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【摘要】 目的 建立复方刺五加片的质量标准。方法 用HPLC法测定刺五加中异嗪皮啶的含量。结果 异嗪皮啶在0.02～0.20g范围内呈良好的线性关系;r=0.9991，平均回收率98.5%，RSD为1.1%。结论 所建立的方法简便可行，重现性好，为复方刺五加片质量控制提供了方法。
关键词 复方刺五加片 薄层色谱 高效液相色谱 异嗪皮啶
复方刺五加片收载于《中华人民共和国药品标准中药成方制剂》第四册上，是由刺五加、当归、玉竹、黄芪、维生素B 1 五味中药组成，具有补气养血、益智安神、补肾健脾、扶正固本的功能，主要用于气血两亏所致的全身无力、心悸失眠、食欲不振等的治疗。为了有效地控制该制剂的质量，对方中的刺五加中的异嗪皮啶进行了含量测定，可有效地控制药品质量。 1 仪器及材料 LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器（岛津），N-2000数据处理机（浙江大学智能工程研究所），色谱柱:（VP-ODS150mm×4.6mm，5μm）。异嗪皮啶由卫生部生物制品鉴定所提供。复方刺五加片（某制药股份有限公司提供）。HPLC用甲醇和水分别为色谱醇和重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。 2 含量测定及结果 照高效液相色谱法（中国药典2000年版一部附录ⅥD） ［1］ 测定。 2.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂:0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈（85:15）为流动相;检测波长为244nm。理论板数按异嗪皮啶峰计算应不低于2000。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取异嗪皮啶对照品10mg，置200ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀;精密量取5ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1ml中含异嗪皮啶5μg）。 2.3 供试品溶液的制备 取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过三号筛），精密称取适量（约相当于20片的重量），精密加入甲醇50ml，精密称定，超声提取20min，放冷，用甲醇补足损失的重量，滤过，取续滤液25ml，蒸干，残渣加0.2%的氢氧化钠溶液20ml溶解，转移至分液漏斗中，用氯仿60ml提取2次（各20ml），弃去氟仿液，水液用盐酸调pH至1～2，用氯仿提取4次，每次20ml，合并氯仿提取液，至水浴上蒸干，残渣用甲醇转溶至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（45μm）滤过，取滤液，即得。 2.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。取本品三批，分别按上述方法制得供试品溶液，进样20μl，结果见表1。 表1 两种溶液峰面积结果 2.5 标准曲线与线性范围 精密吸取上述对照品溶液制 备法中的第一步溶液（50μg/ml）1.0、2.0、5.0、10.0、15.0ml，分别置于50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，对5份样品依次进样。每一浓度进样2次，测定异嗪皮啶峰面积平均值，以峰面积为纵坐标，异嗪皮啶进样量（μg）为横坐标，绘制标准曲线，线性回归得回归方程:Y=29248.7X+62.04，相关系数r=0.9991。由此可见，异嗪皮啶在0.02～0.20μg范围内呈良好的线性关系。 2.6 精密度试验 精密度吸取同一批号（20020701）样品溶液（20μg），重复6次测定异嗪皮啶峰面积值为:475205.59、469908.25、476864.26、472964.74、465277.21、471277.54，RSD0.9%。 2.7 重复性试验 取同一批号（20021002）样品6份，分别按样品溶液制备方法制备，测定葛根素峰面积值为:510690.71、501841.68、512649.72、498889.67、507745.70、496667.28，（μg/片）17.2、17.0、17.4、16.9、17.2、16.8，样品中异嗪皮啶平均含量为17.1μg/片，其RSD为1.2%。 2.8 加样回收率试验 取同批样品，按含量测定项下的样品液制备方法制得供试品溶液，按上述色谱法条件测定，计算加样回收率，结果见表2（表中重量单位为μg）。 表2 加样回收率试验结果 2.9 阴性实验 取处方中除刺五加以外的其它药材，按正文制法制得刺五加阴性样品，照上述溶液制备方法制备阴性对照溶液，阴性试验无异嗪皮啶对照品的对应峰。 3 讨论 用HPLC对异嗪皮啶作含量测定的方法简便、快速、重现性好，可供修订片复方刺五加质量标准时参考。 参考文献 1 中国药典委员会.中国药典2000年版.一部.北京:化学工业出版社，2000:附录. 作者单位:472061河南省南阳市药品检验所 （收稿日期:2004-03-20） （编辑李 阳）