ERα、ERβ及C-erbB-2在乳腺癌中的表达及临床意义

　   乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康。近年来其发病率在全世界范围内呈上升趋势，美国近年来女性乳腺癌发病率以年均3%的速度增长，我国20世纪80年代末，每年新发病例数约3万例左右，但到90年代初则猛增至6.7万例［1］，且患者趋于年轻化。对关系到乳腺癌发生、发展、治疗及预后指标的研究则成为热点。迄今为止，ER、PR和C-erbB-2联合检测用来指导乳腺癌治疗及评价预后已成为常规。但随着ERβ的出现，促使我们对雌激素受体的生物学功能进行重新评估。本文就ER
α、ERβ及C-erbB-2在乳腺癌中的表达情况及临床意义进行初探。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料  选取新疆医科大学附属肿瘤医院2003年1～12月1～3期原发性乳腺癌术后标本133例，患者术前均未接受过化疗及内分泌治疗，均为女性，年龄28～78岁，中位年龄53岁。选取乳腺纤维腺瘤29例做良性对照。

　　1.2  方法  所选标本均为福尔马林固定，石蜡包埋，常规切片HE染色及两步法免疫组织化学染色，ERα、ERβ、C-erbB-2抗体购自北京中杉金桥公司。实验步骤严格按照试剂说明书操作。

　　2  结果

　　2.1  乳腺癌与乳腺良性病变中ERβ的表达情况  ERβ在乳腺癌与乳腺良性病变中的表达率分别为609%(81/133)和828%（24/29），二者具有统计学差异（χ2=499，P=0026）。

　　2.2  乳腺癌与乳腺良性病变中ERα的表达情况  ERα在乳腺癌与乳腺良性病变中的表达率分别为549%(73/133),621%(18/29),二者无统计学差异（χ2=050,P=0480)。

　　2.3  ERβ与乳腺癌临床病理因素的关系  见表1。

　　表1  ERβ与乳腺癌临床病理因素的关系　略

    在乳腺癌组织内，ERβ在腋窝淋巴结转移各组中表达有差异（χ2=1089,P=005)，ERβ的表达在其他临床病理指标中未见显著性差异（P＞005)。

　　2.4  乳腺癌组织中ERβ与C-erbB-2的表达关系  见表2。

　　表2  乳腺癌组织中ERβ与C-erbB-2的表达关系　略

    ERβ在乳腺癌C-erbB-2阳性组中的表达上调，与乳腺癌C-erbB-2阴性组差异有显著性。

　　3  讨论

　　乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，内源性雌激素在乳腺癌的发生中起主要作用，因此，雌激素受体阻断剂有针对性的治疗意义。

　　在临床上，雌激素拮抗剂已构成了激素依赖型乳腺癌的主要治疗方案，ER阳性患者预后较好的理念也广泛被接受。但对一部分ER和PR阳性、C-erbB-2阴性、腋窝淋巴结阴性的患者，经过目前规范的治疗，包括内分泌治疗后，仍有复发和转移，约40%ER阳性的乳腺癌患者对内分泌治疗原发抗拒，10%ER阴性乳腺癌对内分泌治疗有效［2］，这就给我们提出这样一个问题：内分泌治疗时仅考虑ER、PR和C-erbB-2表达情况是否合理？

　　1996年，Kuiper［3］在大鼠前列腺和卵巢cDNA文库中成功地克隆出一种新的雌激素受体，命名为ERβ（estroen receptor-β），并将经典ER称之为ERα之后,ERβ很快在人组织中被克隆。2001年，Skliris［4］第一次使用单克隆抗体ERβ14C8，在乳腺癌石蜡切片中成功地检测到ERβ蛋白的表达，ERβ在人乳腺组织中的发现，使我们需要重新评估雌激素受体的生物学功能及其在乳腺肿瘤发生、发展及耐药机制方面的意义。

　　3.1  ERα和ERβ的结构域及特性比较  ERα和ERβ同属甾体激素受体家族成员，均为配体依赖的反式转录调节蛋白，含有5个区，从N端到C端依次为A→F区。它们有3个基本的功能区域。（1）氨基端A、B区，含有调节蛋白转录功能的区域，它是受体的两个转录激活区之一即AF1，具有细胞专一的非配体依赖的激活某些启动子功能。（2）中央C区，是DNA结合区域，包含有2个能与DNA结合的锌指结构，与基因调控区域的特定DNA序列-激素应答元件（hormone response element,HRE)特异地结合。（3）D区，为铰链区。（4）羧基端的E区，是激素结合区域，通过与细胞专一因子相互作用，区分雌激素激活剂和雌激素拮抗剂。（5）F区，是AF-2所在区，其转录激活功能是配体依赖的ERα和ERβ两个受体的基因，均含有8个外显子。两种受体C、E区具有高度的同源性，分别为96%和58%，而A（B）、D、F区保守性差。ERα定位于第6染色体的长臂，ERβ定位于染色体14q22～24，说明每种受体均为独立的基因产物，另外，ERα和ERβ组织分布不一，与配体结合特性不同［5］，提示他们可能具有不同的生物学作用。

