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【摘要】 目的 比较精子质量分析系统［即:计算机辅助精子分析系统（CASA）］与人工显微镜分析精液质量两种方法。 方法 随机选择200例男性不育患者，采用精子质量分析系统与人工显微镜方法分析其精液，并对其结果进行比较。 结果 精子质量分析系统获得的精子密度的平均值为（10.27±6.22）×10 6 /ml，精子活率为（30.2±13.9）%，精子A+B活动力为（19.5±17.3）%。 结论 精子质量分析系统具有高精确性，更符合最新WHO男性不育实验室诊断标准的要求，推荐在临床工作中使用该系统来分析精子特性，尤其是精子动力学量化数据。
【关键词】 精液分析;精子质量分析系统;人工显微镜方法
Comparison of semen quality analyses of computer-aided sperm analysis（CASA）with routine microscopic analysis（For:a report of200infertile cases）
JIANG Dan，GONG Chun-jing，LIAO Hong.
Shuguang Hospital，Shenzhen，Guangdong518001，China
【Abstract】 Objective To compare semen quality analyses of computer-aided sperm analysis（CASA）with routine microscopic analysis.Methods Two hundred men infertile patients were selected at random as research subjects，and semen was performed with CASA and microscopic analysis，then we compared and analysed the results.Results The average value of semen density was（10.27±6.22）×10 6 /ml，the percent of live sperm was（30.2±13.9）%and the moving percent of A+B was（19.5±17.3）%.Conclusion CASA was more conformable to the requirements of latest WHO laboratory manual for the examination of human semen，and worth recommending for the clinical analysis of semen features，especially sperm density.
【Key words】 semen analysis;CASA;routine microscopic analysis
精液质量分析是判断和评估男性生育能力最基本和最重要的检查方法。传统的手工分析对精液量、液化时间、酸碱度、粘稠度、精子活力、精子活率、精子形态等能较好的完成，但在分析精子运动能力方面，却缺少量化的判断指标。精子质量分析系统［即:计算机辅助精子分析系统（CASA）］是以WHO精液检验标准为依据，将现代化的计算机技术和先进的图像分析技术应用于精子质量分析的临床检验，对精子的密度、活力、活率、运动轨迹的特征等几十项项目进行自动化定质定量的检测。本文采用国产精子质量分析系统对200例不育男性的精液质量进行分析，并与光学显微镜下人工方法比较，以探讨精子质量分析系统的临床意义。
1 对象与方法
1.1 研究对象 200例男性不育患者均来自2004年我院男性科门诊，年龄25～40岁，身体健康，婚后正常性生活2年不育，无外伤及遗传性疾病家族史，无性功能障碍史，体检未发现有明显睾丸、附睾及输精管异常。禁欲3～7天后手淫或用取精器取精液于干燥消毒量杯内，置35℃水浴箱内，液化后用于精液质量分析。
1.2 检测仪器 彩色精子质量分析系统（徐州信步公司提供），CX-21OLYMPAS显微镜，MAKLER精子计数板（南京）。
1.3 方法
1.3.1 人工显微镜分析 每份精液标本均采用光学显微镜（×100）倍和（×200）倍，按WHO规定的标准和方法进行精液质量分析。记录精子密度、活率、活动力等指标。为提高阅片的准确性，同一份标本由两位专业检验医师进行分析。
1.3.2 彩色精子质量分析系统 同一精液标本分别在（×100）倍和（×200）倍显微镜下连续5次测定，以检测其重复性，同时记录精子密度、活率、活动力及其它若干相关指标。
