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消肿止痛膏是由大黄、黄柏、三七等11味中药制成的纯中药复方制剂，具有消肿止痛、活血祛瘀的作用，多用于治疗各种外伤所致软组织损伤、骨折、脱位等病理变化而引起的局部肿胀、疼痛、功能受损等症状，是在师承古方，总结多年临床经验的基础上研制而成的疗效确切的医院制剂。为了有效控制其内在质量，笔者对其中的大黄、黄柏、三七进行了薄层鉴别，取得满意效果，为控制消肿止痛的质量提供了依据。
1 仪器、药品与试剂
紫外光灯（上海顾村仪器厂）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；盐酸小檗碱、大黄酚、大黄素、大黄酸、人参皂苷Rb1,Rg1及三七皂苷R1标准对照品均由中国药品生物制品检定所提供；药材黄柏、大黄、三七等11味均由本市药品检验所鉴定为正品。所用试剂均为分析纯。
2 实验研究
2.1 成分预试验
2.1.1 皂苷类化合物的预试验 取本品5g，加水20ml热水浸30min，放冰箱冷藏4h后，滤过，取滤液适量，塞紧，用力振摇1min，产生持久性泡沫。结论：本品中可检出皂类成分。
2.1.2 糖苷类化合物的预试验 取本品5g，加水40ml沸水浴中热浸30min，滤过，滤液放冰箱冷藏4h后，滤过，取滤液1ml，加入5%α-萘酚乙醇溶液3滴，摇匀，沿试管壁缓缓加入浓硫酸0.5ml，在二界面处形成紫红色环。结论：可检测出糖苷类化合物成分。
2.1.3 生物碱类化合物的预试验 取本品5g，加稀醋酸20ml，水浴加热20min，滤过，滤液于冰箱中冷藏4h，滤过，取滤液1ml，加碘化铋钾试液2滴，显红棕色。另取滤液1ml加碘化汞钾试液2滴，生成淡黄色沉淀。结论：可检出生物碱类化合物成分。
2.1.4 蒽醌类化合物的预试验 取本品5g加甲醇30ml，回流1h，放冰箱内冷藏4h后，滤过，滤液内加10%氢氧化钠溶液5滴,溶液呈红色。结论：本品中可检出蒽醌类化合物成分。
2.2 薄层层析鉴别试验
2.2.1 黄柏的薄层层析鉴别 供试品溶液制备：取本品10g，加甲醇50ml，搅匀，加热回流1h，密塞，放入冰箱冷藏4h后，过滤，滤液作为供试品溶液。
对照品溶液制备：取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照品溶液制备：取缺黄柏的本品，照供试品溶液制备法制备。
薄层层析鉴别试验：照薄层色谱法［1］（《中国药典》2000版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10∶7∶1∶1）为展开剂，展开，取出晾干，置紫外灯光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照品呈负反应，无干扰（图1）。
2.2.2 大黄的薄层层析鉴别 供试品溶液制备：取鉴别2.2.1项下的供试品溶液25ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加盐酸1ml置热水浴中加热30min，立即冷却，用乙醚提取2次，每次10ml合并乙醚提取液，挥去乙醚残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液制备：取大黄素、大黄酚、大黄酸对照品，分别加甲醇制成每1ml中各含1.5mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照品溶液制备：取缺大黄的本品，照供试品溶液制备法制备。
薄层层析鉴别试验：照薄层色谱法［1］（《中国药典》2000版一部附录VIB）试验，吸取上述四种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（30℃~60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）为展开剂展开，取出晾干，置紫外灯光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照品呈负反应，无干扰（图2）。
2.2.3 三七的薄层层析鉴别 供试品溶液制备：取本品10g加50ml石油醚（30℃~60℃），微热使软化，超声处理20min，弃去石油醚，挥干石油醚，药渣加水饱和的正丁醇40ml，超声处理20min，放冰箱冷藏4h，迅速过滤，收集滤液，正丁醇液用氨水30ml洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液制备：取人参皂苷Rb1,Rg1及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2.5mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照品溶液制备：取缺三七的本品，照供试品溶液制备法制备。
薄层层析鉴别试验：照薄层色谱法［1］（中国药典2000版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点。置紫外光灯（365nm）下检视，显相同的荧光斑点。阴性对照品呈负反应，无干扰（图3）。
图1－图3 （略）
3 讨论
本文对消肿止痛膏质量中定性鉴别进行了研究，采取样品、阴性对照品及化学对照品，在同一条件下进行比较，结果表明此方法专属性较强，重现性好，空白无干扰，方法简便，易于掌握。
为建立本品的薄层色谱试验，在其试验的方法上，着重考虑样品预试验、展开系统、展开时的温度和相对湿度，以利确定重复性好、专属性强的方法。本文的薄层色谱试验，实验室温度在14℃~30℃；相对湿度在60%~85%范围内为宜。
由于本品药味较多，成分比较复杂，本文只对其进行了质量定性分析，其定量分析有待进一步探讨研究。
【参考文献】
1 国家药典委员会.中国药典.北京：化学工业出版社，2000，37-38.
作者单位： 425000 湖南永州，永州市中医院
（编辑：宋 青）