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支原体和衣原体已被证实是非淋菌性尿道（宫颈）炎（nongonococcal urethritis，NGU）的病原体，2000年全国报道该病的病例数在我国重点防治的8种主要性传播疾病中已升至第二位，比90年代增长了43.84%，广州报道的女性病例数已升至第一位，占8种主要性病的41.46% ［1］ 。
在普通门诊患者中，女性下生殖道标本支原体检出率很高，国外统计资料解脲脲原体（ureaplasma urealyticum，UU）为60%～80%，人型支原体（M.hominis，MH）为20%～30%，国内各地统计，UU大多为40%～50%左右，MH为20%左右 ［1］ 。说明支原体在泌尿生殖道，特别是女性生殖道的寄生及感染十分普遍。近年来在各级医疗单位中，某些重点科室（妇产科、皮肤性病科、泌尿科或男性科）已逐步将支原体列为常规的检查项目。
1 关于支原体检验问题
支原体的检查方法很多，有免疫荧光法、间接血凝法、DNA探针法、PCR法、培养法等，国家规定的“金标准”方法是培养法 ［2］ 。
迄今已知的支原体有150余种，其中与人类有关的有16种，从泌尿生殖道中分离的有8种。目前，多数研究者认为引起泌尿生殖道感染的至少有三种，即UU、MH及生殖支原体（M.genitalium，MG）。因此，在一般临床诊断上，比较完善的支原体常规检验，至少包括上述三种，但由于MG分离培养的难度很大（主要是生长十分缓慢，阳性标本最长需要35～140d），只能依靠PCR技术或DNA探针来检查，故常规的支原体检验目前只能做UU和MH两种 ［2］ ，如果为了节省，只做UU一种，则至少可能将1/3以上的支原体感染病例漏诊。
2 关于支原体致病问题
前己述及，支原体特别是UU的检出率很高，尤以女性为甚，在临床工作中发现有些支原体阳性者并无明显的感染症状，进一步研究证实支原体可以正常寄居于人体腔道的黏膜上，在肌体免疫力低下或黏膜受损时，寄居的支原体可以黏附并进入黏膜细胞，释放有毒的代谢产物如过氧化氢及氨等，引起细胞损伤，这时，支原体即发展成为致病菌 ［2］ 。有研究证实正常青春期少女下生殖道中UU检出率为5%～22%，MH检出率为8%～17% ［3］ ，正常成年女性检出率则更高。很多人认为当寄居的支原体发展成致病原时，其检出数量上应该有明显变化，量的研究证实了这一观点，并在90初建立了支原体数理测定法，如集落形单位（cfu）计数法、颜色改变单位（ccu）测定法、Dienes菌落染色法等 ［2］ ;这些经典的方法比较繁琐费时，法国梅里埃公司于90年代中期首先设计和推出了UU和MH的分离、鉴定、计数和药敏的一体化试剂盒，在支原体计数上，将UU和MH分为≥10 4 ccu/ml及<10 4 ccu/ml两个等级，简便实用，很快受到各国欢迎。1999年第7版《临床微生物手册》 ［4］ 明确提出:除正常时无菌的体液或组织标本可以不做支原体定量培养外，在非无菌部位（如下生殖道、下泌尿道）采取的标本检查支原体时，必须做定量培养，检出数量≥10 4 ccu/ml与感染有关，检出数量<10 4 ccu/ml，无重要意义。
国内很多医疗单位在定量培养上也作了大量临床观察，一般均认为上述定量结果与疾病临床表现是基本符合的，有的研究者已将≥10 4 ccu/ml定为“病理阈值”或“致病浓度”，并认为对支原体培养阳性者，不应一律认为其为“性病患者”，应结合病史、症状、体征及检测有无其它病原体进行综合判断 ［5］ 。
总之，泌尿生殖道标本作支原体检查，仅根据普通培养阳性就判定为NGU是不妥当的，只作普通培养不做定量培养也是不够完善的。
3 关于支原体耐药问题
支原体是没有细胞壁的微生物，对作用于细胞壁的抗生素（如青霉素类、头孢类）天然耐药，传统的治疗经验UU感染一般在大环内酯类、四环素类、喹诺酮类等抗生素中选择适当的药物，MH感染一般以林可霉素类为首选，大环内酯类对MH的效果很差。
