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【摘要】 目的 对近十年文献有关昆明山海棠（THH）的毒性研究，不良反应进行分析，提示临床合理应用THH。方法 运用中国医院数字图书馆（中文全文检索），对THH的毒性研究进行分析。结果 实验研究发现THH的非整倍体效应、致突变作用是肯定的，但医药界鲜有报道，未引起重视。结论 应加强THH及其制剂的合理应用，在充分发挥其较好疗效的同时，重视其非整倍体诱发效应，减少生殖毒性及其他不良反应，降低隐性不良社会问题。
【关键词】 昆明山海棠；毒性；非整倍体；分析
昆明山海棠［Tripterygium hypoglaucum(Level) Hutch,简称THH］与雷公藤同属卫矛科植物，又名火把花、金刚藤，含有二萜类及生物碱类等活性成分。具有抗炎、免疫抑制等药理活性，临床上用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、红斑狼疮、银屑病，有片剂、胶囊剂等剂型，疗效良好。THH属于有毒中药，中医认为“有大毒”，所含总生物碱是其主要毒性成分，并显示出肯定的细胞毒性。近年来研究发现昆明山海棠有抗生育、诱导染色体畸变、诱导细胞凋亡等作用。通过对THH的毒性研究详细分析，较全面地评价THH的毒性，以期引起临床重视THH的合理应用，注意保护遗传物质免受损伤，减少相关疾病的发生，以达到安全、有效、合理的用药原则。
1 生殖毒性
细胞分裂过程中的染色体异常分离，可造成细胞中整条染色体的获得与丢失，从而形成非整倍体。非整倍体是重要的遗传损伤类型，并且是人类群体中许多遗传疾病、生殖异常和癌症的起因，构成严重的社会问题和经济问题。据报道：50%的人类自发流产是由于非整倍体而引起的［1］，异常新生儿中，非整倍体（三体）的频率也较高［2］。实验研究证实THH可能是非整倍体诱发剂，汪旭等［3］以黑腹果蝇的非整倍体测试品系评价了云南地方中草药昆明山海棠水抽提物在动物生殖细胞中的非整倍体诱发效应。结果发现，在所有雌雄成虫口饲染毒组中，THH显著诱发生殖细胞非整倍体，从而导致XO及XXY例外子代频率显著升高（P<0.001～0.05）。表明：THH能够在果蝇生殖细胞形成过程中导致染色体的丢失和不分离。曹佳等［4］使用次要卫星DNA探针对THH诱导的NIH3T3细胞MN的FISH结果显示THH在本实验的10～60μg/ml的剂量条件下，诱导的MN约62.1%～68.4%均为FISH阳性，35.9%～42.2%的MN为CREST阳性，其中又约15.5%～31.6%的MN含有2条以上的染色体。可见THH诱导的MN主要是来源于染色体异常分离后丢失的整条染色体，确实具有较强的非整倍体诱发效应。马明福等［5］研究表明，THH对精子染色体有明显的畸变效应，且随着剂量增加染色体畸变率升高，并对人精子染色体有致断作用。唐瑛等［6］采用Ames法试验对昆明山海棠胶囊（THH、淫羊藿的提取物）进行了诱变性研究，结果表明有低中度的遗传毒性。又通过骨髓微核试验证明可使NIH小鼠嗜多染红细胞微核率显著增高（P<0.01），并呈剂量依赖性，有致突变的作用。细胞生物学提示在肌醇脂信号通路中，一些外界信号分子可与细胞表面受体结合，使4，5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）水解为1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DAG），DAG则可激活蛋白激酶C（PKC）［7］。PKC是某些肿瘤的诱发因子，可引起细胞对外源信号的应答［8］，在肿瘤诱发剂作用下对刺激细胞有丝分裂有重要作用［9］；PKC的升高可以介导C—有丝分裂的发生。汪旭［10］的实验结果显示，THH能使细胞DAG含量显著升高，同时使C—有丝分裂细胞频率显著上升。