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提取组织中RNA进行基因表达水平的检测是分子生物学中常用的实验技术，是RT-PCR，cDNA microarray和cDNA差异显示文库等技术实施的先决条件，在肿瘤的临床基础性研究中应用十分广泛 ［1］ 。然而RNA极易降解，操作稍有不当，极易造成实验失败。
目前常用的从组织中提取RNA的方法是 ［2，3］ :将组织放入液氮冷冻后，用锡纸包裹，在研钵中充分研磨，研磨后用Trizol反复洗涤收集研磨的碎末并提取RNA。为了防止研磨过程中产热导致RNA降解，在操作中需要不断地在组织上浇洒液氮，以达到降温的目的，但是浇洒液氮的同时，组织块变的非常硬，研磨非常困难，而且研磨后组织碎末的收集也有一定的困难，由于研钵粗糙容易黏附一些组织，必须用Trizol反复清洗收集，容易造成所提取的RNA浓度太低，同时所需的器皿较多，操作复杂，在繁琐的实验操作中更容易接触RNA酶，导致RNA降解，为了解决上述问题，我们在实验中采取另外的方法提取RNA。
具体的实验方法如下:将组织标本离体后迅速加到液氮中，半小时后可在-70℃冰箱中保存，需要时可利用冰冻切片机切成7～10μm薄片，直接加到适量的Trizol中利用tip头稍加搅拌，然后根据Trizol kit的实验程序进行实验操作。此方法由于切片切的很薄无需研磨就可溶于Trizol中，实验操作非常简便，在操作中一直处于-20℃左右，可有效抑制RNA酶活性，防止RNA降解。此方法不仅适合于RNA的提取，同样也适合于DNA和蛋白质的提取。在肿瘤相关的研究中，利用此法提取DNA、RNA和蛋白质的同时，可以切一张7μm的切片进行HE染色，观察肿瘤组织和间质的情况，了解癌巢占组织的百分比，更精确更准确的分析实验结果，特别是在cDNA microarray和cDNA差异显示文库的研究中要求提取的RNA纯度更好，质量更高，利用这种方法结合激光捕捉微切割技术（laser-capture microdissecˉtion，LCM）可以较大程度的避免非肿瘤组织的干扰。当然，利用此方法提取RNA也要注意几个问题:每换1例组织块，要擦净切片刀，免得交叉污染;切下后的组织片要迅速放入Trizol中，防止RNA的降解;切片一般7～10μm，不宜太厚，免得不易溶解。总之，只要认真注意以上问题，会快速便捷得到高质量的组织RNA。
参考文献
1 J.萨姆布鲁克，D.W.拉塞尔.分子克隆实验指南.北京:科学出版社，2002，55.
2 Xu SH，Qian LJ，Mou HZ，et al.Difference of gene expression profiles between esophageal carcinoma and its pericancerous epithelium by gene chip.World J Gastroenterol，2003，9（3）:417-422.
3 Wang J，Chen.Screening and identification of gastric adenocarcinoma metastasis-related genes using cDNA microarray coupled to FDD-PCR.J Cancer Res Clin Oncol，2002，128（10）:547-553.
（收稿日期:2004-07-22）
（编辑海 霞）
ˇ 基金项目:辽宁省教委科技攻关项目资助（编号202203248）
作者单位:116027辽宁大连医科大学组织学与胚胎学教研室
大连医科大学附属医院胸外科