子宫内膜样腺癌组织CD147和MMP2表达及意义

【摘要】  目的 探讨CD147与基质金属蛋白酶2（MMP2）在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法 采用免疫组化SP法检测31例正常子宫内膜、73例子宫内膜样腺癌组织中CD147与MMP2的表达情况。结果 CD147、MMP2在子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率分别为76.71%、89.04%，均高于其在正常子宫内膜组织中的表达（χ2=29.734、38.176，P＜0.01）。子宫内膜样腺癌CD147、MMP2表达与手术病理分期、肌层浸润深度、淋巴结转移有关（χ2=4.002～6.627，P＜0.05；P=0.047、0.040）。子宫内膜样腺癌组织中CD147与MMP2的表达一致率为61.64%，两者表达呈正相关（r=0.752,P＜0.01）。结论 子宫内膜样腺癌组织中CD147、MMP2的高表达可能作为子宫内膜样腺癌生物学行为的客观指标。

【关键词】  癌,子宫内膜样；抗原,CD147；明胶酶A；免疫组织化学

THE EXPRESSIONS AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF CD147 AND MMP2 IN ENDOMETRIOID ADENOCARCINOMAYANG YANDONG, ZHANG YINGZI, LIANG KUIXIANG, et al (Department of Obsterics and Gynecology, The Affiliated Hospital of Binzhou Medical College, Binzhou 256603, China); ［ABSTRACT］ Objective To investigate the expressions of MMP2 and CD147 in endometrioid adenocarcinoma (EA),and their relationship with clinicopathologic parameters. Methods The expressions of CD147 and MMP2 were detected in normal endometrium and EA tissues in 31 and 73 cases, respectively, by using immunohistochemical technique. Results The positive expressions of CD147 and MMP2 in EA were 76.71% and 89.04%, respectively, which were significantly higher than those in normal endometrium tissue (χ2=29.734,38.176;P<0.01), these two expressions were associated with pathologic staging, depth of muscular invasion and lymphatic metastasis (χ2=4.002-6.627,P<0.05;P=0.047,0.040). The concordance rate of expressions of CD147 and MMP2 in EA was 61.64%, a positive correlation of expressions existed between the two groups (r=0.752,P<0.01). Conclusion The high expressions of CD147 and MMP2 in EA may be used as an objective marker of biological behavior of this maliglancy.

    ［KEY WORDS］ Carcinoma, endometrioid; Antigens, CD147; Gelatinase A; Imnunohistochemistry

    子宫内膜癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，多见于围绝经期及绝经后的妇女，但在近年来，该病的发病年龄呈年轻化趋势，且发病率明显上升，尤其是与雌激素相关的Ⅰ型子宫内膜样腺癌，发病人数已占到子宫内膜癌病人的80%～90%,严重威胁着广大妇女的生命和健康。恶性肿瘤的侵袭和转移是多步骤过程的结果，基质金属蛋白酶(MMPs)在多种肿瘤的浸润和转移过程中起了重要作用。肿瘤细胞分泌的CD147可刺激MMPs的大量分泌，从而影响肿瘤的生物学行为和临床进展过程。本研究应用免疫组织化学SP法检测CD147和基质金属蛋白酶2（MMP2）在子宫内膜样腺癌组织中的表达,探讨二者与子宫内膜样腺癌侵袭、转移的相关性。

    1  材料和方法

    1.1  标本来源

    收集2000年01月～2006年12月滨州医学院附属医院妇科子宫内膜样腺癌术后标本73例，其中高分化腺癌（G1）27例，中分化腺癌（G2）26例，未分化腺癌（G3）20例；浸润肌层深度≤1/2者51例，＞1/2者22例；淋巴结有转移者23例，无转移者50例；按2000年FIGO分期，Ⅰ期25例，Ⅱ期23例，Ⅲ期25例。同时，收集诊断性刮宫所得的正常增生期子宫内膜31例作对照。所有病例术前均未行放、化疗和雌、孕激素治疗。

