微柱凝胶法在婴幼儿血型中的临床应用

    【摘要】 目的  探讨微柱凝胶法在婴幼儿血型鉴定中的临床应用价值。 方法  采用微柱凝胶法和试管法对我院258例婴幼儿患者进行正反血型鉴定，并对其灵敏度及特异性进行比较。 结果  微柱凝胶法鉴定血型的灵敏度及特异性均高于试管法。 结论  采用微柱凝胶法鉴定血型其操作简单、快速、敏感、准确性好，是血型鉴定的好方法。
      
　　
     
　　Detection of the blood type with the gel microcolumn assay in infant
     
　　Ji Yuehong，Zhang Dian'an，Xu Huaishan，et al.
   
　　The Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College，Jiangsu221002.   
     
　　【Abstract】 Objective To evaluate the clinical value of the gel micrcolumn assay for detection of blood type to RBCS in infants.Methods Chose258sick infants in hospital at random，their ABO blood types were detected in parallel by both tube and gel microcolumn assay，comparing the sensitivity and specificity of both methods.Results The gel microcolumn assay is more sensitive and specific.Conclusion The gel micrcolumn assay is a better method to detect blood type to RBCS in infants than the other method.
   
　　Key words gel microcolumn infant blood type
      
　　ABO血型鉴定对临床输血和疾病的诊断十分重要，鉴定错误可以引起严重后果。婴幼儿的血型鉴定常因抗体效价低或红细胞血型抗原形成不足而出现不凝集或凝集很弱，给血型鉴定带来一定困难。微柱凝胶试验是一种血型免疫学检测的新技术，在世界先进国家，该技术正成为血型检测的通用方法 ［1］ ，但在我国尚未普遍开展。本室对我院258例婴幼儿患者的血型分别运用试管法和微柱凝胶法进行检测，发现后者较试管法具有操作简单、灵敏度和特异性高、准确性好和结果清晰易读等优点，现报告如下。

　　1 材料与方法
    
　　1.1 血型血清学实验 按照常规方法进行操作。抗-A、抗-A 1 、抗-B由上海生物制剂研究所制备，抗-AB和B细胞、O细胞由本室自制，A 1 细胞和A 2 细胞由达亚美公司提供。

    　1.2 微柱凝胶试验 严格按照产品说明书操作。微柱凝胶血型卡、低离子介质溶液Ⅱ、ID-Centrifuge12SⅡ离心机及ID-Incubator37SⅠ孵育器，均为瑞士DiaMed公司产品，标准反定型5%红细胞悬液为本室自制，符合质量控制标准。10μl、25μl、50μl、250μl微量移液器为芬兰雷勃集团公司产品。

    　1.3 标本来源 选择我院2003～2004年的婴幼儿住院患者共258例，并将其分为三组:1～7天为Ⅰ组，7天～1个月为Ⅱ组，1～3个月为Ⅲ组，3～6个月为Ⅳ组。

　　1.4 统计学方法 采用行列卡方检验。
    
　　2 结果
    
　　258例婴幼儿ABO血型系统正反定型的鉴定结果见表1。结果表明微柱凝胶法在小于3个月小儿患者的血型鉴定中其正反定型的符合率明显高于试管法（P<0.01），在>3个月小儿患者的血型鉴定中差异无显著性（P>0.05），并且发现婴幼儿血型正反符合率随着月龄的增长而增加。而对于少数正反定型不相符的血标本，其正定型结果良好，99.9%均为4+强凝集，符合微柱凝胶试验结果的判读标准（即正定型必须呈4+凝集才可判读结果）。
    
　　表1 258例婴幼儿ABO血型检测结果 略

　　3 讨论
      
　　婴幼儿ABO血型红细胞定型与血清定型不符在临床上比较常见，为血型工作者的一大难题，究其原因大都与婴儿出生后在其个体发育过程中红细胞表面血型抗原不足、抗体产生量少或不产生有关。一般认为，A、B型新生儿的A、B抗原数量约为成人的1/3，O型新生儿的H抗原约为成人的1/5 ［2］ ;而人体天然血型抗体为IgM，但不同个体因所处环境不同，受天然血型物质刺激的程度与强度也不同，且不同个体对天然血型物质的反应性也不同，从而使某些婴儿不产生天然血型抗体或其效价极低，与相应红细胞不产生可见的凝集反应。因此人们一直在寻找更为敏感的检测技术。另有学者认为，6个月以内的婴幼儿其血清中抗体比较微弱，以标准红细胞检测其血清中的抗体，鉴定意义不大，而应以标准血清测定红细胞抗原来鉴定血型 ［3］ 。微柱凝胶技术是建立在传统的血型血清学方法检测血型基础上的一项全新技术，它是在微柱管中利用凝胶介质进行的一种经过改良的血凝反应—红细胞抗原与相应抗体在凝胶介质中可出现肉眼可见的凝集反应，此方法还能通过正反对照显示出特异，因此克服了血型血清学方法检查的不足;该技术的敏感性也显著提高，文献报道较试管法可提高10倍左右;此外，微柱凝胶法尚有可重复性强、操作简便、易于规范化和标准化等优点。本文选择<6个月的小儿作
    
　　为研究对象，从表中结果可以看出，微柱凝胶法对所有检测对象来说，正反定型的符合率高达70.2%，明显高于试管法（P<0.01）;在前三组中，两种方法亦存在明显差异，新生儿血型卡的正定型结果99.9%为4+，这充分说明微柱凝胶法在对婴幼儿患者的血型检测中确实具有高度敏感性的特点;本文同时还发现微柱凝胶试验的结果清晰易读，且加样量少，因此解决了婴幼儿标本血样少的问题。本试验中婴幼儿红细胞定型与血清定型不符的主要原因仍是由于婴儿相应抗体未产生或产生的量很少引起，这与理论相符。本文认为，使用微柱凝胶技术鉴定血型尤其是鉴定婴幼儿血型确实给血型工作者带来了很大的方便，其结果准确、可靠、敏感性高，这对确保临床安全输血提供了可靠的技术支持和保障，是血型工作者的新武器，具有临床实用意义，值得应用和推广。
     
　　参考文献
    
　　1 Novaretti MC，Jens E，Pagliarini T，et al.Comparison of conventional tube test with diamed gel microcolumn assay for anti-D titration.Clin Lab Haematol，2003，25（5）:311-315.

   　 2 张钦辉.临床输血学.上海:上海科学技术出版社，2000，97-100.

   　 3 王培华.输血技术学.北京:人民卫生出版社，1998，135-136.     

　　作者单位:221002徐州医学院附属医院输血科

　　（收稿日期:2004-11-15）