牛羊膜联合应用rbbFGF对Ⅱ度烧伤创面的疗效

【摘要】  　　目的 观察牛羊膜覆盖烧伤创面联合应用牛碱性成纤维细胞生长因子（rbbFGF）对烧伤创面的临床治疗效果。方法 选择以Ⅱ度烧伤创面为主的中小面积热力烧伤病人43例,试验创面面积为1%～2%。将每例病人相同性质的创面等分为3份，分别应用有孔牛羊膜（治疗组）、牛羊膜（对照组1）、凡士林油纱布（对照组2）覆盖烧伤创面,3组均联合应用rbbFGF。结果 治疗组与对照组1和对照组2相比，以深Ⅱ度烧伤创面为主的病人的创面愈合时间明显缩短(F=25.36,q=7.25、3.46，P<0.01)；在治疗以浅Ⅱ度烧伤创面为主的病人过程中，治疗组与对照组2相比创面愈合时间明显缩短（F=12.29,q=5.21,P<0.01），而与对照组1相比没有明显差别（q=2.60,P>0.05）。结论 有孔牛羊膜覆盖烧伤创面及联合应用rbbFGF能加速烧伤创面的愈合。

【关键词】  牛；羊膜；生物敷料；成纤维细胞生长因子2；烧伤；治疗结果

　　THE EFFECT OF COMBINED BOVINE AMNION AND rbbFGF ON SECONDDEGREE BURN WOUND 

　　GUOHUA, XU GUOSHI, LIU BEIBEI, et al

　　(Department of Burn and Plastic Surgery, The Affiliated Qingdao Municipal Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266011, China) ;

　　［ABSTRACT］ Objective To observe the effect of combined bovine amnion and rbbFGF on seconddegree burn wound. Methods Fortythree patients with smallto mediumarea thermal burn were included in this study. The experimental area was1%-2%. The wound of the same nature in each patient was divided into three parts which were respectively treated with perforated bovine amnion (treatment group), bovine amnion (control group 1) and vaseline gauze dressing (control group 2) by combination of rbbFGF.  Results Compared with the control 1 and 2, the wound healing duration of seconddegree deep burns in treatment group was significantly shortened (F=25.36;q=7.25,3.46;P<0.01). For the superficial  burns, the  wound healing duration in the treatment group was shorten than control group 2 (F=12.29,q=5.21,P<0.01), but no significant difference was noted as compared with control group 1 (q=2.60,P>0.05).  Conclusion The combination of perforated bovine amnion and rbbFGF can obviously promote the healing of burn wounds.

　　［KEY WORDS］ cattle; amnion; biological dressing; fibroblast growth factor 2; burns; treatment outcome
   
　　烧伤创面修复的质量可以直接影响病人愈后的生活质量，而烧伤后创面的有效覆盖则是保证创面修复的重要措施。许多生物敷料已广泛应用于烧伤创面，其中包括羊膜类敷料。本研究在以前应用的基础上联合应用牛碱性成纤维细胞生长因子（rbbFGF）治疗Ⅱ度烧伤创面，取得较好效果，现将结果报告如下。

　　1  资料与方法

　　1.1  一般资料
   
　　病人纳入标准：①Ⅱ度烧伤创面为主；②中小面积烧伤病人；③热力烧伤；④创面无严重污染、感染和过多的渗出物。符合上述标准的烧伤病人43例，男22例，女21例，年龄1～80岁，中位年龄32岁,平均烧伤面积(31.50±27.25)％，试验创面面积1%～2%。伤后48 h内入院31例，48 h后入院12例。以深Ⅱ度烧伤创面为主的病人23例，深Ⅱ度创面25处（上肢创面11处，下肢创面10处，其他部位4处）；以浅Ⅱ度烧伤为主病人20例，浅Ⅱ度创面28处（上肢创面12处，下肢创面11处，其他部位5处）。

　　1.2  材料
   
　　牛羊膜的制备：取经检验合格的健康牛分娩后6 h内的新鲜胎膜（由青岛奶牛基地提供），生理盐水反复冲洗3次，1 g/L氯己定浸泡消毒30 min。在无菌操作下取其羊膜层，剪裁为10 cm×20 cm大小。储存： 用4 g/L戊二醛溶液浸泡20 min， 生理盐水冲洗3次，冲洗后浸泡于1 g/L氯己定溶液中存储，每月更换一次氯己定溶液。在无菌条件下，用1.2 mm注射器针头在牛羊膜上打孔，每平方厘米打3～5个孔，即为有孔牛羊膜。rbbFGF由珠海亿胜生物制药有限公司生产。