    1.2  检测方法

    采用免疫组化SP法，操作严格按SP试剂盒说明进行。兔抗人CD147分子多克隆抗体、三步法染色试剂盒（SP 9001）、DAB试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，MMP2单克隆抗体试剂盒购自福州迈新生物技术公司。每批均用已知阳性切片（试剂公司提供）作阳性对照，用磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照。

    1.3  结果判定标准

    以细胞出现棕黄色颗粒为阳性，其结果根据SHIMIZU等[1]的方法分析。着色范围以阳性细胞数占总细胞数的百分数计分：无着色为0分，≤20%为1分，21%～50%为2分，>50%为3分；着色强度依据着色深浅计分:无着色为0分，浅着色为1分，深着色为2分，上述两项相加为着色程度积分，结果0、1分为阴性(-),2分为弱阳性(+),3分为阳性(),≥4分为强阳性()。

    1.4  统计学处理

    采用SPSS 11.5和PPMS 1.51[2]统计软件进行数据处理，组间比较采用χ2检验、Fisher精确概率法，两者的相关性用Spearman等级相关分析。

    2  结    果

    2.1  CD147、MMP2着色部位

    CD147阳性染色主要定位于细胞膜；MMP2阳性染色主要定位于癌细胞胞浆中，胞膜上亦有少许表达。

    2.2  CD147、MMP2在正常子宫内膜组织和子宫内膜样腺癌组织中的表达

    CD147在正常子宫内膜与子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率分别为19.35%、76.71%，差异有极显著性（χ2=29.734,P<0.01）。MMP2在正常子宫内膜与子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率分别为29.03%、89.04%，差异有统计学意义（χ2=38.176,P<0.01）。

    2.3  CD147、MMP2与子宫内膜样腺癌临床病理特征的关系

    子宫内膜样腺癌CD147、MMP2表达与手术病理分期、肌层浸润深度、淋巴结转移有关（χ2=4.002～6.627，P<0.05；P=0.047、0.040）。MMP2表达与子宫内膜样腺癌病理分级有关(χ2=5.571，P<0.05)，而CD147表达与病理分级无关(χ2=2.420，P>0.05)。见表1。

    2.4  子宫内膜样腺癌组织中CD147与MMP2表达的关系

    CD147与MMP2在子宫内膜样腺癌组织中同时阴性表达和同时阳性表达，且程度相同的分别为7和38例，两者表达的一致率为0.616 4, CD147与MMP2的表达呈正相关（r=0.752，P<0.01）。见表2。

    3  讨    论

    肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的主要生物学特征,也是恶性肿瘤病人的主要死亡原因。肿瘤细胞对细胞外基质成分及基底膜的降解是肿瘤浸润转移表1  子宫内膜样腺癌组织中CD147、MMP2表达与临床病理特征的关系临床病理特征nCD147表达表2  子宫内膜样腺癌组织中CD147与MMP2表达的关键步骤。MMPs是一组重要的细胞外基质降解酶,它通过对细胞外基质中不同成分的降解,在肿瘤浸润转移中起重要作用。作为一个有着23个成员的MMPs大家族,MMP2在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用。MMP2是一种锌离子依赖的蛋白水解酶,又称Ⅳ型胶原酶,由肿瘤细胞和间质细胞以酶原形式分泌,经水解后激活。在病理情况下,一方面通过降解基底膜和包绕肿瘤的基质,突破基质屏障,促进肿瘤浸润转移；另一方面则通过毛细血管增生、新生血管生成等,促进肿瘤生长和扩散[3]。而多项研究表明,MMP2是降解Ⅳ型胶原最主要的酶,活化的MMP2定位于细胞穿透基质的突出部位,具有“钻头”样作用,通过转染MMP2激活因子即膜结合的MMPs,能增强肿瘤细胞穿过基底膜基质的功能[4]。本文结果显示，MMP2在子宫内膜样腺癌组织中高表达，其阳性表达率为89.04%，显著高于正常子宫内膜；随着子宫内膜癌淋巴结的转移、肌层浸润深度、病理分级、手术病理分期的升高,MMP2的阳性表达率也随之增高。由此推测，在子宫内膜样腺癌组织中，由于机体免疫监视功能降低，使肿瘤细胞分泌MMP2增加，导致MMP2高水平表达，降解细胞外基质及基膜能力增强，促进肿瘤新生血管的形成，从而促使肿瘤细胞侵袭周围正常组织并向远处转移。