1.3.3 采用WHO1999年标准 ［1］ 进行分析 主要检测指标包括精液量（<2ml或>6ml为异常）、液化时间（>60min为异常）、酸碱度（pH<7.2或>8.0为异常）、精子密度（<20×10 6 /ml为少精子症）、精子活动力（A+B<50%且A<25%为弱精子症）以及其它动力学量化指标。
1.4 统计学分析 精子质量分析系统重复性分析，精子质量分析系统和人工显微镜分析的相关性对比均采用t检验。
2 结果
2.1 精子质量分析系统的重复性分析 同一份标本连续5次检测，精子密度、活率、活动力的指标的变异均很小，（×100）倍和（×200）倍显微镜下各检测参数差异无显著性（P>0.05），反映该系统有较好的重复性。结果见表1。
2.2 精子质量分析系统和人工显微镜分析结果的相关性 200份不育患者精液经两种方法检测分析的结果，其中精液的液化时间、酸碱度、外观、精液量、粘稠度及气味等的检测方法是一致的，其它检测结果具有高度相关性，r值均>0.9。结果见表2。
表1 精子质量分析系统重复性分析（略）
2.3 精子质量分析系统的精子动力学的量化数据 被检精子总数（200±20）条，精子密度（10.57±6.22）×10 6 ，精子活率（21.5±14.3）%，A级精子（5.23±4.91）%，B级精子（13.09±11.64）%，前向性（21.28±15.09）%，C级精子（31.5±10.56）%，直线性（16.8±10.9）%，D级精子（50.3±23.6）%，摆动性（48.12±14.2）%，平均路径速度VAP（16.34±6.99）μm/s，平均曲线速度VCL（17.61±6.23）μm/s，平均直线运动速度VSL（7.36±4.46）μm/s，平均侧摆幅度ALH（0.91±0.38）μm，平均鞭打频率BCF（2.01±1.52）次/s，运动的线性度LIN（27.69±8.21）%，运动的前向性STR（30.6±16.24）%，运动的摆动性WOB（46.32±16.88）%，平均移动角度MAD（6.88±5.02）%。同时统计出曲线运动速度分布图，直线运动速度分布图，路径运动速度分布图，精子活力等级分布图，拍摄出精子运动轨迹图等。
表2 精子质量分析与人工分析主要参数的相关性（略）
3 讨论
精确客观的精液检查结果是评价男子生育能力的基础方法和重要手段 ［2］ 。由于存在精液的生理性波动，生活中的各种不良影响如过度疲劳、酗酒等，使得精液分析的结果波动较大，对于客观评价成年男子生育能力和不育症治疗效果是非常不利的。目前临床实验室仍普遍使用光学显微镜下人工方法分析精液质量，但由于精液的有关参数在显微镜下很大程度上有赖于检查者的经验和主观判断，用人眼很难被准确分析，无法给出更客观准确的参数，且长时间检验易造成眼疲劳，以及检验人员水平参差不齐等，都会造成检测结果的误差 ［3，4］ 。因此，需建立一种客观评价精液质量的方法，以提高分析结果的准确性，科学性和可靠性。
精子质量分析系统是利用微机控制下的图像处理板所具有的连续快速地抓拍功能来实现的。显微摄像系统对精子动态图像随机连续拍摄，然后对每一幅图像分别进行精子识别，运算，提取出图像中精子的位置参数并加以记录，进而求出精子的轨迹，最后根据这些轨迹计算出精子运动的各项参数，能得到人工方法的所有指标及其无法得到的指标。该系统的重复性试验和其与人工检测的相关性试验证明了该系统的优异性能。
本文认为，采用精子质量分析系统评价不育患者的精液质量可以克服单纯显微镜下人工分析方法的缺点，能客观评价精子活动的模式，对精子动力学进行量化，符合最新WHO男性不育实验室诊断标准的要求，对科研和临床都有较大帮助，所以推荐使用精子质量分析系统来分析精子特性。当然，为了准确评价精子质量分析系统的临床意义，建议应建立精子质量分析控制体系，并增强各实验室结果的可比性，使精液质量分析评估更真实可靠。
【参考文献】
1 WHO.Laborary manual for examination of human semen and sperm cer-vical mucus interaction.4th ed.Cambridge University Press，1999，8-10，90-92.
2 吴立君，吴明章.正常生育力和精子活力低下不育者精子运动计算机辅助分析.生殖医学杂志，1996，5（4）:211-216.
3 Mohammad SN，Barratt CL，Cooke ID，et al.Direct assessment of hu-man spermatozoa using a cryomicroscope and computer-aided sperm analysis.Hum Repord，1996，11（12）:2687-2692.
4 黄宇烽，许瑞吉.男科诊断学.上海:第二军医大学出版社，1999，407-420.
（编辑悦 铭）
作者单位:518001广东深圳，深圳曙光医院检验科