肠球菌的种类及其耐药性分析

    【摘要】 目的  了解我院肠球菌种类及对其耐药情况进行分析。 方法  用法国梅里埃公司生产的全自动细菌分析仪Vitek-32进行鉴定和药敏试验。 结果  188株肠球菌中以粪肠球菌和屎肠球菌为主共182占总数的96.8%，其中粪肠球菌154株占81.91%，屎肠球菌28株占14.89%。屎肠球菌对环丙沙星、左旋氧氟沙星等喹诺酮类，青霉素，呋喃坦啶，高浓度氨基糖苷类（链霉素2000和庆大霉素500）药物的耐药率明显高于粪肠球菌，而对四环素的耐药率则低于粪肠球菌。未检出对万古霉素耐药的菌株。高浓度庆大霉素耐药株对青霉素、环丙沙星、呋喃坦啶、左旋氧氟沙星、链霉素2000的耐药率明显高于高浓度庆大霉素非耐药株。 结论  临床对肠球菌的检测应达到种的水平，还应检测高浓度庆大霉素的耐药性用以指导临床合理选择抗生素进行治疗。
     
      
　　Analysis of enterococcal species and their drug resistance
     
　　Lu Jiehong，Wu Zhaomin，Chen Huixiong，et al.
   
　　Dpartment of Clinical Laboratory，the First People's Hopital of Shunde，Foshan528300.
   
　　【Abstract】 Objective To study the species of enterococcus and the resistance of enterococcus to antibiotics.Methods Enterococcus were identified and their antibiotic susceptibility tests were done by using automatic bacteri-um analyzing system VITEK-32made by biomerieux.Results One hundred and eighty-eight enterococcus were isolated，there into E.faecalis and E.faecium182strains occupancy96.8%.Among them there were154（81.91%）strains of E.faecalis，28（14.89%）of E.faecium.E.faecium has a higher resistant rate than E.faecalis to Quinolones（include Ciprofloxacin and Levofloxacin），Penicillin，Nitrofurantoin，high concentration Gentamicin and streptomycin.However their resistant to tetracycline was lower than the E.faecalis.None of the isolates showed resis-tance to Vacomycin.The enterococcus strains resistant to high level Gentamicin was more drug resistance than those re-sistant to low level Gentamicin.Conclusion The identification of Enterococcus has to be species，identified the resis-tance of high concentration gentamicin can direct clinical chosen antimicrobial agent rationally.
    
      
　　肠球菌是人体肠道内的正常菌群。但近年来由于广谱抗生素的大量使用，肠球菌作为条件致病菌所致的感染率持续升高，尤其对于那些有严重基础疾病、机体免疫力低下的患者，容易侵入体内或易位，导致局部或全身感染。耐药菌株也日益增多，给临床治疗带来一定的困难。为了解肠球菌的耐药情况，以探讨临床合理用药，我们对2003年6月～2004年9月从我院感染患者标本中分离的188株肠球菌进行回顾性调查分析。结果报告如下。

　　1 材料与方法
    
　　1.1 菌株来源 188株肠球菌来自2003年6月～2004年9月本院门诊和住院患者的临床标本。其中生殖道分泌物（包括阴道分泌物、恶露、前列腺液、精液）58株占30.85%，尿液48株占25.53%，痰40株占21.28%，其它分泌物32株占17.02%，血液4株占2.13%，胆汁4株占2.13%，胸水2株占1.06%。

　　1.2 方法
   
　　1.2.1 菌株鉴定 所有试验菌株均以常规方法由Vetek系统用GPI卡鉴定。
    
　　1.2.2 药敏试验方法 由Vitek仪器直接读出配套的革兰氏阳性球菌GPS-107药敏卡结果。其中庆大霉素高耐株的判读由Vitek仪器直接读出500μg/ml庆大霉素的药敏结果，若庆大霉素500“耐药”为高耐株，否则为非高耐株。
   
　　1.2.3 药敏质控株 粪肠球菌ATCC29212，作为庆大霉素高水平耐药筛选质控菌株，金黄色葡萄球菌ATCC25923作为常规药敏的质控菌株，质控结果均符合NCCLS最新颁布的药敏质控范围。

　　2 结果
    
　　2.1 临床标本分离出肠球菌的主要种别构成比 本试验共分离出188株肠球菌，其中粪肠球菌154株，占81.91%;屎肠球菌28株，占14.89%;其他肠球菌（包括鸟肠球菌，鹌鸡肠球菌等）6株，占3.19%。
   
　　2.2 粪肠球菌和屎肠球菌对8种抗生素的耐药率比较 结果见表1。屎肠球菌对喹诺酮类，青霉素类，高水平的氨基糖苷类药物有很高的耐药性，其耐药率高达75%以上，而且明显高于粪肠球菌对以上药物的耐药率。万古霉素对粪肠球菌和屎肠球菌仍保持高度敏感性，未发现他们耐万古霉素的耐药株。
   
