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【摘要】 目的 调查本区域内类风湿性关节炎(RA)与EB病毒感染的相互关系，并探求其免疫相关机制。方法 选取临床确诊的76例RA患者，检测其血清EB抗体(IgG/VCA)及INF-γ、IL-4、IL-8、ANA和外周血中CD3+、CD4+及CD8+；以40例体检健康者作为对照。结果 (1)RA患者血清中IgG/VCA阳性率显著高于对照组；(2)血清中INF-γ及IL-8平均含量均显著高于对照组；(3)RA患者血清中ANA阳性率高于正常对照；(4)与对照组相比，RA患者外周血中CD3+计数及CD4+/CD8+值降低、CD8+增高。以上差异均有显著性(P＜0.05)；(5)RA患者血清IL-4平均含量及外周血CD4+计数与对照组相比，差异无显著性(P＞0.05)。结论 EB病毒感染与RA发病可能有关，血清IgG/VCA检测可作为RA的辅助诊断指标之一；EB病毒可能致患者体内免疫调节异常，引发自身免疫的病理变化；RA患者体内存在Th1细胞与Th2细胞激活紊乱现象，并伴血清IL-8含量增高，可能与RA患者持续关节的炎性损伤有关。
【关键词】 类风湿；关节炎，EB病毒感染；Th细胞
目前类风湿关节炎的始动因子尚不明确，而病毒感染长期被认为与RA的触发有关［1～3］，其中EB病毒感染被大多数学者认为是在RA的发病、诊断及预后中作用明确的一种因素。为此，我们以本区域内76例类风湿患者为研究对象，探求相关的流行病学特征及其免疫学规律和机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2002～2004年于我院就诊的类风湿关节炎(RA)患者76例，均为临床确诊病例。男28例，女48例，年龄33～74岁；以体检健康者40例为对照组，男女各20例，年龄30～68岁。
1.2 试验方法 以ELISA法检测血清中IgG/VCA及血清中INF-γ、IL-4、IL-8的含量；以间接免疫荧光法检测其血清中ANA；以单克隆抗体标记的间接ABC法检测外周全血中CD3+、CD4+及CD8+。
1.3 仪器与试剂 DNEXT(MRX 型)酶标仪由美国生产；BECKMAN-COULTER array360型特定蛋白分析仪；EB病毒抗体（IgG/VCA）试剂由上海科华生物工程有限公司生产；INF-γ、IL-4 ELISA 试剂盒(美国进口分装96T)(北京邦定生物技术公司)；IL-8 ELISA试剂盒(BIOSORUCE 公司生产，北京环亚生物技术公司分装出品)；RF免疫比浊试剂由BECKMAN-COULTER公司生产；ANA试剂由欧盟免疫检测试剂公司出品；CD3+、CD4+及CD8+试单克隆抗体标记血球由苏州医学院血液细胞研究所提供。
1.4 统计学方法 平均含量均值比较用t检验；阳性率比较用χ2检验。
2 结果
2.1 血清IgG/VCA检测结果 见表1。
表1 血清IgG/VCA检测结果 （略）
2.2 血清中INF-γ、IL-4、IL-8、RF检测结果 见表2。
表2 血清中INF-γ、IL-4、IL-8、RF检测结果 (略)
2.3 血清中ANA检测结果 见表3。
表3 血清中ANA检测结果 （略）
2.4 外周血中CD3+、CD4+及CD8+检测结果 见表4。
表4 外周血中CD3+、CD4+及CD8+检测结果 略
2.5 RA组患者血清EB病毒抗体(IgG/VCA)与RF检测阳性率比较 见表5。
表5 RA组患者血清EB病毒抗体(IgG/VCA)与RF检测阳性率比较 略
3 讨论
已有的大量研究资料表明［1～3］，RA与EB病毒感染有关。一般认为［4］，EB病毒是RA的始动因子，与类风湿沉淀素(rap)产生直接相关。本研究的76例RA患者血清中IgG/VCA阳性率为43.4%,显著高于对照组。提示，本区域内RA发病与EB病毒感染可能显著性相关。也有研究发现［5，6］，RA患者血、滑液及滑膜标本中EBV-DNA的阳性检出率与对照组差异无显著性。说明RA可能不是由EB病毒直接感染关节滑膜所致［7，8］。
在研究中，我们检测了检样血清中ANA，结果表明，RA患者血清中ANA阳性检出率显著高于对照组。表明，RA病理机制中包括自身免疫性损伤。与之相关的研究证明［9～11］，EB病毒糖蛋白gp110的α螺旋区与自身抗原多肽DW4有相似的片段，EB病毒的感染可因两种抗原的交叉性诱导自身免疫反应；EB病毒衣壳抗原(EB-VCA)的某些多糖成分与HLA-DR4的部分结构相似，而RA患者滑膜内衬细胞表面有丰富的HLA-DR4表达，故RA患者体内被EB病毒致敏的T淋巴细胞便可与之发生免疫反应而造成滑膜的免疫损伤及相应的临床症状；EB病毒与Ⅱ型胶原蛋白也有相似的抗原决定簇，EB病毒也可通过分子模拟，造成RA患者关节软骨和骨的破坏。提示，EB病毒感染可通过自身免疫机制触发RA。
近年来，T细胞亚群和细胞因子在自身免疫性疾病中的作用日益受到重视。我们在研究中检测了受试者的CD3+、CD4+及CD8+和血清中INF-γ、IL-4、IL-8。显示，T细胞亚群紊乱，表现为CD8+增高、CD3+及CD4+/CD8+值降低，CD4+细胞比率虽没有显著变化，而CD4+细胞按其分泌细胞因子及效应功能不同分为Th1和Th2两个亚群，Th1主要分泌INF-γ、IL-2等，介导细胞免疫应答；Th2主要分泌IL-4、IL-5、IL-6等，而介导的是体液免疫应答。我们发现，RA患者血清中INF-γ水平显著增高，IL-4水平没有显著变化。表明，RA患者体内存在Th1和Th2激活比例失衡现象，表现为Th1细胞占优势而缺乏Th2细胞来下调炎性反应。提示，被公认为免疫复合物型的变态反应的RA，患者体内存在T细胞亚群紊乱和Th1/Th2的平衡偏离，这与临床表现的慢性、持续性炎症有关。IL-8是一种白细胞趋化因子，它趋化中性粒细胞至炎症局部并增强其功能。我们发现RA患者IL-8显著增高，其机制与趋化中性粒细胞至急性炎症滑膜局部并增加该细胞的活性而增强其破坏作用有关［12］。
工作中我们常发现，作为RA标志物的RF检出率往往较低。本研究中，RA患者的血清RF阳性增高率也仅为263%（20/76），显著低于血清中EB病毒抗体的阳性检出率。提示，血清中EB抗体（IgG/VCA）的检测对RA的诊断有一定临床辅助意义。
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作者单位： 650032 云南昆明，成都军区昆明总医院检验科
(编辑：晓 青)