点击显示 收起
【摘要】 目的 探讨红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺乏者血液中输入正常红细胞后G-6-PD活性的变化，G-6-PD酶活性升高后患者红细胞抗氧化能力的改善情况。方法 (1)G-6-PD酶活性用酶动力学法检测；(2)红细胞与氧化性药物在体外共同孵育，以出现溶血时间顺序判断抗氧化能力改善。结果 (1)红细胞体外实验G-6-PD缺乏组孵育2h后出现溶血，而加入正常红细胞的混合组与G-6-PD缺乏对照、正常红细胞对照组一样孵育3天均未见溶血；(2)2例疟疾患者输血前红细胞G-6-PD酶活性分别为0.51IU/gHb和0.49IU/gHb输血后G-6-PD活性分别为2.69IU/gHb和2.81IU/gHb，输血后服用氯喹临床上未出现溶血症状和体征，血清胆红素未见明显变化（P＞0.05）；另1例溶血患者输血后溶血未见持续，血清胆红素下降（P＜0.05）。结论 加入正常的红细胞，可提高G-6-PD缺乏者血液中G-6-PD酶活性，从而能避免或减轻因血液中氧化性物质引起的溶血。
【关键词】 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症；输血
遗传性红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺乏症是我国华南及西南各省最常见的遗传病之一，它是蚕豆病、伯氨喹啉类溶血、新生儿黄疸、某些感染性溶血及非球形细胞溶血性贫血的遗传基础。对已确诊为G-6-PD缺乏的患者临床上禁用氧化性药物及蚕豆食品，以预防溶血［1］；而发生溶血时，输血仍然是最有效的抢救方法，但应特别注意供血者有无G-6-PD缺乏，否则输血后溶血持续［2］。有人将对蚕豆敏感者的红细胞用21铬标志输入G-6-PD缺乏的患者的血液中，可见破坏加速，但将正常人红细胞输给发作期患者，则红细胞生存期正常［3］。G-6-PD缺陷与溶血的关系除与种族性别有关外，还与新老红细胞酶活性的比例及外源性的影响（如服用氧化性药物、蚕豆、感染、酸中毒等亦常为发生溶血的诱因）有关［1］。笔者研究G-6-PD缺乏者受血后G-6-PD酶活性的变化，发现加入正常的红细胞，可提高G-6-PD缺乏者血液中G-6-PD酶活性，从而能避免或减轻因血液中氧化性物质引起的溶血。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 对象 临床病例来自我院内科门诊和住院3例。
1.2 G-6-PD缺乏的全血标本 来自我院产科和保健院产科脐血G-6-PD筛查标本。
1.3 试剂与方法
1.3.1 试剂 氯喹片：由上海中西药业股份有限公司生产；G-6-PD定量试剂由元生生物科技股份有限公司生产。
1.3.2 方法 G-6-PD酶活性定量检测在半自动生化分析仪上完成，参照说明书操作。(1)红细胞体外实验分四组:①G-6-PD缺乏红细胞；②正常和G-6-PD缺乏混合红细胞；③G-6-PD缺乏红细胞对照；④正常红细胞对照。G-6-PD缺乏红细胞和正常红细胞各用生理盐水洗涤4次，浓缩的红细胞备用。配制10倍于血液药物浓度（0.08～0.56mg/ml）的氯喹溶液(3.5mg/ml)备用。体外实验操作见表1。
表1 红细胞体外实验
37℃孵育，开始每1h观察一次，8h以后每8h观察1次溶血情况观察72h，记录出现溶血的时间。(2)分别测定缺乏、正常、混合红细胞G-6-PD酶活性。(3)2例内科门诊确诊为疟疾的G-6-PD缺乏患者服用氯喹前输入4U正常RBC，输血前后定量检测G-6-PD活性，并观察临床溶血情况；氯喹服用方法为：第一天服4片，第二、三天每天2片，服用3天。1例G-6-PD缺乏者因食物引起溶血收住院，入院后输入4U正常RBC，观察继续溶血情况。
2 结果
(1)缺乏、正常、混合红细胞G-6-PD酶活性分别为0.29IU/gHb、7.91IU/gHb、4.03IU/gHb。(2)红细胞体外实验结果（溶血出现时间）见表2。(3)2例疟疾患者输血前红细胞G-6-PD酶活性分别为0.51IU/gHb和0.49IU/gHb输血后G-6-PD活性分别为2.69IU/gHb和2.81IU/gHb，输血后服用氯喹临床上未出现溶血症状和体征，血清胆红素未见明显变化（P＞0.05）；另1例溶血患者输血后溶血未见持续，血清胆红素下降（P＜0.05）。