　　3.2  ERβ在乳腺癌发生中的作用  Gustafsson［6］为了明确ERβ在乳腺癌中的作用，设计了一种ERβ基因失活即ERβ基因敲除鼠，显示其乳腺上皮异常增生，Ki67过表达。随着鼠年龄增大，出现严重的囊性乳腺病变，因此认为ERβ对正常乳腺有保护作用。Roger［7］通过检测正常及原位乳腺癌组织中ERα和ERβ及其与增殖性抗原Ki67的关系，来显示ERβ在乳腺癌发生中的作用。检测到正常乳腺组织ERβ阳性细胞高达85%，在非典型增生及原位癌组织中明显下降，而ERα明显升高。ERβ的这些改变，提示ERβ在致癌过程中的决定性作用［8］。本组病例研究结果与文献报道相符，在乳腺良恶性病变组织中ERβ阳性表达率分别为24/29（828%)、81/133(610%)，二者差异具有显著性（P＜005)，由此可推测ERβ的下调与乳腺组织恶性转化有一定联系，但这种变化是乳腺癌发生的原因还是其结果，还需进一步证明。

　　3.3  ERβ、C-erbB-2与三苯氧胺耐药问题  内源性雌激素在乳腺癌的发生中起重要作用，因此，雌激素受体阻断剂有针对性的治疗意义。而内分泌治疗耐药是影响乳腺癌治疗效果的重要因素。三苯氧胺临床应用广泛，对其耐药机制的研究也成为热点，一般来讲，ER（+）者内分泌治疗疗效好，ER（-）者内分泌治疗疗效差，但ER（+）组患者中有40%对内分泌治疗抵抗。新的研究显示，ERβ可能通过干扰抗雌激素剂对肿瘤细胞的抑制作用而和临床三苯氧胺耐药有关。Spires［9］利用RT-PCR方法检测三苯氧胺治疗敏感和耐药两组患者的ERβ mRNA表达，结果耐药组ERβ mRNA明显升高，其他研究也显示ERβ阳性细胞对三苯氧胺不敏感，甚至还依赖三苯氧胺生存。上述结果显示ERβ可能对三苯氧胺耐药的形成起重要作用，但还不能确定这种表达上调是导致耐药的原因还是结果，需要进一步研究。

　　3.4  ERβ与乳腺癌的预后  有研究认为，ERβ（+）与肿瘤体积小（直径＜2cm）、组织分化高、无瘤生存期长有关，ERβ（-）乳腺癌与预后差有关［5］。大部分临床研究结果显示，不论是绝经前还是绝经后，也不论有无淋巴结转移，ERα阳性肿瘤患者较ERα阴性患者预后好，无病生存期和总存活期长。有关ERβ在乳腺癌中是否能作为一个预后指标尚不清楚。ERβ在乳腺癌中的预后作用有待进一步研究。无论如何，联合检测ERα、ERβ等指标对探讨研究乳腺癌发生、发展、耐药机制有重要的临床意义。

　　3.5  C-erbB-2在乳腺癌中的临床意义  关于C-erbB-2基因的表达与乳腺癌的关系，目前已取得了相对一致的研究结果，即C-erbB-2过表达者预后相对较差，作为预后评价因素，C-erbB-2过表达与淋巴结转移具有同等重要作用［10］。有研究显示，C-erbB-2表达程度与肿瘤的组织学分级密切相关，组织学Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患者C-erbB-2阳性率表达差异有非常显著性（P＜001）。淋巴结转移数目与C-erbB-2的表达呈正相关（P＜005），另外，即使同为阳性表达，但中高表达程度不同的乳腺癌其15年远期预后也不同［11］。

　　【参考文献】

　　1  张忠清，李广灿，叶召.乳腺癌当前流行趋势分析.中国肿瘤,2000,9(10):454-455.

　　2  Osborne CK,Yachinowiz MG,Knight WA,et al.The value of estrogen and progesterone receptors in the treatment of breast cancer.Cancer，1980,46:2884.

　　3  Kuiper GG,Enmark E,Pelto Huikko M,et al.Cloning of a novel receptor erperssed in rat prostate and ovary.Proc Natl Acad Sci USA,1996,93(12):5925-5930.

　　4  Skliris GP,Carder PJ,Lansdown MR,et al.Immunohistochemical detection of ERβ in breast cancer:towards more detailed receptor profiling.Br J Cancer,2001,84(8):1095-1098.

　　5  Knowlden JM,Gee JM,Robertson JF,et al.A possible divergent role for the oestrogen receptor alpha and beta subtypes in clinical breast cancer.Int J cancer,2000,89(2):209-212.

　　6  Gustafsson JA,Warner M.Estrogen receptor beta in the breast:role in estrogen responsiveness and development of breast cancer.J Steroid Biochem Mol Biol,2000,74(5):245-248.

　　7  Roger P,Sahla ME,Makela S,et al.Decreased expression of estrogen receptor beta protein in proliferative preinvasive mammary tumor.Cancer Res,2001,61(6):2537-2541.

　　8  Leygue E,Dotzlaw H,Watson PH,et al.Altered estrogen receptor alpha and beta messenger RNA expression during human breast tumorigennesis.Cancer Res,1998,58(15):3197-3201.

　　9  Speirs V,Parkes AT,Kerrin MJ,et al.Coexpression of estrogen receptor alpha and beta:poor prognostic factor in human breast cancer.Cancer Res,1999,59:525-528.

　　10  Slamon DJ,Clark Gm,Wong SG,et al.Human breast cancer correlation of relapse and survival with amplification of the Her-2/neu oncogene.Science,1987,235(4785):177-182.

　　11  赵晶，赵广才，刘君.C-erbB-2在乳腺癌中的表达及其15年远期临床意义的分析.肿瘤防治研究,2005,32(3):187-188.

　　作者单位： 830011 新疆乌鲁木齐，新疆医科大学附属肿瘤医院病理科

　　(编辑：建  伟)