可见，THH可能通过细胞肌醇酯信号通路的介导，诱发哺乳动物细胞非整倍体。丁银润等［11］实验评估了THH在精子发育过程中的非整倍体诱发作用。结果发现，THH处理小鼠后精子非整倍体频率显著升高，暗示THH在生殖细胞中的非整倍体诱发效应与体细胞类似。THH在哺乳动物生殖细胞中具有染色体不分离诱发效应，而此遗传不稳定因素又引发非整倍体，因此，THH为一种哺乳动物生殖细胞非整倍体诱发剂。丁银润［12］又实验，选择了小鼠常染色体即8号染色体进行FISH，评价了THH在小鼠骨髓间期白细胞中的特异染色体不分离诱发效应。结果发现，THH处理小鼠后，8号染色体数目异常细胞数显著升高。该结果不仅进一步证实了THH在哺乳动物体细胞中的非整倍体诱发效应，同时将THH非整倍体诱发效应与特异染色体的异常分离直接衔接，更为精确地分析了THH的遗传靶标。后续细胞生物学研究证明，THH具有抑制微管蛋白体外聚合效应［13］；具有明确的诱导HRRT基因突变作用［14］。王晓燕等［15］实验评估了THH在小鼠精子发育过程中的非整倍体诱发作用，结果显示，THH可能含有与秋水仙素（COL）类似的纺锤体毒性成分，存在诱发哺乳动物生殖细胞非整倍体的现实性与诱发人类生殖细胞非整倍体的可能性。刘胜学等［16］研究结果发现，随着THH总生物碱作用剂量的增加，L5178Y细胞tk位点的突变频率显著增加，诱发突变是自发突变的2～9倍，并且主要表现为大集落突变体的增加，表明THH总生物碱能够诱发tk位点的突变，而且以基因小突变为主。证明THH有较确切的致基因突变效应和可能存在的染色体损伤作用。
2 不良反应
昆明山海棠常见的副作用有口干、胃痛、恶心、食少、闭经、头昏、心悸、色素沉着、多汗、口角糜烂、发热等。近年临床报道不良反应有以下几类，应引起重视。
2.1 生殖系统 用药后可导致可逆性女性闭经和男性精虫减少［17］。
2.2 消化系统 一女性类风湿性关节炎患者按医嘱（一次3片，一日3次）服用昆明山海棠片至第三天，因肢节疼痛加剧而擅自增服6片，服药半小时后，出现胸闷不适、恶心、旋即头晕、出冷汗及呕吐等胃肠道副作用［18］。
2.3 肾毒性 患者，女，23岁，因血小板低服用昆明山海棠片（一次2片，一日3次），用药2次后出现膀胱下坠感，尿意频繁，且尿量极少等肾功能的不良反应［19］。
2.4 肝损伤 患者，女，因患皮肌炎服用昆明山海棠片治疗，6片/d，服药20余天后出现腹胀纳差、乏力、巩膜黄染，ALT>500U，TBil 8.3mg等药源性肝损害［20］。
2.5 死亡1例 患者，男，因患寻常性银屑病，医嘱昆明山海棠生药50g/d煎服3次，患者因治病心切，将药量自行加大至200g/d，煎好后随时饮用，3天半内已服过生药500g的煎剂。皮损虽已部分开始消退，但感上腹疼痛，嘱将药量减为40g/d，次日仍诉上腹疼痛而停服，下午引起中毒性休克而死亡［21］。
3 讨论
多项研究证明了THH有非整倍体诱发效应和致突变作用，对其中主要的有效成分做进一步的毒性评价是很重要的。非整倍体产生是一个复杂的过程，其产生不但涉及遗传物质，还涉及到细胞器、细胞膜及膜上的某些受体以及细胞信号传递系统等。因而，非整倍体诱发剂这一类遗传毒性物质的检测和监控需要不同的技术系统和检测思路。THH具有遗传毒性，包括临床应用中发现有其他不良反应，很有必要进一步做更加明确的研究。THH临床应用中应在临床医师的指导下，依据使用原则，严格掌握药物的适应证，必须按常规剂量服用，禁止盲目超量或增加服药次数，并且应加强其ADR的监测。总之，该药物在应用于人类，尤其生育年龄的个体时，应非常慎重，以避免造成具有遗传缺陷的后代产生。从而减少毒副反应的发生，减少癌症、人类自发流产和异常新生儿发生，降低不良社会问题和经济问题。
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(编辑：文 静)
作者单位： 250014 山东济南，山东省千佛山医院药剂科