表2 红细胞体外实验结果
3 讨论
G-6-PD缺乏症是一组溶血性疾病,临床上主要表现为蚕豆病、新生儿黄疸、药物及感染诱导溶血性贫血，其发病基础是G-6-PD基因点突变或缺失导致红细胞中该酶活性的不同程度降低，在外界氧化压力下使红细胞发生一系列病理改变，从而导致溶血。WTO早就根据酶活性和临床表现将G-6-PD缺陷变异型分为五大类［3］；(1)酶活性严重缺陷伴CNSHA（先天性非球形红细胞溶血性贫血），酶活性可达0～5%。(2)酶活性严重缺陷，其活性＜10%。(3)酶活性轻～中度缺陷，其活性为10%～60%。(4)酶活性轻度降低或正常，其活性为60%～100%。(5)酶活性增加高于正常4～5倍。一般酶活性达30%以上即可维持红细胞寿命不致溶血［1］。陈福雄等［4］认为G-6-PD正常和缺乏的红细胞对过氧化刺激有着不同的反应，G-6-PD缺乏的红细胞由于先天性的还原型辅酶Ⅱ生成能力不足对过氧化损伤缺乏正常红细胞所具备的抵抗能力。陈茂余等［5］观察献血者进食蚕豆后不同时间（2～4h，12～24h，2～3天）采血对蚕豆病儿输血的影响，各观察组临床症状与外周血Hb的恢复、G-6-PD活性的改变和对照组比较无明显差别，各组均未发现再溶血病例，提示蚕豆病儿在急性溶血后“不应期”内输入进食了蚕豆的献血者的血液无明显不良影响。由于新产生的红细胞其G-6-PD活性旺盛，随着红细胞的衰老其酶活性亦渐降低，所以G-6-PD缺陷与溶血的关系除与种族性别有关外，还与新老红细胞酶活性的比例及外源性的影响（如服用氧化性药物、蚕豆、感染、酸中毒等亦常为发生溶血的诱因）有关笔者研究G-6-PD缺乏者受血后G-6-PD酶活性的变化，应用于临床溶血的预防和治疗，结果：(1)红细胞体外实验G-6-PD缺乏组孵育2h后出现溶血，而加入正常红细胞的混合组与G-6-PD缺乏对照、正常红细胞对照组一样孵育3天均未见溶血；(2)2例疟疾患者输血前红细胞G-6-PD酶活性分别为0.51IU/gHb和0.49IU/gHb输血后G-6-PD活性分别为2.69IU/gHb和2.81IU/gHb，输血后服用氯喹临床上未出现溶血症状和体征，血清胆红素未见明显变化（P＞0.05）；另1例溶血患者输血后溶血未见持续，血清胆红素下降（P＜0.05）。结果表明，由于正常红细胞的加入，提高了混合红细胞G-6-PD酶的活性，较高的G-6-PD酶活性能产生足量的NADPH（还原型辅酶Ⅱ），NADPH将GSSG（氧化型谷胱甘肽）还原成GSH（还原型谷胱甘肽），GSH可降解氧化物质，从而保护红细胞膜蛋白及其它细胞内酶的硫氢基免于氧化变性，红细胞免于破坏［1］。结果提示，加入正常的红细胞，可提高G-6-PD缺乏者血液中G-6-PD酶活性，从而能避免或减轻因血液中氧化性物质引起的溶血。
【参考文献】
1 陈觉凝．葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷的研究现状．中国实用儿科杂志，1999，14(2):113-114.
2 杜传书．遗传性红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症．中山医科大学学报，1992，13(2):1-7.
3 陈灏珠.内科学．第四版．北京：人民卫生出版社，1996，552-555.
4 陈福雄,张瑶苹,吴梓梁,等.还原型辅酶Ⅱ在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏新生儿黄疸中的作用.中华医学杂志,1997,77(4):278-281.
5 陈茂余,刘仲魁,刘超,等.四川遂宁地区献血者G-6-PD调查及进食蚕豆对蚕豆病儿输血的影响.中国输血杂志,1994,7(2):58-60.
(编辑：海 涛)
基金项目：惠州市科技计划项目(惠州市科委Y79)
作者单位： 516300 广东惠州，惠州市惠东县人民医院检验科(△内科)