　　2.3 庆大霉素高耐株和非庆大霉素高耐株对7种抗生素的耐药率比较结果 见表2。庆大霉素高耐株对7种抗生素的耐药率，除了四环素以外，均高于非庆大霉素高耐株。

　　表1 粪肠球菌与屎肠球菌对8种抗生素的耐药率比较（略）
    
　　表2 庆大霉素高耐株与非庆大霉素高耐株耐药率的比较（略）
    
　　3 讨论
    
　　在各类感染性标本中分离的肠球菌中可以看出以生殖道分泌物、尿液分离率最多，分别占30.85%、25.53%。而生殖道和泌尿道与肠道的生理位置比较接近，这初步显示，肠球菌的感染可能以易位感染为主。
   
　　通常认为，肠球菌感染以粪肠球菌为主，占85%左右，屎肠球菌占5%～10%，两者占绝大多数 ［1］ 。因此，对此两种肠球菌的耐药现状分析基本上可以反映出肠球菌的整体耐药状况。本文所调查研究的188株肠球菌中以粪肠球菌和屎肠球菌分离率最高，共有182株，占96.8%。其中以粪肠球菌为主，共154株占81.91%;而屎肠球菌28株占14.89%，与文献 ［1］ 的报道相似。
   
　　本研究结果显示，屎肠球菌对青霉素类、呋喃妥因、喹诺酮类、高浓度氨基糖苷类药物的耐药性明显高于粪肠球菌。其耐药机理是因为屎肠球菌产生6-乙酰转移酶，该 霉对抗卡那霉素、妥布霉素、奈布米星 ［2］。而对四环素的耐药性低于粪肠球菌，本试验的188株肠球菌对万古霉素全部敏感。同时值得注意的是屎肠球菌对青霉素的耐药率高达91.69%，这主要是该菌产生的青霉素结合蛋白（PBP5）与青霉素的亲和力减低，从而导致耐药 ［3］ 。由于肠球菌属中各种细菌对抗菌药物的耐药性有差异，因此，临床细菌鉴定肠球菌应到种的水平。在常用抗生素中，粪肠球菌对四环素的耐药率远高于其他抗生素，达到90.28%，而屎肠球菌对四环素的耐药率仅为41.67%，这也说明肠球菌检测到种对指导临床合理用药有现实的意义。
   
　　对于一般肠球菌感染治疗，临床上常用青霉素或氨苄西林与氨基糖苷类药物联合用药。但当肠球菌获得氨基糖苷类修饰酶后会对高浓度氨基糖苷类产生耐药性，从而失去与其他抗生素协同作用 ［4］ 。本试验的182株肠球菌药敏株中，庆大霉素高水平耐药株有88株占48.35%，而非高水平耐药株有94株占51.65%。在肠球菌对氨基糖苷类药物高水平耐菌中，粪肠球菌与屎肠球菌对高浓度庆大霉素的耐药率（43.51%，78.57%）不同于高浓度链霉素的耐药率（55.56%，75%），这说明粪肠球菌与屎肠球菌获得氨基糖苷类修饰酶的耐药基因不完全相同，它们的突变株引起靶位的改变仅对链霉素高度耐药，而与庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素等无交叉耐药性［5］ 。表2结果显示，高耐性肠球菌对常用抗生素的耐药率除四环素外，远远大于非高耐性肠球菌。因此对肠球菌进行药敏试验时必需对高浓度氨基糖苷类药物进行检测以确定能否协同用药并正确选择抗生素治疗。
   
　　虽然本实验未检出耐万古霉素的肠球菌，但不能因此而滥用万古霉素治疗肠球菌感染，以免产生耐万古霉素的肠球菌。临床应对肠球菌检测达到种的水平，并根据其对抗生素的耐药性;尤其是庆大霉素高水平耐药株，选择相应治疗方案。
     
　　参考文献
    
　　1 Bonten MJ，Willems R，Weinstein RA.Vamcomycin-resistant entero-cocci:why are they here，and where dothey come from.Lancet Infections Diseases，2001，1:314-325.
   
　　2 张群智，周惠平.311株肠球菌所致医院感染与耐药分析.中华医院感染杂志，2000，10（4）:257-259.
   
　　3 罗燕萍，白立彦，李俊玲，等.211株肠球菌属细菌对18种抗生素的耐药性征.Chin J Nosocomiol Vol，2004，14（1）:80-82.
   
　　4 马俊春.肠球菌属的高浓度抗菌株及检测方法.上海医学检验杂志，1994，9:60.
   
　　5 Livemore DM，Winstanley TG，Shannon KP.Interpretative reading:rec-ognizing the unusal and inferring resistance mechanisms from resistance phenotypes.J Antimicrob Chemother，2001，48，Suppl1:87-102.
   

　　作者单位:528300广东省佛山市顺德区第一人民医院检验科
   
　　　　　　　524023广东医学院检验系实习生