    CD147是相对分子质量为5万～6万的单次跨膜糖蛋白,属免疫球蛋白超家族成员,在人体内分布广泛,具有多种不同功能。恶性肿瘤细胞侵袭生长时需穿过基膜和间质成分构成的细胞外基质,基膜的主要成分是Ⅳ型胶原蛋白,间质的主要成分是Ⅰ型胶原蛋白,大部分肿瘤细胞可产生降解Ⅳ型胶原蛋白的酶(如MMP2、MMP9),但很少有肿瘤细胞能产生降解Ⅰ型胶原蛋白的酶(如MMP1)来降解间质成分。KANDKURA等[5]对皮肤黑色素瘤进行的研究结果显示，表达CD147的肿瘤细胞能刺激纤维母细胞产生MMP1、MMP2、MMP3和MT1MMP,从而导致胶原酶的溶解活性增加。研究表明,CD147在胃癌、结直肠腺癌等肿瘤中有阳性表达,而且也相应发现在这些肿瘤组织中有MMPs的高表达[6,7]。在部分肿瘤中还发现随着肿瘤恶性程度的增高，CD147的表达也增高，且与肿瘤的浸润和转移相关[8,9]。本研究结果显示，CD147在子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率为76.71%，与其在正常子宫内膜组织表达比较，差异具有显著性，提示CD147在子宫内膜样腺癌的发生发展中发挥了重大作用，这与公莉等[10]研究结果相符。本研究结果还显示，CD147的阳性表达与子宫内膜样腺癌的手术病理分期、肌层浸润深度及淋巴结转移有关，提示临床分期越晚、分化越差的子宫内膜样腺癌，其表达CD147的能力越强。

    本文结果亦显示，CD147与MMP2在子宫内膜样腺癌细胞中多同时表达,二者联合表达率为61.64%,二者表达呈显著正相关。这一结果与目前多数学者认为的CD147能刺激肿瘤周围成纤维细胞产生MMPs的理论相吻合。CD147不仅能刺激肿瘤周围成纤维细胞产生MMP2,而且还能刺激成纤维细胞产生MT1MMP、MT2MMP,而后两者又是MMP2的激活物[11]。同时,CD147还可与MMP2在肿瘤细胞表面形成复合物,这种复合物的形成将MMP2浓缩在肿瘤细胞周围,使得肿瘤细胞周围由多种蛋白酶修饰重塑的微环境发生了破坏,肿瘤细胞周围的基质降解,使肿瘤细胞易于扩散和转移[12]。鉴于CD147和MMP2的阳性表达与子宫内膜样腺癌浸润和转移的密切关系,CD147和MMP2抑制剂治疗肿瘤已进入临床试验阶段，因此进一步探索CD147、MMP2在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其适宜的抑制剂,可为抑制子宫内膜样腺癌的浸润转移提供一条新途径,对于改善子宫内膜癌病人的预后具有重要意义。

【参考文献】
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[8]KANEKURA T, CHEN X, KANZAKI T. Basigin (CD147) is expressed donmelanoma cells and induces tumor cell invasion by stimulating production of Matrix metalloproteinases by fibroblasts[J]. Int J Cancer, 2002,99(4):520528.

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作者单位：滨州医学院附属医院妇产科，山东 滨州 256603