性率则高达85.0％，两者差异有显著性。汪青等[7]研究认为，VEGFC表达与子宫颈癌盆腔淋巴结转移呈正相关。SKOBE等[8]研究结果显示，VEGFC可诱导肿瘤内部及周围组织形成新的淋巴管，并可增强肿瘤细胞的淋巴转移。而HARSHIMOTO等[9]检测了VEGFC在宫颈癌组织的表达及其与宫颈癌临床病理特征的关系，结果显示，VEGFC在存在深部间质浸润及淋巴结转移的宫颈癌组织中表达显著增高。提示VEGFC的表达参与了宫颈癌的淋巴结转移，检测VEGFC的表达可预测宫颈癌的淋巴结转移。

    宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，除直接蔓延外，最常见的转移途径即为淋巴结转移。许多研究证实，宫颈癌组织中淋巴结转移是很强的独立预后因素[10]。本研究结果证实，细胞分化与淋巴结转移是宫颈癌的两个重要预后因素，推测可通过抑制VEGFC的表达阻滞宫颈癌淋巴结转移，可为宫颈癌的基因治疗提供新的策略。

【参考文献】
  [1]TANG R F, ITAKURA I, AIKAWA T, et al. Over expression of lymphangiogenic growth factor VEGFC in human pancreatic cancer[J]. Pacreas, 2001,22(3):258292.

[2]周晓彬,纪新强,徐莉. 医用统计学软件PPMS 1.5的组成和应用特点[J]. 齐鲁医学杂志, 2009,24(1):2932.

[3]JOUKOV V, PAJUSOLA K, KAIPAINEN A, et al. A novel vascular endothelial growth factor,VEGFC,is a ligand for the Flt4 (VEGFR3) and KDR (VEGFR2) receptor tyrosine kinases[J]. EMBO J, 1996,15(2):290298.

[4]许明月,赵发.VEGFC与肿瘤淋巴转移[J]. 现代中西医结合杂志, 2008(6):730.

[5]李伟,张正旭,周军德. VEGFC在乳腺癌中的表达及其意义[J]. 哈尔滨医药, 2005(8):1920.

[6]邹三鹏,张薛榜,麻东辉,等. VEGFC在浸润性宫颈癌中的表达及意义[J]. 陕西医学杂志, 2004,33(27):105.

[7]汪青,王文福. VEGFC表达与子宫颈癌侵袭转移的关系探讨[J]. 蚌埠医学院学报, 2004,29(3):225226.

[8]SKOBE M, HAWIGHORST T, JACKSON D J, et al. Induction of tumor limp angiogenesis by VEGFC promotes breast cancer metastasis[J]. Nat Med, 2001,7(2):192198.

[9]HASHIMOTO I, KODAMA J, SEKI N, et al. Vascular endothelial growth factorC expression and its relationship to pelvic lymph node status in invasive cervical cancer[J]. Br J Cancer, 2001,85(1):93.

[10]GRIGSBY F W, SIEGOL B A, DEHDASHTI F. Lymph node staging by position emission tomography in patients with carcinoma of the cervix[J]. J Clin Oncol, 2001,19(17):37453749.

作者单位：青岛大学医学院附属医院妇科,山东 青岛 266003