近年来，支原体的耐药现象已在各地出现，很多原来敏感的抗生素，不同程度的产生耐药，久治不愈的病例屡见不鲜，几乎各省市都对支原体（特别是UU）的耐药现象做过研究报道。尽管各地报道的结果不完全一致，但敏感率不断下降的趋势是相同的。例如有人统计原来对UU抗菌活性最强的多西环素、司巴沙星，近年其敏感率已降至60%～70%，米诺环素敏感率也只有50%～60%，环西沙星、培氟沙星、氧氟沙星等敏感率降至20%～40%，治疗UU首选的大环内酯类药物中，敏感率降至60%～70% ［1］ 。
很多研究都发现，不同地区、不同医院、不同患者之间，支原体耐药现象往往有很大差异，耐药率高的药物一般是该地区、该医院或该患者用的较多的药物，而敏感都则常常是用的较少或未曾用过的药物，这一现象是可以说明:不做药敏试验，只根据传统的检验用药，有时不仅达不到治疗效果，反而会诱导耐药菌株的滋生和蔓延，其害不言而喻。
目前，绝大多数医疗单位都已采用分离、鉴定、计数、药敏一体化的测试版做支原体检验，充分体会到其简便、快捷、完善、规范的多重优越性，但仍有少数医师及患者主张先做单项分离培养，阳性者再作药敏，很多单位的经验证明这样做不仅达不到节省的目的，反而延误了出报告的时间（延迟24～28h）。而且UU在液体分离培养基生长后，分解尿素产生多量碱物质，pH达到8.0左右时会迅速死亡 ［6］ ，往往在培养基充分变红确定阳性时，已不能获得存活的支原体，药敏试验无法进行，所以应在分离培养同时作药敏试验。
4 关于标本采集与运送问题
标本采取与运送是否正确，对检验结果影响很大，国内权威机构的一次调查，目前各级医疗单位88%的性病检验标本由临床医师采取，经检查，采取标本的合格率仅为46%，看来这是影响检验正确性的重要因素之一。为了提高标本采取的合格率，应加强对临床医师的培训，有条件的单位可改由实验室人员采取 ［1］ 。
支原体在干燥和寒冷环境中会很快失去活性，由于其对上皮细胞有很强亲和力，采取时应尽可能多取细胞，标本中细胞的多少与支原体数量直接相关。采取的标本应立即接种在液体培养基，并在1h内送检验室，不可置普通冰箱或-20℃冰箱保存，检验室在收到标本后，应立即处理，并放置在35℃孵箱内孵育。
女性:必须取宫颈分泌物，暴露宫颈后，应先用棉拭子擦净宫颈口，用另一棉拭子伸入宫颈1～2cm，旋转360°，并停留20s以上，获取较多的上皮细胞。
男性:须取尿道分泌物，用男性拭子伸入前尿道2～4cm，旋转360°，并停留20s以上，根据病情需要，也可采取前列腺按摩液、精液等。
男、女尿液培养支原体阳性率明显低于尿道（宫颈）分泌物，一般不推荐使用尿液，如必须使用尿液，可留取早晨中段尿置无菌容器，高速离心后取沉淀物接种培养基。
病损组织渗透、渗出液取材时应先去除表面的污物、痂皮等，再用棉球擦抹病损表面取材，组织块标本应在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种，羊水标本处理方法与尿液相同。
各种标本均应避免被制菌剂、消毒剂、润滑剂污染。>48h不能接种的标本，宜放入-70℃以下环境或置液氮中保存，接种前，应在37℃水中快速融化。 ［1～3］
参考文献
1 徐文严.性传播疾病预防与治疗—2l世纪全国首届性传播疾病防治学术研讨会论文集.上海:第二军医大学出版社，2001，216.
2 时顺章.性传播疾病的实验室诊断.北京:科学出版社，2001，130.
3 王贤才.当代性病诊断与治疗.青岛:青岛出版社，2000，97.
4 Elmevw murray.Manual of Clinical Microbiology.7th Edition.ASM，1999，1120.
5 中华医学会.全国第三届微生物检验学术会议论文汇编.1998，109.
6 卫生部医政司.全国临床检验操作规程，第2版.南京:东南大学出版社，1997，315.
作者单位:201103武警上海总队医院检验科
（收稿日期:2004-09-17） （编辑吴 莹）