　　1.3  治疗方法
　　
　　采用同体对照，将每例病人相同性质的创面等分为3份，分别为治疗组、对照组1、对照组2。1.3.1  治疗组  以有孔牛羊膜联合应用rbbFGF治疗。常规清洁、消毒(PVPI)创面,去除坏死表皮，生理理盐水清洗创面2次，干纱布擦干烧伤创面。创面喷rbbFGF (每1%体表面积5 000 U)。生理盐水清洗有孔牛羊膜2～3次后，用干纱布蘸干，覆盖在喷有rbbFGF的创面上，超出创面边缘1 cm。其外覆盖2～3层无菌PVPI纱布。外层用无菌干纱布包扎，松紧适宜。3 d打开检视，若无感染、疼痛加重等情况，不必更换牛羊膜，用碘附消毒覆盖有牛羊膜的创面，并将rbbFGF喷于有孔牛羊膜表面；若有明显感染，创面渗出液过多，处理后原位更换牛羊膜，用上述方法处理创面再重新包扎。

　　1.3.2  对照组1 

　　以牛羊膜联合应用rbbFGF治疗。消毒方法和rbbFGF应用同治疗组。创面用牛羊膜贴敷，其外覆盖2～3层无菌PVPI纱布，外层用无菌干纱布包扎。3 d打开检视，若创面渗出多，形成膜下积液，处理后原位更换敷料，用上述方法处理创面再重新包扎。

　　1.3.3  对照组2 

　　以凡士林油纱布联合应用rbbFGF治疗。消毒方法与rbbFGF应用同治疗组。创面用凡士林纱布贴敷，其外覆盖2～3层无菌碘附纱布，外层用无菌干纱布包扎。3 d打开检视，若创面渗出多，形成膜下积液，处理后原位更换敷料，用上述方法处理创面再重新包扎。

　　1.4  观察指标
   
　　①创面外观：创面渗出、水肿和炎症反应。②创面局部感染：行创面细菌培养，观察有无感染。③换药时创面疼痛情况。④肉眼观察创面开始出现上皮组织及创面愈合时间。⑤对于需要手术的深Ⅱ度烧伤创面，在手术过程中分别取治疗组和对照组1、对照组2创面组织做病理切片观察并对比愈合情况。

　　1.5  统计处理
   
　　所有数据均采用SPSS与PPMS 1.5[1]统计软件进行统计处理，组间比较采用方差分析。

　　2  结果

　　2.1  创面愈合时间
   
　　治疗组与对照组1和对照组2相比较，以深Ⅱ度烧伤创面为主的病人的创面愈合时间明显缩短(F=25.36,q=7.25、3.46，P<0.01)；在治疗以浅Ⅱ度烧伤创面为主的病人过程中，治疗组与对照组2相比创面愈合时间明显缩短（F=12.29,q=5.21,P<0.01），而与对照组1相比则没有明显差别（q=2.60,P>0.05）。见表1。 表1  浅Ⅱ度和深Ⅱ度创面愈合时间比较（略）

　　2.2  辅助检查
   
　　病人在治疗过程中未发现皮疹及其他不良反应。病人在治疗前后血、尿常规及肝、肾功能检查均未见异常。

　　2.3  创面局部感染情况
   
　　病人在治疗过程中,治疗组创面渗出较少并能得到有效引流，均未见明显局部炎性反应征象。对照组1和对照组2中，浅Ⅱ度创面渗出较少，均未见明显局部炎性反应征象；深Ⅱ度创面渗出较多，部分创面有轻度局部炎性反应征象。创面细菌培养，各组均未见致病菌。

　　2.4  换药时创面疼痛情况
   
　　治疗过程中，治疗组牛羊膜贴附良好，更换敷料次数明显少于对照组1和对照组2，从而很大程度上减轻了病人的疼痛。治疗组换药时病人脉率变化不大，疼痛明显轻于对照组1和对照组2。

　　3  讨论
   
　　羊膜作为一种重要的生物敷料覆盖烧伤创面，对加速创面愈合起到了重要的作用。与人羊膜相比，牛羊膜单张面积约6 000～ 7 000 cm2，为人羊膜的6倍左右。厚度15 μm，约为人羊膜的2倍。韧性强于人羊膜，随意性好，而且取材更易，制备简便，成本低廉。羊膜同皮肤一样，也由外胚层生成，为半透明膜，具有独特结构，无血管基质及厚基底膜，含胶原、糖蛋白、蛋白多糖等多种成分，并可表达多种生长因子mRNA 及相关蛋白，有利于细胞生长繁殖，是细胞良好载体[2]。RAVISHANKER等[3]强调了在某些发展中国家的医院建立“羊膜库”的重要性。羊膜具有许多酶参与甾体激素代谢，减轻创面水肿，分娩后羊膜还保留这些功能。早期使用羊膜，宿主吞噬细胞则能更有效地杀死细菌，又能使创面内细胞坏死降解产物激活巨噬细胞系统、成纤维细胞系统[4]。 在扫描电镜下观察牛羊膜的孔隙平均直径小于1 μm， 所以当烧伤创面分泌物渗出较多时，普通牛羊膜并不能使创面分泌物或渗出液中分子质量大的物质有效引流，有加重感染的危险,并且限制了外用药的使用。而有孔牛羊膜覆盖烧伤创面以后，能有效地保护创面，使浅表的感觉神经末梢得到良好的保护，同时，微孔既有利于创面渗出液的引流，又有利于使用外用药物rbbFGF，从而既减少了换药次数又减轻了因换药引起的疼痛和对新生上皮的损伤，使病人疼痛明显减轻，进一步加速创面愈合。
   
　　rbbFGF 可显著缩短各种创面愈合时间, 提高创面的愈合质量, 实验已证实, 成纤维细胞生长因子是体内广泛存在的一类活性多肽, 对各种组织来源的细胞有促分裂与生长维持作用，对创面有明显的促修复作用。其能促进毛细血管再生, 改善局部血运循环, 加速创面愈合, 并为早期植皮修复创面创造条件[5]。 齐鲁医学杂志2010年8月第25卷第4期  Med J Qilu, August 2010, Vol.25, No.4
   
　　烧伤创面以损伤最严重区域为中心分为组织坏死带、血液循环淤滞带和充血带。组织坏死带损伤是不可逆损伤；充血带组织多能自行修复；血液循环淤滞带组织处于中间生态，其发展方向决定着创面的转归，其内微循环血栓形成是创面向坏死方向转化的重要因素。若能改善局部血液循环，阻止血栓形成，可减轻局部继发损害，有利于创面愈合[6]。
   
　　烧伤后1周内，中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞逐步增加，前两者可溶解、吞噬坏死组织[7]。2周后大部分坏死组织被溶解，但免疫细胞仍然大量存在，其作用可能从以分解坏死组织为主，逐渐转向调节表皮细胞、成纤维细胞、毛细血管内皮细胞等分裂增殖、细胞外基质合成等愈合反应为主。对于需要手术的深Ⅱ度烧伤创面，在手术过程中分别取烧伤创面组织做病理切片观察并对比各组的愈合情况，发现治疗组烧伤创面组织中上皮细胞数量明显多于对照组1和对照组2。
   
　　综上所述，在治疗烧伤过程中，有孔牛羊膜覆盖烧伤创面和rbbFGF的有机结合，充分发挥了各自的功能，是一种治疗浅Ⅱ度和深Ⅱ度烧伤创面效果较好的方式。

【参考文献】
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　　[3]　RAVISHANKER R, BATH A S, ROY R. “Amnion Bank”——the use of long term glycerol preservel amniotic membranes in the management of superficial and superficial partial thickness burns[J]. Burns, 2003,29(4):369374.

　　[4]　刘湘梅. 神经生长的生物学与病理学[M]. 北京:科学出版社, 1985:154.
　
　　[5]　曾雪琴,王达利,祁建平. 优拓敷料及贝复济在烧(创) 伤创面的应用体会[J]. 遵义医学院学报, 2007,30(2):162.

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　　[7]　KOVALCHIN J T, WANG R, WAGH M S, et al. In vivo delivery of heat shock protein 70 accelerates wound healing by upregulating macrophagemediated phagocytosis[J]. Wound Repair Regen, 2006,14(2):129137.